DETERMINACIÓN DE PROTEÍNAS TOTALES EN SANGRE

INTRODUCCIÓN

La sangre está constituida por un 5-7% de moléculas proteicas, llamadas

proteínas plasmáticas, las cuales están suspendidas en el plasma sanguíneo.
Las proteínas están presentes en todas las células y en los distintos líquidos
corporales: suero o plasma (66-83g/L), orina (100-200 mg/L), líquido
cefalorraquídeo (15-45 mg/dL)

Las proteínas son compuestos orgánicos macromoleculares compuestos por

carbono, hidrógeno, oxígeno y nitrógeno, la mayoría también contienen azufre
y fósforo, están ampliamente distribuidos en el organismo y esenciales para la
vida.. Están formadas por la unión de varios aminoácidos, unidos mediante
enlaces peptídicos. El orden y disposición de los aminoácidos en una proteína
depende del código genético, ADN, de la persona.

Actúan como elementos estructurales y de transporte y aparecen bajo la forma

de enzimas, hormonas, anticuerpos, factores de coagulación, etc.

En el plasma, las proteínas contribuyen a mantener el volumen del fluido

circulante, transportan sustancias relativamente insolubles y actúan en la
inactivación de compuestos tóxicos y en la defensa contra agentes invasores.
La determinación de proteínas totales es útil para el monitoreo de cambios
ocasionados por diversos estados de enfermedad. En condiciones patológicas
como pérdidas renales, desnutrición, infecciones prolongadas, etc., suelen
presentarse hipoproteinemias, mientras que en otras como mieloma múltiple,
endocarditis bacteriana y hemoconcentración de diversos orígenes, (ej.:
deshidratación) se observan hiperproteinemias.

En este informe se dará a conocer sobre la determinación de proteínas totales

en sangre usando el reactivo Biuret, la cual es una medición aproximada de
todas las proteínas encontradas en la porción líquida de la sangre para
identificar el estado de salud de la persona.

OBJETIVO

Determinar cuantitativamente la concentración de proteínas totales en una

muestra de sangre humana.

Determinar proteína sérica en muestra de sangre para

MARCO TEORICO

Proteínas
Las proteínas son compuestos orgánicos
macromoleculares, ampliamente distribuidos en el
organismo y esenciales para la vida. Actúan como
elementos estructurales y de transporte y aparecen bajo
la forma de enzimas, hormonas, anticuerpos, factores de
coagulación, etc.

Son constituyentes importantes de todas las células y los

tejidos y están constituidas por aminoácidos.
Las proteínas son introducidas en el organismo a través
de los alimentos, donde se dividen en aminoácidos para
formar posteriormente las nuevas proteínas a través del
proceso conocido como síntesis de proteínas. Las
proteínas realizan multitud de funciones en nuestro
organismo para su correcto funcionamiento.
Ejemplos de clases de proteínas
Enzimas, algunas hormonas, la hemoglobina que
transporta al oxígeno, la LDL que transporta al colesterol,
el fibrinógeno utilizado en la coagulación sanguínea, el
colágeno que interviene en la estructura del hueso y del
cartílago y las inmunoglobulinas (anticuerpos).

Proteínas totales en suero

Las proteínas totales de nuestro organismo son un conjunto de compuestos
orgánicos macromoleculares, de un peso molecular elevado, que están
formadas por moléculas llamadas aminoácidos que se unen entre sí por
enlaces peptídicos.
La secuencia con la que estos aminoácidos se encadenan y el número de
cadenas de aminoácidos, determinan cuál es la estructura primaria de las
proteínas.
Las proteínas totales son el resultado de sumar los distintos componentes
proteicos presentes en el organismo tales como: Alfa1, alfa2, beta gamma
globulina y albúmina. Las proteínas fraccionadas, al contrario de las proteínas
totales, miden la cantidad específica de cada proteína. Ambas
pruebas, proteínas totales y fraccionadas, son útiles a la hora de determinar
estados anormales y enfermedades que pueden afectar a nuestro organismo.
Cuando se hace referencia a las proteínas totales en suero, se trata de una
medición aproximada de todas las proteínas presentes en la parte líquida de la
sangre. La prueba que determina las proteínas totales en sangre, examina
específicamente la cantidad total de dos tipos de proteínas: globulinas y
albúmina.
Este examen a menudo se hace para diagnosticar problemas nutricionales,
enfermedad renal o enfermedad hepática. Si los niveles de proteínas
totales son anormales, por ejemplo en caso de que el paciente
presente proteínas totales bajas, es necesario realizar exámenes adicionales
con el fin de identificar el problema específico.

Propiedades

 Solubilidad
Las proteínas son solubles en agua cuando adoptan una
conformación globular.

 Capacidad amortiguadora
Las proteínas tienen un comportamiento anfótero y ésto
las hace capaces de neutralizar las variaciones de pH del medio,
ya que pueden comportarse como un ácido o una base y por
tanto liberar o retirar protones (H+) del medio donde se encuentra

 Especificidad
Se refiere a que cada una de las especies de seres vivos es
capaz de fabricar sus propias proteínas (diferentes de las de
otras especies).

Valores normales de proteínas totales

El rango normal de proteínas totales es de 6.0 a 8.3 gm/dl (gramos por
decilitro). La cantidad considerada como valor normal de proteínas
totales puede variar ligeramente entre pruebas realizadas por distintos
laboratorios.

Método de Biuret
Se basa en que los enlaces peptídicos de las proteínas
y de los péptidos con dos o más enlaces de este tipo
reaccionan en solución alcalina con iones cúpricos
formando un complejo de color violeta o lila. La
intensidad del color obtenido es proporcional a la cantidad de proteína en la
muestra.

Reacción del Biuret.

En medio alcalino regulado, los enlaces peptídicos de las proteínas reaccionan
con los iones cúpricos del reactivo, dando un complejo de color azul- violáceo
cuya intensidad medida fotométricamente a 540 nm, es proporcional a la
concentración de proteínas totales de la muestra.

MATERIALES
Agua destilada

RESULTADOS

CONCLUSIONES
1. En esta práctica se determinó proteínas totales en un suero, las
proteínas son esenciales para la vida ya que pueden aparecer en forma
de enzimas, hormonas, factores de coagulación. Es importante este
estudio ya que se puede reflejar el estado nutricional del paciente.
2. A través del método colorímetro de Biuret se cuantifica las proteínas
totales presentes en la muestra, en la que mientras más oscura la
coloración de la muestra mayor la concentración de proteínas.
3. La centrifugación y el baño de maría sirven de “catalizadores” de la
reacción.
 4. Las proteínas se necesitan para la mayoría de las funciones normales
del cuerpo, como el mantenimiento, crecimiento, reproducción, lactación
y producción de pelo. El déficit de proteína en la dieta reduce las
reservas en sangre, hígado y músculos y predisponen a los animales a
padecer una variedad de enfermedades graves o incluso fatales.
5. El plasma está constituido por una serie de proteínas que desempeñan
funciones vitales en el organismo.
RECOMENDACIONES
1. Tener en cuenta que los reactivos son para uso diagnóstico "in vitro".
2. Es recomendable tener conocimiento sobre los reactivos provistos, ya
que son corrosivos. Provocan irritación cutánea y ocular, quemaduras
graves en la piel y lesiones oculares graves.
3. Evitar el contacto con los ojos, la piel o la ropa
4. En caso de contacto con los ojos: Enjuagar cuidadosamente con agua
durante varios minutos.
5. En caso de contacto con la piel: Lavar con agua y jabón abundantes.
6. Llevar guantes/prendas/gafas/máscara de protección y utilizar los
reactivos guardando las precauciones habituales de trabajo en el
laboratorio.
7. Todos los reactivos y las muestras deben descartarse de acuerdo a la
normativa local vigente
BIBLIOGRAFIA
1. https://quizlet.com/167542844/determinacion-de-proteinas-totales-en-
suero-mediante-el-metodo-de-biuret-flash-cards/
2. http://www4.ujaen.es/~esiles/TEMA3PROTEINASalumno.pdf
3. http://www.wiener-
lab.com.ar/VademecumDocumentos/Vademecum%20espanol/proteinas
_totales_aa_sp.pdf
4. http://trabajosmedicos.blogspot.pe/2012/07/determinacion-de-proteinas-
totales.html
5. https://proteinas.org.es/proteinas-totales
6. https://es.scribd.com/doc/44104775/Determinacion-de-Proteinas-y-de-
Albumina-3
7. https://es.slideshare.net/lesteryahh/bioquimica-lab-2