Especialización para el Diagnóstico de Laboratorio de

Enfermedades Infecciosas en Veterinaria

Preparación de
Medios de Cultivo

Vet. Carla Bustos

Cátedra de Enfermedades Infecciosas
Facultad de Ciencias Veterinarias
Universidad de Buenos Aires
 Medio de cultivo:

Material o sustrato que presenta una adecuada

combinación de nutrientes, para permitir el
crecimiento de un determinado mo, en
condiciones de laboratorio.
CLASIFICACIÓN:
• ESTADO

• COMPOSICIÓN

• UTILIDAD PRÁCTICA
 Según su estado:
• LÍQUIDOS: caldos

• SÓLIDOS: agente solidificante: agar o gelatina

• SEMI-SÓLIDOS: apariencia de gel

 Según su composición

• SIMPLES: mínimos nutrientes (poseen

peptona).
 Según su composición
Agar nutritivo, agar tripteína soya, caldo nutritivo y caldo
tripteína soya.
 Según su composición

• ENRIQUECIDOS: alto valor nutritivo para

el desarrollo de microorganismos
exigentes.
 Según su composición

Agar Sangre Agar Chocolate

Según su composición
Agar sangre: tipos de hemolisis
 Según su composición

• SELECTIVOS: con agregado de inhibidores.

Según su composición
Agar Sabouraud + cicloheximida
 Según su composición

• DE ENRIQUECIMIENTO SELECTIVO:
aumentan el número de un microorganismo
en una muestra a niveles detectables.
 Según su composición
Caldo Tetrionato, caldo Tood Hewitt, caldo Selenito
 Según su composición

• DIFERENCIALES: agregado de un sustrato y

un indicador de pH.
Según su composición
Citrato
 Según su composición

• SELECTIVO DIFERENCIALES:

Agregado de un inhibidor + un sustrato + un

indicador de pH.
Manitol salado
Agar Mac Conkey Agar XLD
 Según su utilidad práctica
• PARA AISLAMIENTOS PRIMARIOS:

incluyen medios para aislamientos especializados

• PARA IDENTIFICACIÓN:
pico de flauta

medios diferenciales

Pruebas de 1º y 2º etapa
Pruebas de 1° etapa:

Catalasa
Oxidasa
SIM o Agar movilidad
Tioglicolato
OF
Pruebas de 2° etapa:

BAM
Citrato
FA
TSI
RM - VP
BAM

•Ureasa

•Movilidad
 SIM

•Sulfhídrico pigmento negro

•Indol: detección de la capacidad de degradar el

triptofano produciendo indol.
Reactivo de Kovacs anillo rojo en la superf +

•Movilidad
 Tioglicolato

Permite detectar el tipo de respiración.

•1-Aerobio estricto

•2-Anaerobio facultativo

•3-Microaerófilo

•4-Anaerobio estricto
 Oxido fermentación (OF)

Detecta la capacidad de un microorganismo para degradar

la glucosa por vía fermentativa, oxidativa o ambas.

•Glucosa: se agrega por filtración

luego de esterilizado el medio.

•Dos tubos: con y sin parafina

•Celeste – Amarillo +
Oxido fermentación (OF)
 Citrato

Detecta la capacidad de la bacteria para utilizar citrato

como única fuente de C.

Verde –
Azul +
 FA

Detecta la capacidad de la
bacteria de metabolizar la
fenil-alanina por
desaminación directa en
aerobiosis

Reactivo: cloruro férrico

verde +
 TSI

•Fermentación de:
•lactosa
•glucosa

•Sulfhídrico

•Gas
 RMVP

•En tubo

•Reactivo: Rojo de metilo (Prod acido)

rojo +
amarillo -

•Reactivos: alfa naftol e hidróxido de

potasio (prod neutros)
rosa / violáceo +
 Preparación:
• Medios comerciales / “caseros”.
 Preparación:
• Pasos:
Pasos
– 1) Pesaje
– 2) Agua destilada
– 3) Disolver
– 4) Fraccionar
– 5) Acondicionamiento
– 6) Esterilización
– 7) Almacenamiento
Muchas gracias!!