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PRUEBA DE COMPATIBILIDAD SANGUÍNEA (PRUEBAS CRUZADAS)

INTRODUCCIÓN

En medicina veterinaria son muchas las ocasiones en las que resulta necesario
realizar una transfusión de sangre. Sus importantes beneficios terapéuticos han
generado un considerable incremento en la demanda de transfusiones de sangre
y sus derivados, pero hay que saber administrarlas correctamente ya que no
están exentas de riesgos.
Tradicionalmente, la sangre completa (SC) era el único producto utilizado para
transfusiones en perros y gatos. En la actualidad la SC se puede separar en
diferentes componentes, lo que hace posible transfundir a cada paciente el
producto más indicado en función de su patología específica. Debe
seleccionarse siempre el que aporte los máximos beneficios y mínimos riesgos
para el paciente.
La medicina de transfusión es usada frecuentemente en cuidados críticos y
emergencias. Las anemias causadas por infecciones, por sangrados agudos o
debido a anemias crónicas llevan a nuestros pacientes a requerir de esta terapia
de rescate. Las transfusiones de sangre entera, plasma congelado o glóbulos
rojos pueden tener efectos adversos (agudos o tardíos) que debemos prevenir
para hacer de la medicina de transfusión una herramienta segura y confiable.
Dentro de los exámenes que se pueden hacer se encuentran la tipificación
sanguínea y las pruebas de compatibilidad. Muchas veces no realizamos estas
pruebas por motivos económicos, porque no estamos familiarizados con el tema
o simplemente porque experiencias anteriores nos hacen concluir erróneamente
que no hay reacciones adversas en una primera transfusión o en múltiples
transfusiones en un mismo paciente. Pues bien, debemos estar seguros que
estamos realizando los controles adecuados para saber si desarrolló o no una
reacción tardía. Si en algún momento una anemia no resolvió con la transfusión
o empeoró después de esta, puede significar que el paciente con el paso de los
días esta hemolizando estos glóbulos rojos transfundidos. El glóbulo rojo
expresa en su superficie diferentes antígenos que van a definir el tipo sanguíneo;
pueden coexistir dos o más antígenos, o ser negativos a ellos. Los perros tienen
al menos 12 tipos sanguíneos, de los cuales se ha encontrado unos más
antigénicos que otros y que pueden generar reacciones agudas (DEA 1.1), y
muchos otros que pueden generar reacciones tardías (DEA 3, 5, 7).
OBJETIVO

En esta práctica, la idea es saber identificar en qué casos usar los hemo-
derivados, qué se puede hacer en un caso de reacción adversa a estos, como
también saber si el donador no va a causar daño al donante, sea tanto paquete
globular como plaquetas.
MARCO TEÓRICO

 Sangre: es un tejido compuesto por diversas células (45%) suspendidas


en un medio líquido llamado plasma (55%).
o Células
 Eritrocitos: tienen como función el transporte de oxígeno,
el cual es mediado por la hemoglobina (Hb). También
mantienen estable el pH sanguíneo, debido a que la
hemoglobina actúa como buffer.
 Leucocitos: células que actúan como parte del sistema
inmune, está compuesto por los granulocitos y
agranulocitos.
 Granulocitos: neutrófilos, eosinófilos y basófilos.
 Agranulocitos: linfocitos y monocitos.
 Plaquetas
o Plasma: compuesto por proteínas plasmáticas (albúmina,
globulinas y fibrinógeno), sales inorgánicas y compuestos
orgánicos

 Donante: individuo que aportará unidades de sangre. Para el caso de


perros el donante debe ser un individuo clínicamente sano, al día con sus
vacunas, de edad entre 1 a 8 años y un peso entre 25 y 35 kg; no debe
haber recibido nunca alguna transfusión sanguínea y debe tener el
hematocrito mayor a 40%. En gatos los donantes de sangre deben ser
adultos sanos, entre 1 a 8 años de edad, con un peso mayor de 4 kg, pero
no obesos (condición corporal 3), y de preferencia ser de pelo corto.
Además el hematocrito debe ser superior al 35%; debe contar con todas
sus vacunas y estar libre de infecciones de FeLV, FIV, Toxoplasma gondii,
y Hemobartonella felis (ahora llamado Mycoplasma hemofelis), que no
haya recibido una transfusión sanguínea antes. En perros se puede
extraer hasta 20ml/kg de PV, y en gatos hasta 10ml/kg de PV.

 Receptor: individuo que va a recibir la transfusión sanguínea, debido a


un bajo hematocrito, plaquetopenia, etc., por múltiples causas.

 Tipos de sangre
o Perros: los perros cuentan con ocho grupos sanguíneos,
identificados con las siglas DEA (Dog Erythocit Antigen), seguidos
de los números, 1 al 8, manifestando el DEA 1 dos alelos distintos
(DEA-1.1 y DEA-1.2), los cuales no se encuentran en el mismo
individuo. DEA-4 y DEA-6 son los grupos sanguíneos más
comunes. Se consideran como donantes universales aquellos
perros que son negativos a DEA-1.1 y DEA-1.2, ya que estos
grupos sanguíneos generan respuestas de incompatibilidad en los
receptores. Aparte, existen anticuerpos congénitos que en su
mayoría son antiDEA-7, por lo cual tampoco sería conveniente
tomarlos como donadores universales. Cabe señalar que frente a
una primera transfusión sanguínea, el receptor en la mayoría de
casos no presentará problemas, ya que no existen aloanticuerpos
naturales que generen una respuesta de incompatibilidad
inmediata, sin embargo, frente a seguidas transfusiones, es
necesario hacer las pruebas de compatibilidad.
o Gatos: existen tres grupos sanguíneos principales, A, B y AB,
siendo el grupo A el más frecuente y el AB el menos frecuente. En
gatos sí es necesario hacer la prueba de compatibilidad cruzada
antes de cualquier transfusión sanguínea (inclusive si el animal
nunca ha sido sometido a una antes), debido a que en gatos
existen aloanticuerpos naturales contra los otros grupos
sanguíneos. Serían considerados como donantes universales el
tipo AB, ya que no posee aloanticuerpos anti-A ni anti-B.

 Prueba de compatibilidad cruzada: también llamada cross-match, es


una prueba que determina la antigenicidad eritrocitaria entre el donante y
el receptor, permitiendo determinar su compatibilidad para una transfusión
sanguínea, sin importar el tipo sanguíneo de ambos individuos (donante
y receptor). En esta prueba se observa si hay reacciones antígeno-
anticuerpo reflejadas en aglutinación o hemólisis, la cual no debe darse
para poder realizar una transfusión sanguínea. Si se da la reacción
antígeno-anticuerpo, el donante y receptor no son compatibles.
o Reacción mayor: se enfrentan la sangre (eritrocitos) del donante
con el suero del receptor.
o Reacción menor: se enfrentan el suero del donante con la sangre
(eritrocitos) del receptor.

 Paquete globular:

 Tipos de transfusión sanguínea


o Sangre completa: en casos donde el hematocrito del paciente
está en hasta en 12 a 15% en caso de perros o 10 a 12% en gatos,
para anemias crónicas. En el caso de anemias agudas, se hará
cuando el hematocrito haya descendido hasta un 25 a 30% en
perros y 20 a 25% en gatos. La sangre completa puede ser fresca,
la cual tiene una viabilidad máxima de 8 horas, o sangre completa
almacenada, que es viable hasta por 28 días, conservado a una
temperatura de 4°C.
o Concentrado de glóbulos rojos: contiene solo glóbulos rojos
(eritrocitos) y se realiza en pacientes anémicos con sobrecarga de
volumen. Se debe centrifugar la sangre, para retirar el plasma. Se
administra a velocidad más lenta que la sangre completa.
o Plasma: indicado para pacientes con deficiencias en los factores
de coagulación (congénitas o adquiridas), coagulación
intravascular diseminada (CID) e hipoproteinemias (proteínas
totales menor a 5 g/dl, albúmina menor a 1.5 g/dl). Se puede
administrar plasma fresco, plasma fresco congelado o plasma
almacenado.
o Concentrado de plaquetas: en casos donde la trombocitopenia
esté causando hemorragias significativas, un paciente
trombocitopénico vaya a pasar por una cirugía o el recuento de
plaquetas sea menor a 10 000 a 20 000/µl (AVERIGUAR EL DATO
DE QUÉ ANIMAL ES)
o Crioprecipitado: concentrado de proteínas plasmáticas de alto
peso molecular. Utilizado en casos como hemofilia A y enfermedad
de von Willebrand. Se obtiene con la precipitación en frío a partir
de la descongelación lenta (4 a 6°C) de unidades de plasma fresco
congelado y su centrifugado.

 Casos en los cuales se debe realizar una transfusión sanguínea


o Anemias
 Hipovolemicas: hemorragias
 Normovolémicas: anemias hemolíticas, hipoproliferativas
o Alteración de los factores de la coagulación: que desencadenan
Coagulación Intravascular Diseminada (CID), Enfermedad de von
Willebrand, Hemofilia A, entre otras.
o Hipoproteinemias
o Trombocitopenia

 Factores de coagulación: proteínas de la sangre, las cuales actúan


frente a un sangrado, limitando el flujo sanguíneo. Forman los coágulos
sanguíneos. La deficiencia de todos los factores de coagulación causará
la Coagulopatía Intravascular Diseminada (CID), la deficiencia del factor
VIII causa Hemofilia A, deficiencia en el factor IX causa Hemofilia B,
deficiencia en el Factor de von Willebrand causa la Enfermedad de Von
Willerbrand (hemofilia vascular). En el caso de intoxicaciones por
raticidas, existe alteración en los factores dependientes de vitamina K.

 Criterios a tomar en cuenta para la velocidad de infusión de sangre:


o El estado de salud del animal
o Especie
o Edad
o Cantidad de pérdida de sangre
o Daños que presenta el animal, si hay daño a nivel cardiaco o
enfermedades renales, se prefiere una velocidad baja de transfusión
para evitar una sobrecarga del volumen sanguíneo.
I. COMPETENCIA
Identifica las reacciones post-transfusionales de sangre y hemoderivados
realizando acciones para evitar complicaciones en el paciente. Realiza la técnica
de Pruebas de compatibilidad o pruebas cruzadas.
II. MATERIALES Y EQUIPOS
Muestra: Sangre con anticoagulante (donante) y suero (receptor)
Materiales:
 Suero fisiológico al 0.9%
 Tubos de prueba
 Pipetas Pasteur
Equipos:
 Microscopio
 Centrífuga
 Baño María
III. PROCEDIMIENTO
 Lavar los glóbulos rojos del donante 3 veces con suero fisiológico al 0.9%
centrifugando a 1,000 r.p.m. x 1 minuto.
 Agregar 1 ml de suero fisiológico al 5%, homogenizar y decantar.
 Enfrentar con una gota del suero del receptor y centrifugar a 1,000 r.p.m.
x 1 minuto..

CALCULO (RESULTADO)

-Se presenta un botón rojo en la parte superior de la muestra centrifugada. Al


mover el tubo observaremos si la muestra se homogeniza (compatible) o no
(incompatible).

-Observar al microscopio con objetivo de 40X si existe hemólisis o aglutinación


de eritrocitos.

IV. RESULTADOS Y DISCUSIÓN


Las discusiones se harán en base a los resultados obtenidos por los alumnos,
comparándolas con las reportadas en la bibliografía.

V. CUESTIONARIO.
1. ¿Cómo se realiza la prueba mayor?
2. ¿Cómo se sabe si hay incompatibilidad sanguínea?

VI. REFERENCIAS BIBLIOGRÁFICAS (*Fuentes de información al final de


la Guía de Práctica).