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Por supuesto,
los datos son una parte muy importante de la ciencia: El agua se congela a los 0
grados centígrados, y la tierra gira alrededor del sol. Pero la ciencia es mucho,
mucho más. La ciencia incluye:
★ Observar lo que está sucediendo;
★ Clasificar u organizar información;
★ Predecir lo que sucederá;
★ Comprobar predicciones bajo condiciones controladas para ver si son
correctas; y
★ Sacar conclusiones.
La ciencia incluye probar y cometer errores— haciendo pruebas, fracasando e
intentando de nuevo. La ciencia no nos da todas las repuestas. Requiere que
tengamos algún nivel de escepticismo para que nuestras “conclusiones”
científicas se puedan modificar o cambiar enteramente según hacemos nuevos
descubrimientos.
En los últimos años, el estudio de la estructura y la función de los genes ha sido el subcampo más
destacado de la biología molecular.
En los últimos 40 años, los biólogos moleculares han aprendido a caracterizar, aislar y manipular
los componentes moleculares de las células y los organismos. Estos componentes incluyen ADN ,
el repositorio de información genética; ARN , un pariente cercano del ADN cuyas funciones van
desde servir como una copia de trabajo temporal del ADN hasta funciones estructurales y
enzimáticas reales, así como una parte funcional y estructural del aparato de traducción; y
proteínas , el principal tipo de molécula estructural y enzimática en las células .
Clonación de expresión
Una de las técnicas más básicas de biología molecular para estudiar la función de la proteína es la
clonación de la expresión. En esta técnica, el ADN que codifica una proteína de interés se clona
(usando enzimas de PCR y / o restricción en un plásmido (conocido como vector de expresión).
Este plásmido puede tener elementos promotores especiales para impulsar la producción de la
proteína de interés, y puede también tienen marcadores de resistencia a antibióticos para ayudar
a seguir el plásmido.
Este plásmido se puede insertar en células bacterianas o animales. La introducción de ADN en las
células bacterianas se denomina transformación , y se puede efectuar mediante varios métodos,
incluida la electroporación , la microinyección [?] Y la química. La introducción de ADN en células
eucariotas , como las células animales, se denomina transfección. Están disponibles varias técnicas
de transfección diferentes, que incluyen la transfección con fosfato de calcio, liposomas y
reactivos de transfección patentados tales como Fugene. El ADN también se puede introducir en
las células usando virus como portador. En tales casos, la técnica se llama transducción viral y se
dice que las células se transducen.
En cualquier caso, el ADN que codifica una proteína de interés ahora está dentro de una célula, y
la proteína se está expresando ahora. Una variedad de sistemas, tales como promotores
inducibles y factores específicos de señalización celular, están disponibles para ayudar a expresar
la proteína de la proteína. interés en alto nivel. Se pueden extraer grandes cantidades de una
proteína de la célula bacteriana o eucariota. La proteína puede analizarse para determinar la
actividad enzimática en una variedad de situaciones, la proteína puede cristalizarse para estudiar
su estructura terciaria o, en la industria farmacéutica, estudiar la actividad de nuevos fármacos
contra la proteína.
PCR
La reacción en cadena de la polimerasa es una técnica extremadamente versátil para copiar ADN y
ARN. En resumen, la PCR permite copiar un solo ADN (millones de veces) y modificarlo de formas
predeterminadas. Por ejemplo, la PCR puede usarse para introducir sitios de enzimas de
restricción o mutar una parte particular de ADN. La PCR también puede usarse para encontrar un
gen particular en una biblioteca de ADNc.
Electroforesis en gel
En la transferencia de Western , las proteínas primero se separan por tamaño, en un gel de página
SDS. Las proteínas en el gel se transfieren luego a una membrana de PVDF o nitrocelulosa. Esta
membrana puede ser probada con soluciones de anticuerpos. Los anticuerpos que se unen a la
proteína de interés se pueden visualizar mediante una variedad de técnicas, que incluyen
quimioluminiscencia o radioactividad.
Los anticuerpos también pueden usarse para purificar proteínas. Se generan anticuerpos para una
proteína y luego se unen a la proteína. A continuación, se puede usar otra proteína para reducir
los anticuerpos y llevar la primera proteína.
Francis Crick
Rosalind Franklin
Max Perutz
James Watson
Francois Jacob
Christiane N sslein-Volhard
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Ver también:
Genoma
Proteoma