Endomembranas

e organelas
Modelo do Mosaico Fluido

Singer-Nicolson
 Endomembranas e organelas

1. Endossomas
2. Fagossomas e autofagossomas
3. Lisossomas
4. Núcleo
5. Retículo Endoplasmático Rugoso
6. Retículo Endoplasmático Liso
7. Aparelho de Golgi
8. Vesículas de secreção
9. Peroxissomos
10. Mitocôndrias
 Endomembranas e organelas

• Endossomas
• Fagossomas e autofagossomas
• Lisossomas
• Núcleo
• Retículo Endoplasmático Rugoso
• Retículo Endoplasmático Liso
• Aparelho de Golgi
• Vesículas de secreção
• Peroxissomos
• Mitocôndrias
 Endomembranas e organelas
Cromatina Envelope nuclear
Nucléolo Núcleo
Retículo endoplasmático Memb.
liso (REL) plasmática
Citosol
Lisossoma
Mitocôndria

Centríolo Retículo
endoplasmático
Centrômero rugoso (RER)
Ribossomos
Aparelho de Golgi
Microvilosidase
Vesículas de
Microfilamento secreção em
exocitose
Microtúbulo

Filamentos Peroxissomos
intermediários
 Endomembranas e organelas

Todas as organelas e partículas estão suspensas no citosol

ou citoplasma, que:
• é uma solução aquosa altamente concentrada
• possui composição complexa, formada por proteínas
(estruturais, enzimas, particulas complexas – ribossomos,
polissomos, etc), aminoácidos, RNAs, metabólitos, ions
inorgânicos, etc.
• possui consistência de gel
 Endomembranas e organelas

• Endossomas
• Fagossomas e autofagossomas
• Lisossomas
• Núcleo
• Retículo Endoplasmático Rugoso
• Retículo Endoplasmático Liso
• Aparelho de Golgi
• Vesículas de secreção
• Peroxissomos
• Mitocôndrias
 ENDOSSOMO
• Vesícula (organela envolvida por membrana) contendo substâncias
endocitadas.
• ENDOCITOSE ➫ Englobamento de quaisquer substâncias que estão do
lado de fora da célula e seu transporte para dentro da célula.
• PINOCITOSE ➫ Termo antigo e pouco utilizado. Englobamento substâncias líquidas por
invaginação.
 ENDOCITOSE
• Função:
– Transporte de macromoléculas não permeáveis à membrana
plasmática - nutrição.
– Reciclagem de estruturas extracelulares da membrana.
– Terminar estímulo em receptores membranares.
– Invasão ou infecção (alguns vírus)
 FAGOSSOM
•
O
Vesícula (organela envolvida por membrana) contendo células fagocitadas.
• FAGOCITOSE ➫ Englobamento de células ou bactérias por outras células.
Pseudópodos (lâminas de citoplasma que “envolvem” as células
fagocitadas).

pseudópodos
bactérias

pseudópodos

Fagocitose de duas bactérias Fagocitose de dois leucócitos velhos

por um leucócito. por um macrófago.
 FAGOCITOSE
• Função:
– Defesa imunológica.
– Resposta inflamatória.
– Reciclagem de células.
– Invasão ou infecção (algumas bactérias e protozoários)
 AUTOFAGOSSOM
•
O
Organelas intracelulares envolvida por membrana dupla contendo
constituintes celulares - autofagia.

• AUTOFAGIA ➫ Englobamento organelas por extensões membranares do

retícuto endoplasmático.
• Uma mitocôndria possui meia vida de
10 dias no fígado. Após 10 dias, a
mitocôndria é destruída e seus
constituintes reciclados pela célula.

macroautofagia

microautofagia
 AUTOFAGIA
• Função:
– Reciclagem de constituintes celulares.
– “Economia” energética na privação de nutrientes.
– Proteção contra estímulo nocivo ou estresse ambiental.
– Diferenciação celular
 LISOSSOMOS
Cromatina Envelope nuclear
Nucléolo Núcleo
Retículo Memb.
endoplasmático liso plasmática

Lisossomo
Mitocôndria

Centríolo Retículo
endoplasmáti
Centrômero
co rugoso
Ribossomos
Aparelho de Golgi
Microvilosidase
Vesículas de
Microfilamento secreção em
exocitose
Microtúbulo

Filamentos Peroxissomos
intermediários
 LISOSSOMOS

• Organelas de conteúdo ácido ricas

em enzimas digestivas:
– Mais de 40 tipos de hidrolases

• Originadas do Aparelho de Golgi

• Fundem-se aos endossomos,
fagossomos e autofagossomos,
formam:
– Endolisossomos
– Fagolisossomos
– Autofagolisossomo
 LISOSSOMOS
• Função
– Degradação do conteúdo de vesículas com as quais se funde
– Nutrição e Estoque de nutrientes
– Excreção
– Reciclagem de constituintes celulares.
– Destruição de células e microorganismos fagocitadas (defesa)
 LISOSSOMOS
• Os lisossomos são centrais de encontro de vesículas cujo conteúdo
deve ser degradado.

Bactéria Fagossomo
Fagocitose
Memb.
Plasmática
Endossomo precoce

Endocitose
Endossomo Lisossomo
tardio

RE Mitocôndria

Autofagia
 LISOSSOMOS

• Enzimas lisossomais e seus substratos

 LISOSSOMOS

Estrutura

• Esféricos e de tamanho
variável.
• Formados por uma bicamada
lipídica.
• Identificação = fosfatase ácida.

Face interna  revestimento de

carboidratos  proteção contra a
ação do conteúdo lisossomal.
LISOSSOMOS Visualização histoquímica dos
lisossomos. Precipitado de fosfato de
chumbo para localizar a fostatase ácida.

Lisossomo pH 5,0
Autofagossomo pH 5,5
Endossomo pH 6,5.

Proteínas marcadas com

substâncias fluorescentes
e fagocitadas.
 Endomembranas e organelas

• Endossomas
• Fagossomas e autofagossomas
• Lisossomas
• Núcleo
• Retículo Endoplasmático Rugoso (RER)
• Retículo Endoplasmático Liso (REL)
Sistema de Endomembranas
• Aparelho de Golgi
• Vesículas de secreção
• Peroxissomos
• Mitocôndrias
O Sistema de Endomembranas

Retículo
Endoplasmático
Rugoso (RER)

Retículo
Endoplasmático
Liso (REL)

Aparelho de
Golgi

Vesículas de
secreção
 RER-REL-Golgi

• RER: rede de membranas intracelulares de formato achatado e bem

organizado, com ribossomos aderidos.

• REL: rede de membranas de formato tubular e desorganizado.

Ausência de ribossomos. O REL e RER podem se interconectar. RER
e REL são a mesma organela, porém de organização funcional distinta

• Golgi: pilha de sáculos (cisternas) achatadas e superpostas, com uma

face côncava (trans) e outra convexa (cis). Ambas as regiões
apresentam inúmeras vesículas nas proximidades, que chegam (cis)
ou que saem (trans).

• RER e Golgi: trabalham em conjunto.

RETÍCULO ENDOPLASMÁTICO RUGOSO (RER)
eCromatina
LISO (REL) Envelope nuclear
Nucléolo Núcleo
Memb.
REL plasmática
Citosol
Lisossomo
Mitocôndria

Centríolo
Centrômero RER
Ribossomos
Aparelho de Golgi
Microvilosidase
Vesículas de
Microfilamento secreção em
exocitose
Microtúbulo

Filamentos Peroxissomos
intermediários
 RETÍCULO ENDOPLASMÁTICO RUGOSO (RER)
e LISO (REL)
RER REL
• Ribossomos • Sem ribossomos

• Cisternas • Túbulos (30-60

nm)
(20-30 nm)
• Lipídeos
• Proteínas RER REL

Função Função
• Síntese protéica • Síntese lipídica
• Endereçamento • Síntese de
de algumas hormônios
proteínas
• Detoxificação
RER REL
• Secreção celular
• Especializações
(retículo
sarcoplasmático)
Curiosidade “experimental”
RETÍCULO ENDOPLASMÁTICO RUGOSO (RER)

• Função:
– Síntese de proteínas que serão secretadas
– Síntese de proteínas de membrana
– Armazenamento de íons cálcio
RETÍCULO ENDOPLASMÁTICO RUGOSO (RER)

mRNA que codifica proteína

citosólica é traduzido em
polirribossomos

mRNA que codifica proteína

que será secretada é traduzido
em ribossomos do RER
RETÍCULO ENDOPLASMÁTICO RUGOSO (RER)

Como é discriminado o mRNA que será traduzido no RER?

Hipótese do Sinal:

Os mRNAs das proteínas que serão secretadas possuem

sequência para síntese do peptídeo sinal ⇒ direciona a
proteína à membrana do RER
RETÍCULO ENDOPLASMÁTICO RUGOSO (RER)
Como é discriminado o mRNA que será traduzido no RER?
RETÍCULO ENDOPLASMÁTICO RUGOSO (RER)
Como é discriminado o mRNA que será traduzido no RER?

• RNAm apresenta uma sequência sinal que se traduz em um peptídeo

sinal (hidrofóbico) no citosol.

• Uma proteína que reconhece o peptídeo sinal (SRP – signal

recognition particle) citosólica reconhece e se liga no peptídeo sinal e a
síntese protéica pára.

• O sistema (RNAm/ribossomo) migra para as membranas do RER e

conecta-se ao receptor para SRP.

• O canal de translocação se aproxima e a sub-unidade maior do

ribossomo liga-se neste canal, que fica continuo com o canal
ribossomal.

• A SRP se solta, a síntese protéica reinicia e o peptídeo nascente

penetra no lúmen do RER.
RETÍCULO ENDOPLASMÁTICO RUGOSO (RER)
• E as proteínas integrais de membranas?

• E quando possuem possuem múltiplos sítios de

ancoramento nas membranas?
RETÍCULO ENDOPLASMÁTICO RUGOSO (RER)
A montagem e a conformação final das proteínas de membranas é feita
com a ajuda de chaperonas
RETÍCULO ENDOPLASMÁTICO RUGOSO (RER)
A montagem e a conformação final das proteínas de membranas é feita
com a ajuda de chaperonas

Muitas proteínas sintetizadas no RER

são glicosiladas pela adição de um
oligossacarídeo ao aminoácido Asn
(N-ligado).

Calreticulina (CRT) e calnexina (CNX) - membros de

uma família de chaperonas do RE cuja atividade
depende da presença de íons cálcio, auxiliam o
dobramento e montagem das maioria das
glicoproteínas N-ligadas que passam através do RE.
RETÍCULO ENDOPLASMÁTICO RUGOSO (RER)
• E as proteínas periféricas de membranas?
Algumas proteínas são ancoradas à membrana pela ligação covalente a
um ancorador glicosilfosfatidilinositol (âncora GPI) por mecanismo que
envolve a retirada da região C-terminal da proteína.
 RETÍCULO ENDOPLASMÁTICO LISO (REL)

RER REL
RETÍCULO ENDOPLASMÁTICO LISO (REL)

• Função:
– Síntese da maioria dos lipídios de membrana (fosfolipídios e
colesterol) - também ocorre síntese nos peroxissomo.

O fosfolipídio mais abundante é a fosfatidilcolina, também conhecida

como LECITINA.
RETÍCULO ENDOPLASMÁTICO LISO (REL)

Translocadores de fosfolipídeos
(Flipases ou scramblase) transportam
lipídeos de uma bicamada lipídica para
outra.

Proteínas de troca de fosfolipídios

ajudam a transportar fosfolipídios do
REL para as membranas das
mitocôndrias e peroxissomos.
APARELHO DE GOLGI
Cromatina Envelope nuclear
Nucléolo Núcleo
Retículo Memb.
endoplasmático liso plasmática
Citosol
Lisossomo

Mitocôndria

Centríolo Retículo
endoplasmáti
Centrômero
co rugoso
Ribossomos
Aparelho de
Microvilosidase
Golgi
Vesículas de
Microfilamento secreção em
exocitose
Microtúbulo

Filamentos Peroxissomos
intermediários
APARELHO DE GOLGI
Função:

- Modificação de proteínas que são sintetizadas no RER (estação de

separação e distribuição dos produtos do RER)
- glicosilações (é um dos principais sítios de síntese de carboidratos)
- empacotamento

- Grande parte dos carboidratos produzidos no golgi são conectados a muitas

ptns e lipídeos que chegam do RER e REL como cadeias laterais de
oligossacarídeos.
- Pectina e Hemicelulose da parede celular de células vegetais
- Glicosaminoglicanas da matriz extracelular das células animais
APARELHO DE GOLGI

• Muitas proteínas são modificadas pela adição de oligossacarídeos em

grupos OH de cadeias laterais de serina e treonina: Esses
oligossacarídeos são denominadaos de O-ligados;

• Os carboidratos da
membrana celular estão
voltados para o lado de
dentro das vesículas, que
são equivalentes ao lado de
fora da célula.
APARELHO DE GOLGI
• Golgi: pilha de sáculos (cisternas) achatadas e superpostas, com uma face
convexa ou de entrada de vesículas (cis) e outra côncava ou de saída de
vesículas (trans). Ambas estão conectadas a compartimentos especiais (Cis-
Golgi-Network e Trans-Golgi-Network), que são compostos por uma rede de
estruturas tubulares em forma de cisterna

• RER e Golgi: trabalham em conjunto.

APARELHO DE GOLGI

• O transporte de vesículas do RER para o Golgi se dá a partir de regiões quase

totalmente livres de ribossomos em vesículas de transição.

Os compartimentos estão todos

em constante comunicação;

Ptnas passam por

compartimentos onde são
modificadas;
APARELHO DE GOLGI

O tráfego entre RER e o Golgi é bidirecional e tem duas funções principais:

- Manter quantidades estáveis de

membranas em cada compartimento

- Recuperar proteínas do
compartimento doador que são
necessárias para o seu normal
funcionamento
APARELHO DE GOLGI
Proteínas residentes do RER são seletivamernte recolocadas ou redirecionadas
para o RER a partir do Cis-Golgi-Network. KDEL (Lisina, ácido aspártico, ácido
Gluâmico e Leucina) é o sinal de retenção no RE.
• A saída do RER pode ser considerada como ponto de controle de
qualidade de proteínas. Se a conformação de uma proteína ou
montagem das sub-unidades protéicas não for completada no
RER, a proteína é degradada.
APARELHO DE GOLGI

• O Golgi é abundante em células que são especializadas em

secreção.

Exemplo: as células caliciformes (globet) do intestino, que produzem

grande quantidade de muco rico em polissacarídeo na luz do intestino.
Nessas células, grandes vesículas são encontradas na parte do Trans-
Golgi-Network.
Vesículas
Aparelho secretoras de muco
de Golgi
Núcleo

Secreção
de muco
pela face
apical
APARELHO DE GOLGI

Secreções Constitutiva e regulada

• Constitutiva:
- Quando as vesículas do Golgi são secretadas diretamente, sem
armazenamento no citosol, de forma constitutiva.
- Ex. Células produtoras de matriz.

• Regulada:
- Quando as vesículas do Golgi são armazenadas no citosol perto do
ápice da célula (podem fundir-se umas com as outras formando
grânulos maiores até haver um sinal (nervoso ou hormonal) para
secreção.
- Ex. Glândulas
 EXOCITOSE
• Saída de material pela célula através da fusão de vesículas
intracelulares à membrana plasmática.
– vacúolos excretores (material não digerido e resíduos do
metabolismo)
– vesículas de secreção (materiais produzidos pelas células,
principalmente glandulares).