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UNIVERSIDAD AUTÓNOMA DEL ESTADO DE MORELOS

FACULTAD DE CIENCIAS BIOLÓGICAS

PREPARACION DE MEDIOS DE CULTIVO PARA EL AISLAMIENTO


DE DIFERENTES TIPOS DE HONGOS
Pleurotus ostreatus
IMPLEMENTADAS EN USO Y MANEJO DEL LABORATORIO

LUIS EDGAR DEMEDICIS CASTRO


DIANA LAURA OSORIO VEGA

JICARERO, MORELOS JUNIO, 2018


Introducción
El cultivo de algunas spp de Pleurotus es de gran importancia económica. Uno de los
más destacados es el Pleurotus ostreatus; un hongo que crece sobre los arboles u
otros árboles leñosos, alimentándose de la madera de la planta y destruyéndola.
La morfología de este hongo es:
Sombrero redondeado
Superficie lisa, abombada y convexa
Su color es grisaseo amarillento o grisaseo marron
Posee una laminillas (parte inferior del sombrero)
Pie o tallo hasta los bordes
Anchas, espaciadas
Con tonalidades blancas, amarillentas o de color crema
Posee esporas

Imagen 1. Cuerpo fructífero del Pleurotus


ostreatus
Imagen 2. Morfología del genero Pleurotus

Los medios de cultivo son utilizados para el desarrollo del micelio de los hongos en el
laboratorio; se emplean medios de cultivo solidos que se les proporcionan al hongo los
nutrimentos necesarios para su desarrollo. Los medios de cultivo son generalmente
vendidos por casas comerciales en diferentes presentaciones, como el caso del agar
con extracto de malta y el agar de papa y dextrosa, sin embargo es posible prepáralos
de manera casera.

Objetivo
Manejar los materiales e instrumentos para desarrollar 2 diferentes medios de cultivo
para la producción del hongo Pleurotus ostreatus.

Material para preparar el medio de cultivo Agar con dextrosa y papa ingredientes:
Papa 200 g
Agar-Agar 15 g (LO PROPORCIONA EL PROFESOR)
Dextrosa o Glucosa 20 g
Levadura 2 g
Tela para filtrar
Bascula granataria
Agua destilada o purificada

Procedimiento
Casero:
Pelar y poner a hervir la papa en 500 ml de agua destilada o purificada durante 10- 15
min. El extracto se filtra y se adiciona más agua hasta ajustar 1000 ml para reponer lo
que se evaporo. Se agrega los otros ingredientes y se calienta a fuego lento moviendo
constantemente durante 1-2 min hasta que queden totalmente disueltos.
Imagen 3. Se mide los 200 g de papa en la báscula granataria

Imagen 4. Medición de 20 g de azúcar (dextrosa o


glucosa) y 2 g de Levadura

Imagen 5. Agua destilada hirviendo con la papa, dextrosa y


levadura
Comercial:
Fórmula / Litro
Infusión de Papa (Potato Infusion) a partir de 200 g (4 g)
Dextrosa (Dextrose) ( 20 g)
Agar (15 g)
*4,0 g de extracto de papa es equivalente a (200 g de infusión de papas)
pH Final: 5,6 ± 0,2 a 25°C
La fórmula puede ser ajustada y/o suplementada de acuerdo a los requerimientos para
cumplir con las especificaciones de rendimiento o desempeño.

Imagen 6. Agar de dextrosa y papa comercial


Procedimiento 1.
1. Suspenda 39 g del medio de cultivo en un litro de agua purificada
2. Caliente agitando frecuentemente y permita que hierva por un minuto para disolver
completamente el medio.
3. Autoclave a 121°C durante 15 minutos

Material para esterilizar:


Olla de presión o autoclave
Matraz Erlen Meyer
Alcohol al 96°
Pinzas
Cajas de Petri
Lámpara de alcohol o mechero
Imagen 7. Esterilizaron del material

Revisión de las técnicas para cultivar hongos:

Imagen 8. Proceso grafico de los pasos para los cultivos


de Agar para cultivar Pleurotus

1- Preparación y vaciado de medios de agar en cajas de Petri


2- Germinación de esporas y aislamiento de micelio de un hongo puro
3- Expansión de masa miceliar en medio de agar
4- Preparación de granos
5- Inoculación de granos con el micelio puro desarrollado en medio de agar
6- Incubación de grano inoculado
7- Inoculación del grano (spawn) en el sustrato
8- Incubación del sustrato (mantenimiento de temperatura, humedad del 85-92%,
incrementar el aire, nivelar los niveles de luz y dióxido de carbono.

Imagen 9. Agar en Matraz de Meyer para ser esterilizado


en la autoclave

Imagen 10. Utensilios previamente desinfectados


Imagen 11. Vaciar el agar en las cajas Petri

Imagen 12. Corte de micelio del hongo


Imagen 13. Inserción del corte del hongo al medio de cultivo

Manejo de residuos
Las sustancias y utensilios son únicamente para el uso en el laboratorio.

Limitaciones del Procedimiento


Debido a variaciones nutricionales algunas cepas pueden tener un pobre crecimiento o
ausencia de crecimiento en este medio.

Conclusión
Aunque los hongos sean muy exigentes y estrictos en cuanto a su crecimiento fuera de
la naturaleza, existen medios de cultivo que ofrecen ciertas condiciones para que estos
organismos crezcan y así puedan ser estudiadas.
El medio de cultivo DPA es un excelente sustrato para que ciertos hongos puedan
crecer, ya que este medio permite el crecimiento tanto de hongos como de levaduras,
favorece la esporulación y también permite visualizar las características morfológicas de
los organismos.
Además de que es un medio muy sencillo de realizar, es muy económico y los
ingredientes que este requiere se encuentran en todas partes, pues son muy comunes.
En este medio de cultivo se pueden cosechar hongos muy comunes como lo es el
champiñón y el hongo de cazahuate (Pleurotus ostreatus), y sabiendo cultivar y
conservar bien estas setas, se pueden obtener grandes ganancias, hablando es sentido
económico.
De ahí la importancia de saber y conocer las condiciones adecuadas que estos
organismos requieren para su buen cultivo y su buen aprovechamiento.
Anexos

Imagen 14. Practica en el laboratorio

Bibliografía
Jose Luis Barbado. 2003. Hongos comestibles. Editorial Albatros. Buenos aires, p. 74-
76.
2004. Evaluation of Pleurotus ostreatus and Pleurotrus sajor-caju nutriotinal
characteristics when cultivated in different lignocellulosic wastes Food Chemistry
Volume 88, Issue 3, December 2004, Pages 425-428.

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