Академический Документы
Профессиональный Документы
Культура Документы
LA SELVA
ALIMEN1"0S
Sonn)"
TESIS
Presentado por:
PROMOCIÓN 2001 - li
2010
F60
G25
García Villegas, Karem L.
Los Miembros del Jurado que suscriben, reunidos en acto público el 09 de Julio
de 2010, a horas 7:00 p.m. en la Sala de Audiovisuales de la Facultad de
Ingeniería en Industrias Alimentarias de la Universidad Nacional Agraria de la
Selva,. ubicada en la ciudad de Tingo María, provincia de Leoncio Prado,
departamento de Huánuco, para calificar la tesis presentado por la Bach.
GARCIA VILLEGAS, Karem Liliana, titulada:
¡~~k-~~~~~~
;g¡d; Presidente
~K
......................................................................
lng. Jhon y W. Vargas Solórzano
~ Asesor
DEDICATORIA
A Dios por ser la luz que me alumbra cada día, por ser
amor y verdad.
una profesional.
mi lado.
Primero a Dios que me dio la fuerza para seguir adelante, a mis padres,
y a lo largo de mi vida.
este trabajo.
Marco, Manuel, Felix, Victor, Jackeline, Carolina, Sandra, entre otros, por su
alegría y amistad entregadas, durante la ejecución de la tesis y a lo largo de
Alimentarías por contribuir en este proyecto y por hacer más amenos los días
de trabajo.
Diana, Zoila y Nidia, por su gran ayuda en esos pequeños, pero importantes
Página
l. INTRODUCCIÓN........................................................................ 1
2.1.3. El fruto..................................................................... 4
2.1.4. Usos....................................................................... 5
2.4. Antioxidante........................................................................ 9
2.5. Polifenoles....................................................................... 13
(ABTS0 +)... . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 16
2.9. Cromatografía liquida de alta performancia (HPLC)... ... ... ... ...... 17
111. MATERIALES Y MÉTODOS......................................................... 19
3.3.1. Equipos.................................................................. 20
3.3.2. Materiales............................................................... 20
3.4.2. Cuantificación de ácido ascórbico ... ...... ... ... ... ... ... ... .... 22
concentrada de Taperibá... ... ... ... ... ... ... ... ...... ... ... ... ...... 27
concentrada de Taperibá ... ... ... ... ...... ............ ... ... ... .... 28
3.5.5. Determinación de la actividad antioxidante en pulpa fresca
y concentrada de Taperibá...... ... ... ... ...... ... ... ......... ... ... 29
T aperibá . . . . . . . . . . . . ... . . . . . . . . . . . . . . . . . .. .. . . . . . . . . .. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .. 33
........................................................................................ 38
concentrada de Taperiba........................................................ 44
Taperibá . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .. . . . . .. . . . . . . .. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .. 47
4.5.1. Radical 2,2 diphenyl-1-picrilhidrazyl (DPPH)... ... ... ... .... ... . 47
sultánico) (ABTS}... . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .. . 49
V. CONCLUSIONES........................................................................ 52
VI. RECOMENDACIONES............................................................... 54
ANEXOS..................................................................................... 64
ÍNDICE DE CUADROS
Cuadro Página
concentrada de T aperibá................................................................ 33
de T aperibá... . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .. 42
concentrada de T aperibá . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 45
concentrada de Taperibá frente al radical ABTS... ... ... ... ... ...... ... 49
Figura Página
fresca y concentrada de Taperibá... ...... ... ... ...... ... ... ... ... ... .... ... 40
Taperibá .......................................................................... . 42
concentrada de T aperibá... . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 43
de Taperibá... . . . . . . . . . .. . . . . . . . . . . . . . . . . .. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 46
11. Actividad antioxidante en la pulpa fresca y concentrada de
68
Taperibá ........................................ ,.. ... ... ... ... ... ... ... ... ... ... ... 68
Taperibá....................................... .. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 69
Taperibá... . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 69
RESUMEN
(compuestos no nutritivos).
fruto se produce una vez por año, pudiendo variar de época de acuerdo con las
y procesadas.
2
concentrada de Taperibá.
de T aperibá.
2.1. Taperibá
2009). Crece en zonas de vida natural, bosque húmedo tropical y bosque seco
2.1.2.1. Moñología
(GUTIÉRREZ, 1969).
Las hojas son pinnadas con cuatro a doce pares de foliolos oblongo y
2.1.2.2. Taxonomía
- Nombre científico:
- Nombres comunes:
2.1.3. El fruto
un huevo de gallina siendo el fruto más grande dentro del grupo Spondias),
fibras espinosas, duras y curvas; esta característica espinosa interna del fruto
Energía, Kcal 56
Proteína, g 0,6
Grasa, g 0,3
Carbohidratos, g 14,2
Fibra, mg 0,6
Calcio, mg 39
Fósforo, mg 27
Hierro, mg 0,7
Retinol, mcg o
Tiamina, mg 0,05
Riboflavina, mg 0,19
Niacina, mg 0,67
Acido ascórbico, mg 5,9
2.1.4. Usos
(MEYER, 1996).
50% más que el valor 0 8rix, establecido para el zumo o jugo reconstituido de la
con la difusión simultanea con agua de pulpa y células y/o el orujo de fruta,
siempre que los sólidos solubles de fruta extraídos con agua, se añadan al
0
8rix, respectivamente.
puede mezclar con 25% de jugo fresco; esto se practica en el caso de los jugos
electrón desapareado por lo que son muy reactivos ya que tienden a sustraer
que necesita para aparear su electrón libre, la molécula estable que lo cede se
que los radicales libres eran agentes patógenos y estableció en este trabajo 3
postulados básicos:
RODRÍGUEZ, 2001 ).
radicales libres como el radical hidroxilo (OH-), anión superóxido (02), oxígeno
singulete C02), peróxido de hidrógeno (H 20 2), óxido nítrico (NO-), ácido nitroso
2.4. Antioxidante
aceleran reacciones químicas que utilizan a su vez reacciones con los radicales
de los radicales libres, liberando electrones en la sangre que son captados por
2006).
flavonoides mientras que los radicales libres son aquellos como peróxidos,
reaccionar e interactuar más rápido con los radicales libres del oxígeno y las
10
especies reactivas del oxígeno que con el resto de las moléculas presentes, en
los alimentos como las frutas y verduras (ROBBINS, 1995, STEPHENS et al.,
2000).
neutralizan:
hidrogeno.
(GUTIÉRREZ, 2002). Los antioxidantes exógenos, son los que se ingieren con
(PINEDA, 2005).
neutralizan
2006).
2.5. Polifenoles
2000).
mixtas que combinan la vía del shikimato y del acetato (PINEDA, 2005)
nutriente esencial para el ser humano, ya que éste no puede sintetizarlo por si
SOTO, 2005).
y ácidos nucleicos (DNA y RNA). Ésta los protege de daños causados por
oxígeno reactivo que puede ser generado por el metabolismo normal o por
valores del coeficiente de inhibición del 50% del radical IC50 por la alteración de
(ABTS0 +)
antioxidante.
17
- Una bomba que consta de dispositivos de alta tecnología que tiene por
función de entregar la fase móvil a través del sistema, a un flujo variado (0, 1 a
a la columna.
estudios se encuentra ubicado a 665 m.s.n.m a 09° 17' 08" de Latitud Sur, a
75° 59' 52" de Longitud Oeste en el distrito de Rupa Rupa, provincia de Leoncio
necesaria para las pruebas y almacenó descartando las dañadas, las verdes y
proceso de pulpeado.
20
3.3.1. Equipos
0,0001 g.
- pHmetro
- Centrifuga
3.3.2. Materiales.
- Vasos de precipitación de 50 mi
- Pipetas de 5 y 10 mi
- Fiolas de 1O, 25 y 50 mi
- Papel filtro
- Agua blanda
- Gradilla
- Microtubos
ácido sulfúrico (Merck KgaA), metanol grado HPLC (Fisher ChemAiert Guide),
EU).
Taperibá
Asquieri, 2008.
(2001 ).
Taperibá
- Recepción
Tinge María.
- Selección
- Pesado
- Lavado
Los frutos fueron lavados con agua blanda con el fin de eliminar
- Pelado
- Pulpeado
operación se utilizó un tamiz fino de 1mm de luz. Los frutos fueron ligeramente
trozados, para que la operación sea más eficiente, por medio del tamiz se
separarán las semillas y partes leñosas. Parte de esta pulpa fresca se separó,
-Tamizado
- Concentrado
- Envasado
- Almacenado
Tamiz de 1 mm de luz
Congelador Envasado
Envasado
crioscópico manualmente
- 20°C En bolsas de
polietileno
Congelador
crioscópico
- 20°C
concentrada de Taperibá
KH 2P04 ajustado a un pH de 2,4 con H3P04 y a una tasa de flujo de 0,5 mllmin.
concentraciones 1O, 20, 30, 40, 50 pglml que fueron usados para levantar la
concentrada de Taperibá
concentraciones de 300, 1000, 3000 y 10000 f.Jg/ml. (Anexo 1). A cada tubo se
reacción. Las lecturas en el espectro UV-VIS se realizaron a 700 nm. Con las
patrón.
estándar.
concentrada de Taperibá.
reaccionar con 975 !JL con radical DPPH (100 !JM). El radical DPPH inicia una
absorbancia disminuye.
dato final de la corrida de una concentración, todo esto dividido con el promedio
de las lecturas de la solución patrón en este caso el DPPH y así cada una de
Taperibá, fue utilizado para determinar el coeficiente de 'inhibición (IC 50) para el
de Taperibá en fJQ/ml, requerido para inhibir el 50% del radical libre DPPH.
DPPH
31
(ABTS)
absorción). Las muestras filtradas se diluyen con etanol hasta que se produce
una inhibición del 20 al 80 por ciento, ,en comparación con la absorbancia del
blanco, tras añadir 20uL de la muestra. 980 uL de dilución del radical ABTS 0 ,
trabajo para la pulpa fresca 1,5; 5; 15; 50 mg/mL y para la pulpa concentrada:
O, 15; 0,5.; 1,5; 5 mg/ml. Se procedió a reaccionar 20 f.JL de cada una de las
concentrada de Taperibá.
(87 ,45% de humedad del fruto contra 83,5% promedio de humedad relativa del
ambiente). Puede decirse que estos frutos experimentan ligera pérdida de agua
de humedad que oscila entre 81 a 90%. Las frutas amazónicas como el Noni
otras frutas como Tuna verde contiene un 3,7% según REPO Y ENCINA (2008)
y en Noni 4,97% de fibra GARCIA (2009); al ser comparado estas frutas con
cenizas).
CUNHA (2001 )., reporta para el género Spondias mombin L. que este fruto
consideraría entre los más dulces, ya que de acuerdo con estos autores, el
12,1 ± 0,36°Brix.
reportado por CALVAY (2009), quien determinó en pulpa fresca de Camu camu
incrementan con la maduración del fruto. También mencionan que los frutos
maduros son significativamente menos ácidos que los frutos verdes y pintones.
0,34 - 0,53%, proteína total (1 ,76- 2,33%), cenizas totales (6,23 - 6,78%) y,
38
fibra dietética total que fue menor en frutas maduras (17,20%±3,49, en base
valores difieren porque la toma de muestra del análisis es diferente. SITI et al.,
empleó la pulpa.
figura 4.
et al. 2002). ACEVEDO et al.(2005), menciona que los jugos de Lima Rangpur
l 7 000 K9
Recepción
1 6,790 K9
Selección _. Frutos dañados
0,210 K9
l 6,790 K9
Pesado
l 6,790 K9
Lavado
l 6,006 K9
Semillas y partes
Pulpeado leñosas
0,950 K9
~ 5,056 K9
Tamizado 0,250 K9
Pulpa refmada
14,806 K9
~ l 1,714 K9
Agua
Almacenado Envasado
J 1,714 Kg
p ulpa concentrada
Almacenado
de Taperibá
350
y = 6,498x + 0,976
300 R2 =0,999
250
< 200
::)
E 150
100
50
o
o 10 20 30 40 50 60
Concentraciones de AA (ug/ml)
.,.
....
...
CH20H
H- t--OH
AA
I
,. Vo .....:::;0
... [ 1= 50 ~tg/ml
~ 200
OH OH
E
...
IDO
.
\
•• " u .
Tiempo (!R)
pulpa.
60
l
50
~
"1""
40-
~ ~o
-8 ~o
C)
E
~o
o
PFT PCT
Taperibá.
43
~~-------------------------------------------------.
A
1110
ro •• u 11 w 1~
Tiempo(!&)
Figura 8. Cromatograma HPLC, A. pulpa fresca de Taperibá y B. pulpa
concentrada de Taperibá con un FD (factor de dilución) = 10. Muestra
representativa den =3.
Acerola (Malpighia amarginata OC.), partiendo de pulpa con 6,0 °Brix y 612,08
mgAA/100g y obtuvo una pulpa concentrada con 38,0 °Brix y con 2112,28
mgAA/100g.
entre 500 y 2,200 mg por 100 g de fruta fresca según la fecha de recolección,
donde se obtiene.
Taperibá
2.5
..."'o
.Q 1
f/1
.Q
e( 0.5
o
o 20 40 60 80 100 120
Concentraciones (ug/ml)
totales.
700 l
600
500
¡::;en 400 . e
~
~
~
300
~ T
200
100
o
PFT PCT
naturales del organismo y lo protegen contra el daño celular que causa que el
abundancia.
gálico.
Taperibá
1600
1400 T
: : : :"' 1200
-§, 1000
-
o
ID
:::J
800
600
~ T
(.) T
400
200
o
PFT PCT
¡.Jg/ml.
DPPH, teniendo como resultado: en el jugo de Uva tinto 17,4 +/- 0,03 y 36,3 +/-
de Camu camu una gran capacidad antioxidante, (ICso 7,43 ± 0,09 ¡.Jg 1 ml).
(ABTS)
300]
250
-
-
E 200
a
.:. 150
o fDPFrl
~ 100 ~
50
o +--L....,..,-_·=·······~'-----.----h-~=-'---.1
PFT PCT
91 ,26 ug/ml, existiendo una diferencia significativa con la pulpa fresca IC50
camu camu.
(C1 50), mediante método el catión ABTs·+, es uno de los más rápidos,
que puede obtenerse directamente sin una preparación previa, mientras que el
ABTS tiene que ser generado tras una reacción que puede ser química (dióxido
414, 654, 754 y 815 nm en medio alcohólico, mientras que el DPPH presenta
recomienda lo siguiente:
escala industrial.
ABSTRACT
Taperibá is a native fruit in the Peruvian Amazon, which is not tech production
and consumption is low. The purpose of this research was to quantify and
evaluate ascorbic acid antioxidant capacity in fresh pulp and concentrated
Taperibá (spondias cytherea son). Of the ripe fruit of Taperibá was obtained
fresh pasta and pasta concentrated under vacuum to remove the 40% wáter, to
50 °C temperature. Ascorbic acid content was determined by the method of
reverse phase HPLC, total Polyphenols and antioxidant by inhibiting free radical
DPPH {radical 2, 2-diphenyl-picrilhydrayl) and ABTS o {2.2-azinobis radical
etilenobenzotiazolino-6 3-sulfonic acid) were determined by Spectrophotometry.
Was obtained ascorbic acid content in fresh pulp 39.38 mgAA/100g and
concentrated pulp 53.54 mgAA/1 OOg. Regarding the total Phenolic content
using Folin- Ciocalteu was determined in fresh pulp 384.73 mgCAT/100g and
concentrated pulp 623.11 mgCAT/100g. The antioxidant capacity using the
DPPH radical inhibition coefficient expressed as IC50 values obtained 1288.88
mg 1 mi to examine the fresh pulp and an :¡eso of 415, 03 mg/ml in concentrated
pulp; while the ABTS radical was obtained an IC50 272.55 ± 1.26 mg/ml in fresh
pulp and 91.26 ± 3.55 mg/ml in concentrated pulp. In conclusion, the results
show us that the pulp to be concentrated Taperibá increases the content of
ascorbic acid, Phenolic compounds and antioxidant activity, this fruit can be
used for the manufacture of concentrated fruit used for beverages and for
industrial Nutraceuticals
VIl. REFERENCIAS BIBLIOGRÁFICAS
España. 268p.
p.
56
28: 25-30.
880, 149-168
4: 120.
CAVIA, M.; LÓPEZ, A.; HERNANDO, B.; LÓPEZ, A.; GARCÍA-GIRÓN, C.;
CODEX ALIMENTARIO. 2005. Norma general del Codex para zumos üugos) y
ESPIN, J.; SOLER- RIVAS, C.; WICHERS, H.; GARCIA- VIGUERA, C. 2000.
GARCÍA A.; PERIAGO M.; VIDAL M.; CANTOS E. 2002. Evaluación de las
47-51.
GUITIERREZ, A.; 1969. Especies frutales nativos de la selva del Perú, estudio
de ciencias medicas.
41-47.
KIM, D.; LEE, CH.; LEE, K.; LEE, H. 2002. Vitamin C equivalent antioxidant
2A-E.
LEBEAU, J.; FURMAN, C.; BERNIER, J.; DURIEZ, P.; TEISSIER, E.;
MARQUINA V.; ARAUJO L.; RUÍZ J.; RODRÍGUEZ-MALAVER A.; VIT P. 2008.
Venezuela.
dioic (urticaceae).Bioi.Pharm.Bull.27(5)702-705.
5,
NIELSEN, S. 1998. Food analysis 2da. Edic. Edit. Services Ruthbloom. Usa pp
487-526.
47:234-235.
PHILLIPS, R.; CAMPBELL, C.; BALERDI, C.; CRANE, J. 2009. Las Ciruelas
Universidad de guatemala. 79 p.
61
Egypt
RE, R.; PELLEGRINI, N.; PROTEGGENTE, A.; PANNALA, A.; YANG, M.;
radical cation decolorizat,ion assay. Free Rad. Biol. Med. v. 26, p. 1231-
1237 p.
II).Julio - Diciembre.
Engineering.
SITI 1.; NORYATI 1.; MOHO M.; HANISAH A. 2004. Sorne physical and
Puerto Rico.
Agraria de la selva.
VASQUEZ C.; CALA M.; MIRANDA 1.; TAFURT G.; MARTINEZ M.;
particularmente al Alto Huallaga. Fondo del libro, banco agrario del Perú.
Anexo l.
o o 1000 o 1000
Donde:
VF : Volumeh final.
66
Anexo 11
Anexo 111.
concentrada de Taperibá
Anexo IV.
Anexo V.
Anexo VI
Figura 13. lnhibicion del radical DPPH para la pulpa fresca de Taperibá
90
80
:e
a..
70
a..
e 60
<11
50
"'oe 40
"ü
:.0 30
.t::
e 20
'*- 10
o
•
o 1000 2000 3000 4000
concentración (ug/ml)
Anexo VIl.
Figura 14. lnhibicion del radical DPPH para la pulpa concentrada de Taperibá.
120
o
•
o 200 400 600 800 1000 1200
concentración (ug/ml)
69
Anexo VIII
'Figura 15. lnhibicion del radical ABTS para la pulpa fresca de Taperibá
100
V') 90
1-
al
<(
80
Qj 70
"'O
e 60
o
·¡:; 50 y= 0,061x + 26,19
:e 40 R2 =0,966
..e
e 30
"* 20 •
10
o
o 500 1000 1500
concentración (ug/ml)
Anexo IX.
Figura 16. lnhibicion del radica!l ABTS para la pulpa concentrada de Taperibá
y = 0,220x + 25,6
100 R2 =0,995
V)
1-
90
co 80
< 70
Q)
"O
60
e
o 50
.~ 40
..0
..e
e:
30
20
'*' 10
o
o 100 200 300 400
concentración (ug/ml)