INSTITUTO POLITÉCNICO NACIONAL

ESCUELA NACINAL DE CIENCIAS BIOLOGICAS

PRACTICA #9: REACCIONES DE ADICCION NUCLEOFILICA Y CONDENSACION ALDÓLICA.

ALUMNOS: Reyes Reyes Alexis Yamil / Rodea Correa Daniel/ Urriolagoita Nava María Fernanda

EQUIPO:2

SECCION 2

Profesora: Vargas Díaz Elena

INTRODUCCIÓN: SOLUCIÓN A NEGATIVO

SOLUCIÓN D POSITIVO
Las proteínas son las macromoléculas más versátiles de
los seres vivos, ya que estas pueden funcionar como
catalizadores, transporte y almacén de otras moléculas
como el oxígeno, proporcionan apoyo mecánico y REACCIÓN DE BIURET
protección inmunológica, generan movimiento, trasmiten
impulsos nerviosos y controlan el crecimiento y la SUSTRATO OBSERVACIONES
diferenciación de algunas células, también son una de las AGUA DESTILADA NEGATIVO
moléculas orgánicas más abundantes en los sistemas SOLUCION A NEGATIVO
vivos ya que una célula puede contener miles de SOLUCION C POSITIVO
proteínas, son mucho más diversas en estructura y SOLUCION D POSITIVO
función que otras clases de macromoléculas; todas las
proteínas se componen de otras moléculas llamadas
aminoácidos; cada proteína está compuesta de una o más
cadenas lineales de aminoácidos, cada una de la cuales REACCIÓN CON NINHIDRINA
se denomina polipéptido. Las proteínas contienen 20 tipos
de aminoácidos. Los aminoácidos se componen de un SUSTRATO OBSERVACIONES
átomo central de carbono, también llamado carbono alfa AGUA DESTILADA NEGATIVO
(α), unido a un grupo amino 𝑁𝐻2 , un grupo carboxilo SOLUCION B POSITIVA
(COOH) y un átomo de hidrógeno. SOLUCION C NEGATIVO
SOLUCION D NEGATIVO
OBJETIVOS:
SOLUCION NEGATIVO
● Poner en evidencia los grupos funcionales de los AMINOACIDO
aminoácidos y la reactividad de las proteínas PATRÓN
mediante reacciones cualitativas.
● Efectuar la hidrólisis total de una proteína.
● Identificar algunos aminoácidos presentes en un REACCIÓN CON 𝐻𝐻𝐻2
hidrolizado de proteína, por medio de sus
propiedades físico-químicas. SUSTRATO OBSERVACIONES
● Identificar por cromatografía en placa fina algunos de AGUA DESTILADA NEGATIVO
los aminoácidos presentes en un hidrolizado de SOLUCION A POSITIVO
proteína. SOLUCION C PARCIAL POSITIVO
RESULTADOS Y DISCUCION: SOLUCION D PARCIAL POSITIVO

Solución A: Hidrólisis de Grenetina ACCIÓN REGULADORA DE AMINOÁCIDOS

Solución B: Solución neutralizada de hidrolizado de

grenetina SOLUCI INDICADOR COLOR GOTA GOTA
ON INICIAL S HCI S
NaOH
Solución C: Solución de grenetina sin hidrolizar
AGUA ROJO ROJO 1
Solución D: Solución de Albúmina
DESTILA CONGO AZUL
DA
REACCIÓN XANTOPROTEÍCA (CON 𝐻𝐻𝐻3 ) 5
SOLUCI ROJO ROJO AZUL
SUSTRATO OBSERVACIONES ON B CONGO
SOLUCION A Positivo Naranja
SOLUCION D Parcialmente Positivo AGUA FENOFTALE TRANSPA 1
mínimo naranja. DESTILA ÍNA RENTE ROSA
(CON (𝐻𝐻3 𝐻𝐻2 )2 𝐻𝐻 ) DA

SUSTRATO OBSERVACIONES
SOLUCI FENOFTALE TRANSPA 4 rojo congo es de 5.2, así que el empleo de gotas de
ÓN B ÍNA RENTE ROSA HCl para alcanzar una coloración azul en la
solución B confirma que se lleva a cabo una
reacción ácido-base. La zona de viraje de la
CROMATOGRAFÍA EN PLACA FINA fenoftaleina es en un pH de 8.6, de tal manera que
la adición de unas gotas de NaOH a la solución B
En la Figura 1.1 se muestra como quedo nuestra demuestra la propiedad anfótera.
placa de cromatografía. CONCLUSIÓN:

FRENTE FRENTE Rf Existen varios métodos para identificar los

DEL DE LA aminoácidos presentes en una proteína como es la
DISOLVENT MANCHA reacción Xantoproteica para identificar
E aminoácidos aromáticos, la reacción de
VALINA 2 CM 0.5 CM 0.58 precipitación para identificar enlaces disulfuro en
GLICINA 2 CM 0.7 CM 0.44 los aminoácidos, la reacción de biuret para
SOLUCIÓN B 2 CM 1 CM 0.46 identificar enlaces peptídicos, la reacción con
ninhidrina para identificar aminoácidos libres , la
reacción con ácido nitroso para identificar aminos
libres de los péptidos, por último en la
cromatografía identificar los aminoácidos presentes
en una proteína hidrolizada con base a su
polaridad.

CUESTIONARIO:

1. ¿Cómo sabría si la hidrólisis fue parcial o total?

Gracias a las pruebas de identificación que nos

ayudaran a saber si fue parcial o total, por ejemplo la
reacción de Biuret la cual nos ayuda a identificar enlaces
peptídicos, si la prueba resulta positiva se sabe que no
hubo una hidrolisis total, ya que aún existen
aminoácidos, si viran a azul la reacción fue positiva fue
una hidrolisis parcial.

2. Describa 3 tipos de hidrólisis de proteínas.

En la reacción Xantoproteíca:
Se demostró la presencia de anillos aromáticos,
debido a que ambos tubos mostraron una
coloración positiva. En reacción de precipitación:
Se demostró la presencia de enlaces disulfuro. En
reacción de Biuret: En agua destilada y solución A
no hubo reacción lo cual demuestra una hidrolisis
total pues esta reacción se puede llevar a cabo por
los enlaces peptídicos; solución D y C encontramos
albumina y ambos presentan reacción positiva y por
tanto concluimos que la albumina tiene enlaces
peptídicos en su molécula. En la Reacción con
Ninhidrina: Se demostró la presencia de grupos
amino en cada solución. En todos los tubos excepto
en el que contenía agua hubo una coloración. En la
reacción con Acido Nitroso: Se demuestra que en
todas las soluciones hay grupos amino terminales
pero en la sol. B se encuentra en mayor proporción
ya que la coloración es mayor. En reacción de
acción reguladora de aminoácidos: Los -
α−aminoácidos son anfóteros. La zona de viraje del
La hidrólisis de proteínas es un proceso en el cual se
produce la ruptura de la estructura primaria, es decir la
ruptura de la secuencia normal de una proteína; lo cual
termina por fragmentar las proteínas para convertirlas en
aminoácidos.
Hay 3 tipos de hidrolisis:
Hidrólisis ácida Se basa en la ebullición prolongada de la
proteína con soluciones ácidas fuertes (HCl y H2SO4).
Este método destruye completamente el triptófano y
parte de la serina y la treonina.
Hidrólisis de proteínas básica Respeta los aminoácidos
que se destruyen por la hidrólisis anterior, pero con gran
facilidad, forma racematos. Normalmente se utiliza
(NaOH e BaOH).
Hidrólisis enzimática: La hidrólisis proteica se realiza
normalmente en un reactor, con control de agitación, pH,
temperatura y tiempo del proceso. El sustrato se
disuelve o Re suspende en agua hasta que el pH y la
temperatura se estabilizan; a continuación, se agrega la
proteasa dando inicio a la hidrólisis. A medida que ésta
progresa se produce una disminución del pH debido a la
rotura de los enlaces peptídicos. En los casos de
hidrólisis enzimática el pH debe ser mantenido en el
óptimo de la enzima mediante la adición de base diluida.
Para finalizar la hidrólisis proteica la enzima puede ser
inactivada con calor, mediante una disminución del pH o
con una combinación de ambos. O también puede ser
retirada del medio mediante filtración y la proteína
finalmente precipitada. El material de partida utilizado
para la obtención de los hidrolizados proteicos puede ser
de origen animal, vegetal o bacteriano. Se utilizan
enzimas proteolíticas cuya actividad es lenta y a menudo
incompleta, sin embargo no se produce racemización y
no se destruyen los aminoácidos; por lo tanto es muy
específica.
3. Indicar qué tipo de aminoácidos o proteínas dan
positiva la reacción xantoproteíca.
La prueba da resultado positivo en aquellas proteínas
con aminoácidos portadores de grupos bencénicos,
tirosina, fenilalanina y triptófano
4. Describa el mecanismo que se lleva a cabo en la
reacción xantoproteíca.
Con ALBUMINA da una coloración amarillenta al
precipitado.
5. Indicar cuál es la reacción de hidróxido de sodio
en la reacción xantoproteíca.
Al modificar el ph y agregar NaOH se pierden hidrógenos
ácidos en este caso sería el que está en el ácido
carboxílico, por ende, aumenta la deslocalización, si se
aumenta la concentración perdería un hidrogeno el
grupo hidroxi y por último el que está unido al carbono
alfa. Todo esto será evidenciado con el cambio de color
de la solución
6. Indicar que tipo de aminoácidos debe contener una
proteína, para dar positiva la reacción con acetato de
plomo.
Debe contener Metionina, Cisteína y Cistina
7. Resumir las conclusiones obtenidas en la reacción
con acetato de plomo.
La reacción de precipitación de proteínas con
desnaturalización se utilizan sales de metales pesados
como lo es el acetato de plomo a una temperatura alta.
Debido a que la reacción con acetato de plomo se
realiza en un medio alcalino, ya que fue agregado
Hidróxido de sodio, se forman precipitados de sulfuro de
plomo de color gris oscuro o negro que se forman
cuando reacciona con Acetato de plomo en medio
alcalino. Sin embargo, los colores observados en la
práctica fueron diferentes debido a la contaminación de
reactivos utilizados. Debido a que la albumina presenta
una desnaturalización quedando su cadena polipeptídica
reducida a un polímero estadístico sin ninguna estructura
tridimensional fija, la prueba con acetato de plomo será
fija.
9. Indicar la fórmula de los aminoácidos que
identifico por cromatografía.

10.Explicar el fundamento de la cromatografía en
capa fina y mencionar cual es la fase móvil y cuál la
estacionaria en el sistema utilizado en esta práctica.
Consiste en la separación e identificación de
aminoácidos con base en su polaridad.
Se agregan unas gotas de disolución de mezcla de
aminoácidos en la orilla de papel filtro el cual sumerge
en disolvente. El disolvente asciende por el papel y
arrastra con él a los aminoácidos. Los aminoácidos
tienen diferentes afinidades hacia la fase móvil
(disolvente) y estacionaria (papel) y en consecuencia
ascienden por el papel con distinta rapidez
11. Indicar que tipo de proteínas pertenecen a las
empleadas en esta práctica.
BIBLIOGRAFIA:
❖ Berg M., Stryler L., Tymoczko L.2007.Bioquimica. Editorial
reverte, 1026 P.
❖ Peña Díaz A., Pena a.1988. Bioquímica. Editorial Limusa. 427 P.
Proteínas fibrosas o estructurales, se caracterizan por
ser insolubles en agua, de gran resistencia y en forma de
fibras.
Proteínas globulares, se caracterizan por ser proteínas
pequeñas que se asocian formando unidades compactas
y son solubles en agua.
12.Investigar algunos de los aminoácidos que se
encuentran presentes en albumina y grenetina.
En la albumina se encuentran los aminoácidos: ácido
aspártico, ácido glutámino, leusina, lisina, alanina,
metionina, arginina, prolina, cistina, serina, fenilalanina,
tirosina, glicina, treonina, histidina, triptófano,
hidroxiprolina, isoleucina.
La grenetina está compuesta aproximadamente de 90%
de proteínas, contiene todos los aminoácidos esenciales
excepto el triptófano. Los aminoácidos esenciales
presentes en la grenetina son: lisina y arginina. Los
aminoácidos no esenciales son: Ácido glutámico, glicina
y prolina
13.Investigar de que proteína se obtiene la grenetina.
La grenetina es Una proteína que se extrae del
colágeno, el cual, es una proteína que nuestro cuerpo
produce y da estructura, firmeza y elasticidad a la piel.