Академический Документы
Профессиональный Документы
Культура Документы
Microbiología I
Cátedra 1. Microbiología y Parasitología
Área de Virología
Seminario 14
MODELOS DE INFECCIONES PERSISTENTES
Virus hepatitis B
Virus herpes simplex
OBJETIVOS
Horizontal
Sexual
Parenteral
Vertical
Perinatal
Congénita
ESTRUCTURA DE LA PARTÍCULA VIRAL
Nucleocápside (HBcAg)
Envoltura
ADN pdc
ADN polimerasa
X
S-HBsAg (Domino S)
M- HBsAg (Pre-S2+S) Partículas de Dane
L- HBsAg (Pre-S1+Pre-S2+S)
Partículas esféricas
Pre-S1
Pre-S2
S
Partículas filamentosas
ESTRUCTURA DEL GENOMA DE HBV
Proteína L
Proteína M
Proteína S
ADNpdc
ATG ATG
traducción core
traducción precore
clivaje
REPLICACIÓN DEL GENOMA DE HBV
REPLICACIÓN DEL HBV
Taurocolato
de sodio
INFECCIÓN CRÓNICA
Síntomas
T
I
T
U
L
O
Semanas post-exposición
INFECCIÓN AGUDA POR HBV (II)
anti-HBc
HBe Ag anti-HBe
HBs Ag anti-Bs
Incremento en suero (% del valor máximo)
100
50 ALT
DNA de
HBV
0
0 1 2 3 4 5 6 7 8
Tiempo post-infección (meses)
Años
Semanas post-exposición
INFECCIÓN CRÓNICA POR HBV (II)
anti-HBc
HBe Ag anti-HBe
HBs Ag
10
Incremento en suero (% del valor máximo)
ALT
DNA de
HBV
50
0
0 10 20 30 40 50
Tiempo post-infección (años)
Temprana + - + - IgM +
Infección aguda
Vacunado -2 + - - - -
Temprana + - + - IgM +
Infección aguda
De “Virología Médica”
Carballal & Oubiña, 2015
RESPUESTA INMUNE ANTIVIRAL
DEBIL
OLIGOCLONAL
VIGOROSA
POLICLONAL AGUDA
MULTIESPECÍFICA
VIGOROSA
POLICLONAL
MULTIESPECÍFICA
PERSISTENCIA DEBIL
OLIGOCLONAL
De “Virología Médica”
Carballal & Oubiña, 2015
DETERMINANTES VIRALES QUE FAVORECEN LA
PERSISTENCIA
ALTA TASA DE MUTACIONES
ESCAPE A LA
RESPUESTA INMUNE
HUMORAL
Mutaciones en el HBsAg que impiden
la unión de anticuerpos anti-HBs
previos
ESCAPE A LA
Mutaciones en los epítopes RESPUESTA INMUNE
para linfocitos T CELULAR
DETERMINANTES VIRALES QUE FAVORECEN LA
PERSISTENCIA
HBV con síntesis de HBeAg
ATG ATG
traducción core
HBcAg en el virión
traducción precore
clivaje
HBeAg soluble
traducción core
HBcAg en el virión
trad-
Sin producción de
HBeAg
MUTANTES DE PRE-CORE
Mutantes HBeAg (-)
ATG TAG ATG
traducción core
Sin producción de HBeAg
trad-
HEPATITIS FULMINANTE
traducción core
traducción precore
HBcAg y HBeAg comparten epítopes
clivaje para CD4 y CD8
TOLERANCIA
PERSISTENCIA Infección crónica en recién nacidos ~98 %
PATOGÉNESIS DEL CHC
Proteína X
Altera el
potencial de Aumento del
membrana Ca++ citosólico
mitocondrial
Liberación de
especies Cascada de
reactivas de señales
oxígeno
Activación de
factores de
transcripción
De “Virología Médica”
Carballal & Oubiña, 2015
FACTORES DE RIESGO
Factores asociados a un aumento del riesgo de progresión a la cirrosis
Del hospedador Virales Ambientales
Edad avanzada Alta tasa de replicación Co-infección con HDV, HIV o HCV
Sexo masculino viral Consumo de alcohol
Estado inmune Genotipo (C > B; F) Diabetes mellitus
Variantes del HBV Obesidad
(mutaciones en el
promotor basal del core)
F progresión frecuente a
fibrosis
Factores asociados con riesgo aumentado de progresión al HCC
Del hospedador Virales Ambientales
Edad avanzada Alta tasa de replicación Co-infección con HDV, HIV o HCV
Sexo masculino viral Consumo de alcohol
Cirrosis Genotipo (C > B; F) Diabetes mellitus
Historia familiar de F progresión más rápida Obesidad
HCC Variantes de HBV Tabaquismo
Etnia (asiáticos, (mutaciones en el
africanos) promotor basal del core)
Efecto transactivador de
X sobre genes celulares
PATOGÉNESIS DE LAS MANIFESTACIONES EXTRA-
HEPÁTICAS
Inmunocomplejos Circulantes
Deposición de inmunocomplejos
en vasos sanguíneos, glomérulos HBsAg
y sinovia
HBsAg
Vasculitis y poliarteritis
nodosa
Reclutamiento mediado por
complemento y receptor Fc;
activación de células inflamatorias
Glomerulonefritis
ADN
Envoltura
Cápside
Entrada
Enfermedades: Salida
Encefalitis
Queratitis
Encefaliti Entrada
Diseminación
s
Lesiones muco-cutáneas Salida
Latencia
Enfermedad
diseminada en el Diseminación
paciente
Latencia
inmunocomprometido
Entrada
Entrada
Enfermedad
con aparición Salida
de lesiones
recurrentes Diseminación
Herpes Latencia
neonatal
Ingreso en la mucosa
por microtraumas y
replicación en el epitelio
RESUMIENDO: ESTABLECIMIENTO,
MANTENIMIENTO y REACTIVACIÓN
Establecimiento
Mantenimiento
Reactivación
ICP0:
• Favorece la transcripción del
genoma
• Induce la degradación deproteínas
involucradas en la represión del
genoma.
ACTIVACIÓN DE HSV-1
VP16=TIF: Recluta factores de transcripción celulares y se
une a promotores de genes IE Síntesis de proteínas
(ICP0, ICP4, ICP22, ICP47)
En células neuronales está en citoplasma
HCF (podría fallar el transporte de VP16 al núcleo)
VP16
HCF
Oct-1 VP16
ZHANGFEI
TAATGARAT Genes IE (ICP0)
Promotor
Citoplasma
Núcleo
Oct-1: Baja expresión en neuronas, pudiéndose expresar
otras proteínas de la familia Oct que compiten con ésta
(pero que no pueden interactuar con VP16)
LATENCIA (LAT-ICP0)
IRL
ARNm ICP0
LATs
ROL DE LA RESPUESTA CELULAR EN LA LATENCIA
Problema 1
Con el objetivo de dilucidar aspectos centrales de los mecanismos de patogenia del HBV se han llevado a cabo diversos
estudios empleando animales como modelo experimental. En uno de estos se utilizaron chimpancés los cuales fueron
infectados con el HBV por vía intravenosa. Al cabo de unas semanas post-inoculación los primates desarrollaron un típico
cuadro de hepatitis. Para analizar la cinética de replicación/eliminación viral y la cinética del desarrollo de la enfermedad,
se tomaron muestras de sangre y biopsias hepáticas semanalmente a lo largo del curso de la infección. En la figura I se
documentan las determinaciones realizadas.
suero.
CARGA VIRAL LINK 1en inglés:
https://www.youtube.com/watch?v=YhXj5Yy4ksQ
A) Análisis cualitativo del genoma viral (DNAccc e intermediarios
Semanas post-infección replicativos) en hígado (Southernblot) y determinación de los niveles
de RNA mensajero de IFNγ y CD3 en hígado.
circular laxo
a. Tras la inoculación del HBV los chimpancés desarrollaron una infección crónica persistente.
b. El HBV es un virus citopáticoper se ya que como consecuencia de la replicación viral se produce un daño directo en el
hepatocito.
c. La destrucción de los hepatocitos es responsable de la reducción temprana del genoma viral en hígado.
d. Existe un control temprano No citolítico de la replicación del HBV el cual está asociado a la acción del IFNγ.
e. La injuria hepática es consecuencia de la respuesta de células T.
Para develar el rol de la respuesta de células T en la infección aguda por HBV, subsiguientemente se efectuaron más
estudios utilizando el mismo modelo y procedimiento experimental. Para ello se monitoreó semanalmente el curso de la
infección por HBV en primates inoculados a los cuales se les indujo la depleción temporal de LT CD8+ o LT CD4+ mediante
la administración de Acs monoclonales específicos anti-CD8 o anti-CD4 respectivamente. En la figura II se observa una
parte de los resultados obtenidos.
Figura II
Mab anti-CD8
Curso de la infección por HBV en chimpancés luego de la inoculación
experimental y la depleción transitoria de LT CD8+.
A) Determinación cuantitativa (carga viral por PCR) del DNA del HBV en
Semanas
post-infección hígado, análisis de la actividad de ALT en suero y recuento de LT CD3+
CD8+ en sangre periférica.
B) Determinación de los niveles de RNA mensajero de IFNγ y CD3 en
Semanas
post-infección
hígado.
C) Respuesta intra-hepática de LT CD8+ específicos productores de IFNγ
Respuesta intrahepática
de LT CD8+ específicos
obtenidos de biopsias hepáticas.
Mab anti-CD8
d. La completa eliminación del genoma del HBV del hígado estuvo asociada a una respuesta de LT CD8+ monoespecíficos.
Pregunta 3
¿Por qué mecanismos cree Ud. que el IFNγ promueve la eliminación viral del hepatocito?
Problema 2
Una paciente de 25 años consulta en la guardia por fiebre, cefalea, mialgias y disuria. En el examen físico se observa una
erupción localizada cutánea en la zona genital, formada por vesículas con contenido líquido claro.
Diagnóstico clínico: posible infección por virus herpes simplex (HSV)
1- Basados en el examen físico cree Ud. que se trataría de una infección por Herpesvirus humano 1 o 2?Discuta posibles vías
de transmisión
2- ¿Cuál es el blanco principal de la infección productiva?
a) neuronas
b) células epiteliales
c) células dendríticas
d) células musculares
e) Fibroblastos
f) Linfocitos B
Dos años después consulta por una nueva aparición de vesículas genitales, aunque esta vez afebril, sin cefalea, ni
mialgias; la paciente sólo refiere una leve disuria. Manifiesta haber tenido relaciones sexuales sin protección.
Al recibir la respuesta del médico infiere que ha estado muy nerviosa debido a que ha intentado por varios meses quedar
embarazada y no lo ha podido conseguir.
4- ¿Cuáles son los factores que puede causar este nuevo episodio?
a) Nuevo ingreso del genoma viral en la neurona ganglionar
b) Estímulos externos
c) Expresión de LATs
d) Edad
5- ¿Qué información piensa Ud. que podría ser importante brindar a la paciente sobre el comportamiento del HSV en
recién nacidos?