PREPARACION DE REACTIVOS:

Para la preparación se necesita calcular las masas y volúmenes que se requieren:

PREPARACION BUFFER LISIS FRIO: 250 mL

Hallar los gramos de KHCO3
155 mM NH4Cl
𝑔/𝟏𝟎𝟎𝐠/𝐦𝐨𝐥
0.01 M= 0.4 𝐿
;
10 mM KHCO3
g= 0.4 gr
1 mM EDTA

pH 7.4

Hallar los gramos de NH4Cl Hallar los gramos de EDTA

M= n moles/ litros de solución 0.001 M= 𝑔/292.24 𝑔𝑟/𝑚𝑜𝑙⁄0.4 𝐿

̅
g/ 𝑀
; 155 mM = 0.155 M g= 0.1168 gr
𝐿

𝑔/𝟓𝟑,𝟓𝐠/𝐦𝐨𝐥
0.155 M= ;
0.4 𝐿

g= 3.317 gr

PREPARAR BUFFER LISIS CALIENTE: PARA 50 mL

10 mM Tris- HCl
Hallar los gramos de NaCl
400 mM NaCl
𝐠/𝟓𝟖.𝟓𝐠/𝐦𝐨𝐥
0.4 M= 0.05 𝐿
;
2 mM EDTA
g= 1.17 gr
pH 8.0

Hallar los gramos de Tris- HCl

M= n moles/ litros de solución Hallar los gramos de EDTA

̅
g/ 𝑀 𝐠/𝟐𝟗𝟐.𝟐𝟒𝐠/𝐦𝐨𝐥
𝐿
; 10 mM = 0.01 M 0.002M= ;
0.05 𝐿

𝐠/𝟏𝟐𝟏.𝟏𝟒𝐠/𝐦𝐨𝐥 g= 0.29 gr
0.01 M= 0.05 𝐿
;

g= 0.06 gr
PREPARACION SOL. STOCK:
A partir de la sol. Stock se hara la sol.
TRIS- HCl 2M 50 mL De tris- HCl para la preparación del
buffer:
𝐠/𝟏𝟐𝟏.𝟏𝟒𝐠/𝐦𝐨𝐥
2M= 0.05 𝐿 C1 * V1 = C2 * V2
g= 12.114 gr
2 M * 50 mL = 0.01 M * V2

V2= 1000 mL

 CLORURO DE SODIO

6M- 50 50 Ml
𝐠 /𝟓𝟖.𝟓𝐠/𝐦𝐨𝐥
6M = 0.05 𝐿

g= 17.55

 SDS 10 % 50 Ml

10-----100ml

x-------50ml ; x= 5 gr.