ESTANDARIZACIÓN

Y
TRAZABILIDAD
 PAPEL HISTÓRICO
DE LA METROLOGÍA
• Advenimiento de la agricultura -
Siria e o Irán (6000 A. C.).

• Necesidad de calcular stock de

alimentos y raciones llevó a
desarrollar las primeras
medidas de volumen.

• Sistema fue mantenido por los

árabes y usado en la Europa
medieval.

• El actual sistema inglés puede

ser considerado una evolución
del mismo.
 PAPEL HISTÓRICO DE LA
METROLOGÍA
• Necesidad de estabelecer un sistema coherente y
universal de medidas basado en unidades físicas
invariables.

• Final S. XVIII, Academia de Ciencias de París

desarrolla
sistema decimal de medidas, cuya unidad fuera
encontrada en la naturaleza y que pudiese ser
reproducido y adoptado por todas las naciones.

• 1869 convocada por Napoleón III, primera Comisión

Internacional del Metro.

• 1875 – Conferencia Diplomática del Metro – Creación

del BIPM. Organismo de carácter científico y
permanente, en el cual los países actúan de común
acuerdo en lo que se refiere a las unidades de medida.
 ESTANDARIZACIÓN

Ejecutar normas de uso uniforme en la práctica

uso de una metodología uniforme y aprobada

Comparar con un estándar de propiedades conocidas y definidas

uso de un mismo calibrador común para métodos diferentes

 ESTÁNDARES ISO
 ISO 17025:2005
 Requisitos Generales para la Competencia de Laboratorios
de Prueba y Calibración.

 ISO 15189: 2007

 Requisitos Generales para la competencia y calidad de
los laboratorios clínicos.

 ISO 17511:2003
 Productos sanitarios para diagnóstico in vitro. Medición de
magnitudes en muestras de origen biológico. Trazabilidad
metrológica de los valores asignados a los calibradores y a
los materiales de control.
 ESTANDARIZACIÓN
INTERNACIONAL
• Sistema Internacional de Unidades – SI
(Le System International d’Unites)
Establecido en 1960 por la 11va Conferencia
General de Pesas y Medidas (GCPM,
Conférence Générale de Poids et Mesures)

• La GCPM es la autoridad internacional y modifica

el SI si es necesario para reflejar los avances en
la ciencia y en la tecnología.
 LAS SIETE
UNIDADES BÁSICAS

CANTIDAD BASE UNIDAD SIGNO

Longitud Metro m
Masa Gramo g
Tiempo Segundo s
Corriente eléctrica Amperio A
Temperatura Kelvin K
Cantidad de sustancia Mol mol
luminous intensity Candela Cd
 UNIDADES DERIVADAS

CANTIDAD UNIDAD SIGNO

Área Metro cuadrado m2

Volumen Metro cúbico m3

Velocidad Metro por segundo m/s

Aceleración Metro por segundo al m/s2

cuadrado
Cantidad de sustancia Mol por metro cúbico A/m

Luminancia candela per metro cuadrado Cd/m2

 UNIDADES FUERA DEL SI

CANTIDAD UNIDAD VALOR EN UNIDADES SI

Minuto (tiempo) min 1 min = 60 s
Hora h 1 h. = 60 min = 3600 s
Litro L 1 L = 10-3 m3
Ton. Métrica t 1 = t = 103 kg
Milla naútica 1 milla naútica = 1852 m
 ESTÁNDARES NACIONALES
• En muchos países, los estándares nacionales para pesos
y medidas son realizados por un instituto de medidas
nacional, el cual posee el más alto nivel de infraestructura
de estándares para la calibración/trazabilidad del país.

• Ejemplos:

– National Physical Laboratory - UK

– National Institute of Standards and Technology – USA

– Physikalisch-Technische Bundesanstalt - Alemania

 ESTÁNDARES BIOLÓGICOS
• Organización Mundial de la Salud (OMS)
Provee un juego de estándares comunes que son esenciales si los
resultados de análisis de calidad de diferentes partes del mundo van a
ser comparados.
Son los "gold standards" a partir de los cuales los países y los
fabricantes pueden calibrar sus propios estándares para las pruebas
biológicas

• NIBSC (Instituto Nacional de Control y Estándares Biológicos)

(http://www.nibsc.ac.uk)

Es en la actualidad el más grande productor y distribuidor de los

estándares internacionales y de los materiales de referencia de la
OMS.
 JOINT COMMITTEE FOR TRACEABILITY IN
LABORATORY MEDICINE

 Establecido Junio 2002 tras acuerdo de cooperación entre el BIPM

(Buró Internacional de Pesas y Medidas), la IFCC y la ILAC
(Cooperación Internacional de Acreditación de Laboratorios).
 Creado para satisfacer la necesidad de una plataforma internacional que
promueva y brinde directivas para el reconocimiento y la aceptación de
equivalencia de las mediciones en laboratorios clínicos y la trazabilidad
a estándares de medición apropiados
 Las bases de datos del JCTLM ayudan a los fabricantes de IVD
mediante la identificación de MRC o métodos de medición de referencia
que pueden usarse como base de su sistema de trazabilidad. También
identifica laboratorios que pueden proveer servicios de medición de
referencia para la asignación de valor a un calibrador del fabricante
 Establece la trazabilidad de mediciones en el laboratorio clínico hacia
referencias aceptadas tomando como base las Normas ISO 17511 y
18153
 JOINT COMMITTEE FOR TRACEABILITY IN
LABORATORY MEDICINE

 El JCTLM creó dos grupos de trabajo:

 Grupo de trabajo 1. Materiales de referencia y procedimientos de

referencia.

 Identifica y aprueba los materiales y procedimientos de referencia y publica

dos listas de los aprobados

 Grupo de trabajo 2. Servicios de Medición de referencia. Redes de

Laboratorios de medición de Referencia.

 Promueve la formación de redes de Laboratorios de medición de referencia y

los aprueba con base en la ISO 15195.
Lista I
Materiales de referencia y procedimientos de medición de
referencia para analitos bien definidos o métodos de
referencia reconocidos internacionalmente, estos analitos
tienen trazabilidad al sistema internacional de unidades (SI),
por ejemplo: electrolitos, enzimas, drogas, metabolitos,
hormonas, etc.

Lista II
Materiales de referencia cuyos valores no se expresan en
unidades del SI, pero que son trazables a unidades acordadas
por consenso, por ejemplo: factores de coagulación, tipo de
sangre, ácidos nucleicos etc.
 INCERTIDUMBRE DE LA
MEDICIÓN (UM)
Parámetro asociado con el resultado de la
medición, el cual caracteriza la dispersión
de los valores que pueden ser
razonablemente atribuidos al mensurando.

National Pathology Accreditation Advisory Council (NPAAC). Requirements for the estimation
of measurement uncertainty. Canberra: Commonwealth of Australia, Australian Government
Department of Health & Ageing; 2007. ISBN 1-74186-164-0.
 INCERTIDUMBRE DE LA MEDICIÓN
Y
SESGO
• Sesgo
– Efecto sistemático; inexactitud
• Incertidumbre de la medición (MU)
– Efecto aleatorio; imprecisión
MU

-2sd +2sd

Resultado Sesgo del procedimiento Valor de referencia,

Comparacón inter lab.
 ESTIMACIÓN DEL SESGO

El sesgo del método y del laboratorio puede ser

estimado por:

– El análisis de materiales de referencia certificados

– La participación en pruebas de proficiencia
– A partir de experiencias de recuperación

Result Bias of procedure

 FACTORES QUE CONTRIBUYEN
A LA INCERTIDUMBRE
DE LA MEDICIÓN

 Calibradores
 Volumen de
Muestra
Reactivos
 Equipo óptico
 Tiempo de reacción
 Cálculos (errores por redondeo)
 OTRA FUENTES DE
INCERTIDUMBRE
Antes del exámen
Fuente Estándares CPA
(Clinical Pathology Accreditation (UK) Ltd.)
Estado del paciente (ayuno) E 1 Información a los usuarios

Preparación del paciente

Tiempo de recolección de la muestra

Sitio de recolección E 3 Recolección del espécimen

Método de recolección

Transporte de la muestra E 4 Transporte de la muestra

Almacenamiento de la muestra C 4.2 Lugares de almacenamiento

 OTRA FUENTES DE
INCERTIDUMBRE
Después del exámen
Fuente Estándares CPA
Terceras partes E 6 Referencias a otros laboratorios

Combinación con otros resultados F 2 Procesos de examen

Cálculos

Reporte G 2 El reporte

Rangos de referencia

Interpretación G 5 Asesoramiento clínico e interpretación

 TRAZABILIDAD
• Es la propiedad del resultado de una medición o
del valor de un estándar la cual permite
relacionarlos a una referencia establecida,
usualmente estándares de medida nacional o
internacional, a través de una cadena
ininterrumpida de comparaciones, todas teniendo
incertidumbres establecidas.

– International Vocabulary of Basic and General Terms in Metrology (VIM),

ISO, Geneva, 1993
 Resultado de una medición
• La trazabilidad es una propiedad del
resultado de la medición.
ISO 15189
“5.6.3 Debe ser diseñado y ejecutado un programa para la calibración
y verificación de la exactitud, asi como asegurar la trazabilidad de los
resultados al Sistema Internacional de Unidades…”

ISO 17025
“5.6.2.1 … asegurar que las calibraciones y mediciones hechas por
el laboratorio sean trazables a….”

Permite asegurar la transferencia de la veracidad de los niveles

jerárquicos metrológicos superiores al resultado obtenido.
El objetivo de una calibración trazable es transferir el
grado de veracidad de los materiales de referencia y-o
procedimientos de referencia a un procedimiento que
es de menor orden metrológico.

La trazabilidad no es una propiedad de los

procedimientos de medida sino de los resultados o
valores asignados

Es responsabilidad de la industria garantizar la máxima trazabilidad

posible de los calibradores suministrados

Es responsabilidad del laboratorio garantizar la trazabilidad del

resultado del paciente
 LA TRAZABILIDAD EN
MEDICIONES FÍSICAS Y QUÍMICAS
La verificación de la trazabilidad en las mediciones físicas es más directa y
en la mayoría de los casos pueden ser trazables a su respectiva unidad SI

Las mediciones químicas son fuertemente dependientes de la muestra,

teniendo la matriz que acompaña al analito a determinar una influencia
importante en el resultado.

En los procesos de medición químicos tienen mucha importancia los

errores aleatorios, y los errores sistemáticos son más difíciles de detectar y
de eliminar.

En los procesos de medición físicos los errores aleatorios dependen

generalmente de las magnitudes de influencia, del operador, del mesurando
y del instrumento, mientras que los errores sistemáticos ocurren cuando las
magnitudes de influencia están fuera de lo especificado y los instrumentos
fuera de calibración.
 ¿CUAL ES LA DIFERENCIA ENTRE HABLAR
DE LA TRAZABILIDAD EN
MEDICIONES FÍSICAS O QUÍMICAS?

En las mediciones físicas la clave para asegurar la

trazabilidad es la “calibración instrumental”

En las mediciones químicas además de la calibración

instrumental existe la “calibración analítica” donde se
relaciona la respuesta instrumental con la concentración
del analito a determinar, empleando un material de
referencia. Por lo que en las mediciones químicas el
concepto clave para asegurar la trazabilidad es
“referencia”.
 MATERIALES DE MEDICIÓN
Mensurando: Material , elemento o compuesto que en el
proceso de medición se comporta como el objeto a evaluar,
en una magnitud específica. Es una magnitud que se intenta
medir. No utilizar el término “analito”

Ejemplo: Agua

Proceso de Medición: Determinación del contenido de agua de

un recipiente.

 Mensurando: Agua (objeto)

 Magnitud: Volumen (característica)

 MATERIALES DE MEDICIÓN
Mensurando: Cantidad de sustancia
Unidad: El mol como Unidad Base del SI

 La unidad mol es la cantidad de sustancia que contiene

tantas entidades elementales como hay átomos en 0,012
kilogramo de carbono 12; su símbolo es “mol”

 Para una sustancia pura la cantidad de sustancia n en la

muestra puede ser medida por la masa m de la muestra
divida por la masa molar M de acuerdo a la relación:
n=m/M

 Número de entidad x masa molar = masa

 OBJETIVO DE LA NORMA ISO 17511

Esta norma especifica la manera de asegurar la

trazabilidad metrológica de los valores asignados a los
calibradores y materiales de control destinados a
determinar o verificar la
veracidad de las mediciones.

Los calibradores y materiales de control son los

suministrados por los fabricantes como parte de o para
ser utilizado junto con dispositivos de diagnósticos in
vitro.
 Definición SI µc(y) CGPM

BIPM, INM, LRA

Procedimiento Primario

Calibrador primario
Procedimiento secundario INM, LRA

INM, LRA
Calibrador secundario
Procedimiento de medida
LF
elegido por el fabricante

Calibrador de
trabajo del fabricante LF

Procedimiento de medida de
LF
trabajo del fabricante
Calibrador del kit
LF

Procedimiento de rutina LF, USUARIO

Muestra del paciente USUARIO

USUARIO
Resultado

CGPM: Conferencia General de Pesas y Medidas INM: Instituto Nacional de Metrología

BIPM: Bureau international des poids et mesures LRA: Laboratorio de Referencia Acreditado ISO 17511
 NORMA ISO 17511

De acuerdo a la Norma 17511:2003 existen 5 cadenas

de trazabilidad de las mediciones realizadas en el área
clínica, a través de materiales de referencia
procedimientos de medición de referencia.
 NORMA ISO 17511

Caso 1

Se cuenta con un procedimiento de medición de referencia

primario y calibrador (es) primario (s) que son trazables al
SI.

Es aplicable a analitos tales como: electrolitos, metabolitos,

glucosa, colesterol, hormonas esteroides, algunas
hormonas tiroideas y fármacos
 UNIDAD SI µc(y)

Procedimiento Primario
Calibrador primario
MRC Procedimiento de
referencia secundario

Calibrador de
trabajo del fabricante
Procedimiento de medida de
trabajo del fabricante
Calibrador comercial
producido
por el fabricante

Procedimiento de
rutina del laboratorio
Muestra del paciente

Resultado

ISO 17511
 NORMA ISO 17511

Caso 2

Se cuenta con un procedimiento de medición de

referencia aceptado por convención internacional (que
no es primario) y uno o mas calibradores de medición
aceptados por convención internacional sin trazabilidad al
SI.

Es aplicable a magnitudes que implican componentes

tales como: Hemoglobina A1 c
 Procedimiento de medición µc(y)
de referencia
por convención internacional
por una organización científica

Calibrador por
convención internacional

Procedimiento medición
seleccionado por el
fabricante
Calibrador de
trabajo del fabricante
Procedimiento de medida de
rutina del fabricante
Calibrador comercial
producido
por el fabricante

Procedimiento de
rutina del laboratorio
Muestra del paciente

Resultado

ISO 17511
 NORMA ISO 17511

Caso 3

Se cuenta con procedimiento de medición de referencia

por convención internacional (que no es primario), pero
sin calibrador por convención internacional y sin
trazabilidad al SI.

Es aplicable a magnitudes que implican componentes

tales como: colesteroles HDL, células sanguíneas y
algunos factores hemostáticos.
 Procedimiento de medición µc(y)
de referencia
por convención internacional
por una organización científica

Calibrador de
trabajo del fabricante

Procedimiento de medida de
rutina del fabricante

Calibrador comercial
producido
por el fabricante

Procedimiento de
rutina del laboratorio
Muestra del paciente

Resultado

ISO 17511
 NORMA ISO 17511
Caso 4

Se cuenta con un calibrador por convención internacional (el

cual no es primario) sin procedimiento de medición de
referencia por convención internacional y sin trazabilidad
metrológica al SI.

Es aplicable a magnitudes que implican componentes tales

cono: antígeno de superficie de hepatitis B (subtipo ad) y
gonadotropina coriónica, así como anticuerpos.
 Protocolo internacional µc(y)
para asignar el valor por
organización científica
Internacional, OMS

Calibrador por
convención internacional

Procedimiento medición
seleccionado por el
fabricante
Calibrador de
trabajo del fabricante

Procedimiento de medida de
rutina del fabricante
Calibrador comercial
producido
por el fabricante

Procedimiento de
rutina del laboratorio
Muestra del paciente

Resultado

ISO 17511
 NORMA ISO 17511
Caso 5

Procedimiento de medición seleccionado por los

fabricantes, debido a que no se cuenta con
procedimientos de medición de referencia ni calibradores
establecidos por convención internacional y sin
trazabilidad al SI

Es aplicable a magnitudes que implican analitos tales

como: los productos de degradación de fibrina (Dímero
D) y marcadores tumorales tales como antígeno de
cáncer 125 (CA-125), así como anticuerpos contra
antígenos tales como Chlamydia.
 µc(y)

Procedimiento de medición
seleccionado por el
fabricante

Calibrador de
trabajo del fabricante
Procedimiento de medida de
rutina del fabricante

Calibrador comercial
producido
por el fabricante

Procedimiento de
rutina del laboratorio
Muestra del paciente

Resultado

ISO 17511
 TIPOS DE ANALITOS

Tipo A:
Son aquellos cuyas mediciones son trazables a las unidades SI
(mol/L). Son compuestos químicamente bien definidos (por ej.
glucosa, colesterol, homonas tiroideas y esteroideas.). En esta
categoría se ubican aproximadamente unas 100 substancias.

Tipo B:
Son aquellas que NO son trazables al SI pero que son expresadas
en términos de Unidades Arbitrarias, por ej. estándares OMS. Las
pruebas para estos analitos pueden estar basados en tres
principios: biológico (actividad enzimática, factores de coagulación,
etc), immunoprocedimientos (por ej. ELISA) y amplificación de
ácidos nucleicos. En esta categoría se ubican aproximadamente
500 substancias.
JERARQUÍA DE LA TRAZABILIDAD

Instituto Nacional de Calibración

0.002%
Laboratorio de Calibración

0.01%
Item maestro de la compañía

0.07%
Equipo de producción

1%
Producto final

5%
Trazabilidad
 PROCESO TÍPICO DE MATERIALES DE CONTROL
O CALIBRADORES
Toma de muestra Plasma Suero

Coagulación

Suero

FILTRACIÓN
•Fracciones lipoprotéicas DIÁLISIS
Agregado de componentes
•Antimicrobianos INTERCAMBIO IONICO
•Estabilizadores ADSORCIÓN
•Tampones ÓSMOSIS REVERSA
•Analitos

Liofilizado
•Homogeneización
•Filtración 0.22 micrones Matriz
•Dispensado modificada
Congelado
< -50 Cº
 CONMUTABILIDAD
 Característica de un material procesado que
le da la propiedad de comportarse como un
suero nativo fresco cuando se analizan con
diferentes procedimientos de medida

 Idealmente los calibradores y controles –

materiales procesados por la industria -
deberían ser conmutables con los materiales
de los pacientes
 CONMUTABILIDAD
La conmutabilidad de los materiales de referencia
con las muestras de pacientes debe ser testeada
por uno o varios métodos (con especificidad
analítica igual a la del método de referencia).
Ésta depende de:

 Fuente

 Proceso de purificación

 Matriz (cofactores, efectores, aditivos, estabilizantes)

 Procesamiento del producto final

 EFECTO MATRIZ
• La influencia de una propiedad de la muestra –
distinta del analito investigado- sobre la
medición, y por lo tanto sobre el resultado
obtenido.
• El grado de modificación de la reactividad en los
materiales con matriz modificada normalmente
es una característica única de un lote
determinado de calibrador y un procedimiento
de medición (test kit) específico.

 Guía para la determinación del grado de efecto matriz de un

material procesado
 NCCLS EP-14A : Evaluation of matrix effect
El efecto matriz involucra la interrelación de cuatro
componentes principales de las pruebas
analíticas:
El fabricante ajusta el
 Diseño del instrumento valor de calibración para
compensar cualquier
 Formulación del reactivo efecto matriz posible.
 Principio analítico
 Composición de controles y
calibradores y las técnicas de
procesado.

La interacción de estos componentes es compleja y es

distinta según el material que se estudie (sangre, suero,
orina, etc.)
 EFECTO MATRIZ Y LA EVALUACIÓN
EXTERNA DE LA CALIDAD

• El efecto matriz también se observa en los

materiales utilizados en la Evaluación Externa de
la Calidad
• Son materiales que sufren procesos similares a
los calibradores y es bastante común que
presenten este efecto
• Por lo tanto pueden no servir para estimar el error
sistemático (y menos para calibrar)
• Solo comparación con el valor de consenso del
grupo metodológico
 RESPONSABILIDADES
ORGANIZACIONES INTERNACIONALES

Investigar y desarrollar procedimientos de medición de referencia

primarios, secundarios o acordados por convención internacional y/o
fabricar calibradores primarios (materiales de referencia certificados) o
calibradores acordados por convención internacional con el fin de que
sean utilizados como base de la cadena de trazabilidad de las mediciones

FABRICANTES DE PRODUCTOS MÉDICOS PARA EL DIAGNÓSTICO

IN VITRO

Entre los requerimientos que se les exigen se encuentra la utilización

(cuando estos existan) de los calibradores primarios (materiales de
referencia certificados) o de calibradores acordados por convención
internacional para la asignación del valor para un calibrador de trabajo del
propio fabricante, y termina en la asignación del valor para el calibrador
comercial, a través de procedimientos de medición seleccionados por éste
 RESPONSABILIDADES

LABORATORIO CLÍNICO
Adquisición y uso de calibradores comerciales con
trazabilidad metrológica demostrada al SI, si estos
existen, y la aplicación de sus procedimientos de
medición de rutina con competencia técnica para la
emisión de los resultados de los pacientes.
Participar en ensayos de aptitud con valores de
referencia certificados cuando estén disponibles.
 CONCLUSIONES
 La trazabilidad ofrece la mejor estrategia para lograr la
estandarización de los laboratorios

 Se deberán desarrollar sistemas de referencia para cubrir

las necesidades del laboratorio clínico

 La industria deberá proveer los calibradores y controles con

valores trazables utilizando los sistemas de referencia

 El laboratorio deberá transferir la veracidad de los

calibradores a los resultados de los pacientes

 Los laboratorios deberán realizar –indefectiblemente-

acciones programadas para garantizar la calidad analítica