Corporación Universitaria Empresarial Alexander Von Humboldt

Facultad de ciencias de la salud

Programa de medicina
2018-1
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Juliana Arbeláez Giraldo

Susana Cadena C
Laura Castañeda Castaño
Valentina Cuadrado Ramos
Mariana García Peláez
Jose

Inmunoprecipitación de proteínas

1. Principio de Inmunoprecipitación

2. Inmunoprecipitación de proteínas etiquetadas y nativas

3. Ejemplo de alguna aplicación

Conclusión

Referencias

asic Principle Of Immunoprecipitaion

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1. Se agrega el anticuerpo adecuado

2. El anticuerpo se une a una proteína específica
3. La proteína A o G se agrega para hacer anticuerpo- proteína complejos insolubles
4. En la centrifugación de la solución pellets anticuerpo-proteína compleja. Remueve lo sobrante y
se lava.
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Proteínas etiquetadas Uno de los obstáculos técnicos con la inmunoprecipitación es la

gran dificultad para generar un anticuerpo que se dirija específicamente a una sola
proteína conocida. Para evitar este obstáculo, muchos grupos diseñarán etiquetas en el
extremo C o N de la proteína de interés. La ventaja aquí es que la misma etiqueta se
puede usar una y otra vez en muchas proteínas diferentes y el investigador puede usar
el mismo anticuerpo cada vez. Las ventajas del uso de proteínas marcadas son tan
grandes que esta técnica se ha convertido en un lugar común para todos los tipos de
inmunoprecipitación, incluidos todos los tipos de IP detallados anteriormente.

Método indirecto: los anticuerpos que son específicos para una proteína particular, o
un grupo de proteínas, se agregan directamente a la mezcla de proteína. Los
anticuerpos aún no se han unido a un soporte de fase sólida. Los anticuerpos son libres
de flotar alrededor de la mezcla de proteínas y unirse a sus objetivos. A medida que
pasa el tiempo, las perlas recubiertas en proteína A / G se agregan a la mezcla de
anticuerpo y proteína. En este punto, los anticuerpos, que ahora están unidos a sus
objetivos, se pegarán a las cuentas.

Método directo: los anticuerpos que son específicos para una proteína particular (o
grupo de proteínas) se inmovilizan en un sustrato en fase sólida, tal como microperlas
superparamagnéticas o en microesferas microscópicas (no magnéticas). Las perlas con
anticuerpos unidos se añaden luego a la mezcla de proteínas, y las proteínas que son
el objetivo de los anticuerpos se capturan en las perlas a través de los anticuerpos; en
otras palabras, se vuelven inmunoprecipitados
Müller-Esterl W. Bioquiḿ ica. 1st ed. Barcelona, España: Reverté; 2011.