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Escuelas profesionales

UNIVERSIDAD Enfermería, Obstetricia


PRIVADA ARZOBISPO Terapia física
LOAYZA
LABORATORIO DE
QUÍMICA, BIOQUÍMICA Y Código : F02-FCS
Versión : v.01
FACULTAD
CIENCIAS DE LA SALUD FARMACOLOGÍA Fecha : 14-08-2017

GUÍA DE PRÁCTICAS DE
LABORATORIO DE BIOQUÍMICA

SEMESTRE ACADÉMICO 2017-II

Nombre: ……………………………………………Programa de: ………………………

2017
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ÍNDICE

Normas Generales de Bioseguridad en Laboratorio

Introducción

Práctica No 1.Bioseguridad y Reconocimiento de Materiales y Equipos de Laboratorio

Práctica No 2.Determinación pH y Preparación de Soluciones Amortiguadoras

Práctica No 3. Reconocimiento de Carbohidratos

Práctica No 4. Reconocimiento de Proteínas

Práctica No 5. Determinación de colesterol en Sangre

Práctica No 6. Digestión Enzimática del Almidón

Anexos

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REGLAMENTO GENERAL DE BIOSEGURIDAD EN LABORATORIO

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PROGRAMACIÓN DE PRÁCTICAS SEGÚN SILABO 2017- II

CONTENIDOS EVALUACIÓN DEL APRENDIZAJE ÁREA DE PRÁCTICA


Semana Fechas TEMÁTICOS A ESTRATEGIAS
DESARROLLLAR METODOLÓGICAS AULA
INDICADORES INSTRUMENTOS LABORATORIO
SEMINARIO
Introducción.
Experiencias
1 Formación de X
vivenciales
grupos de trabajo.
Bioseguridad y
Responsabilidad
Reconocimiento de Prácticas
Trabajo en equipo Rúbrica
2 materiales y dirigidas X
Aprendizaje Lista de cotejos
Equipos de
independiente
Laboratorio
Responsabilidad
Importancia del Prácticas
Trabajo en equipo Rúbrica
3 agua en nuestro dirigidas X
Aprendizaje Lista de cotejos
organismo
independiente
Responsabilidad
Identificación de Prácticas
Trabajo en equipo Rúbrica
4 Elementos dirigidas X
Aprendizaje Lista de cotejos
Biogenésicos
independiente
Responsabilidad
Prácticas
Trabajo en equipo Rúbrica
5 Ciclo de Krebs dirigidas X
Aprendizaje Lista de cotejos
independiente
Responsabilidad
Determinación del Prácticas
Trabajo en equipo Rúbrica
6 pH y Acción de los dirigidas X
Aprendizaje Lista de cotejos
Amortiguadores
independiente
Patologias
Responsabilidad
relacionadas con Prácticas
Trabajo en equipo Rúbrica
7 los trastornos del dirigidas
Aprendizaje Lista de cotejos
metabolismo de
independiente
carbohidratos
8 Primera evaluación de prácticas
Responsabilidad
Prácticas
Identificación de Trabajo en equipo Rúbrica
9 dirigidas X X
Carbohidratos Aprendizaje Lista de cotejos
independiente
Patologías
Responsabilidad
relacionadas con Prácticas
Trabajo en equipo Rúbrica
10 los trastornos del dirigidas X
Aprendizaje Lista de cotejos
metabolismo de
independiente
lípidos
Responsabilidad
Prácticas
Identificación de Trabajo en equipo Rúbrica
11 dirigidas X
Lípidos Aprendizaje Lista de cotejos
independiente
Reconocimiento de Responsabilidad
Prácticas
las propiedades de Trabajo en equipo Rúbrica
12 dirigidas X
las proteinas y Aprendizaje Lista de cotejos
enzimas independiente
Segunda evaluación de prácticas
13 X

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INTRODUCCIÓN

La siguiente guía de práctica de laboratorio en bioquímica se imparte a los estudiantes


con el objetivo de conocer los procedimientos experimentales más ampliamente usados
en bioquímica. Incluye análisis de macromoléculas como carbohidratos, lípidos, proteínas
y enzimás.

En esta guía de laboratorio, se pretende que los estudiantes tomen contacto con el
laboratorio de bioquímica y para cada procedimiento se aplique el reglamento y las
normas generales de bioseguridad. Se le describirá el material de laboratorio y se hará
especial hincapié en la importancia del correcto uso de las unidades de masa, volumen y
concentración, así como del cuidado, correcta utilización y limpieza del material utilizado

El estudiante también se familiarizara con algunos de los reactivos y equipos más


frecuentemente usados en las prácticas de bioquímica.

Antes de cada práctica de laboratorio, el estudiante debera venir leyendo la guía de


prácticas, esta lectura proveerá información y entendimiento sobre los procedimientos a
ser desarrollados.

Finalmente cada práctica contiene cuestionarios que deben desarrollar y responder las
preguntas, que deben ser entregadas al inicio de cada práctica, con la apropiada citación
de las fuentes de información que usted debe siempre referenciar apropiadamente los
autores de artículos y libros que usted consulta.

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PRÁCTICA 1
Laboratorio de: Bioquímica Fecha :
Unidad temática:
Actividad: BIOSEGURIDAD Y RECONOCIMIENTO DE Tiempo: 4 horas
MATERIALES Y EQUIPOS
Indicador de logros y evaluación de resultados:
Correcto uso de los materiales de laboratorio teniendo en cuenta en teniendo en cuenta las normas
de Bioseguridad
Elaboración de informe final de la práctica.

1. INTRODUCCIÓN:
El Laboratorio de Química es un lugar donde se desarrollan las prácticas elegidas por el docente
para confirmar y reafirmar los conocimientos teóricos impartidos en el aula.
Por lo tanto el estudiante deberá acatar el reglamento del Laboratorio y estar atento a las
explicaciones del docente.
Cada una de las reacciones efectuadas debe dominarse no sólo en la parte práctica, sino en el
conocimiento de sus productos finales, ya que con esto se pueden tomar decisiones para
conservar la limpieza del aire, el agua y el suelo, tratando de utilizar hasta donde sea posible,
procesos tecnológicos no contaminantes y en caso contrario dominar las técnicas adecuadas
para el manejo de residuos tóxicos peligrosos.

2. COMPETENCIA/CAPACIDAD
 Genera y registra datos e información a partir de la experiencia de cada instrumento
utilizado en las prácticas de Laboratorio.
 Trabaja con cautela y normar el comportamiento en el Laboratorio por las exigencias de la
Seguridad personal y del grupo

NORMAS Y REGLAS DE SEGURIDAD E HIGIENE EN EL LABORATORIO

Para reducir riesgos a la salud o a la integridad corporal, deben acatarse reglas de seguridad, por
lo general sencillas, cuando se realiza trabajo práctico de laboratorio. A menudo se dice que los
accidentes no ocurren por sí solos, ¡son provocados!. Las causas son generalmente por
ignorancia, por cansancio, por descuido, por uso de equipo y materiales defectuosos o
deteriorados, más aún por voluntad propia de tomar riesgos o por realizar bromas sin evaluar las
consecuencias de las mismas.

Para minimizar riesgos y prevenir accidentes es preciso conocer sus causas y estar alerta de
reconocer situaciones de riesgo susceptibles de desencadenar accidentes que no solo pueden
afectar al alumno, sino a todos los que trabajan en el laboratorio.

Un laboratorio es un lugar convenientemente habilitado donde se puede habilitar, manejar y


examinar microorganismos y experimentar. Este tipo de trabajo debe ser llevado a cabo con una
buena técnica aséptica y por tanto se requiere un ambiente limpio y ordenado.

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EXPERIENCIA:

NORMAS DE BIOSEGURIDAD PRINCIPIOS GENERALES DE SEGURIDAD:


El laboratorio es un área de trabajo. No se desempeñan otras actividades que no e s t é n
relacionadas con éste. Así mismo, no deben efectuarse experimentos no autorizados, a menos
que estén autorizados por el profesor.
Debe tenerse conocimiento de la ubicación de las llaves maestras de gas, electricidad y agua
del laboratorio. También de los extinguidores y demás equipos de seguridad así como de su
correcta utilización.
Mantener siempre el área de trabajo limpia y ordenada, ubicar los frascos y recipientes alejados
de los bordes de la mesa de trabajo. Evitar los movimientos bruscos durante el manejo de los
materiales y equipos. Mantener los pasillos entre las mesas despejados y trasladarse de un
punto a otro sin correr.
Cualquier incidente o accidente, por menor que parezca debe informarse inmediatamente al
profesor encargado del grupo. Es responsabilidad del profesor controlar la observancia de las
reglas de seguridad.
Antes de retirarse del laboratorio, debe dejarse el área de trabajo limpia y lavarse las manos
con jabón y agua.

LAS CAUSAS MÁS COMUNES DE ACCIDENTES SON:

Desconocimiento de las formas de manejar las sustancias químicas (reactivos), los materiales y
el equipo con el que se trabaja.
Imprudencia en los manejos de equipo, reactivos y materiales.
Descuido o falta de precaución al efectuar las prácticas.

EQUIPO DE PROTECCIÓN OBLIGATORIO

Portar bata de algodón (blanca) de talla apropiada con mangas largas y abotonadas durante
todo el tiempo que se trabaje en el laboratorio.
Portar lentes de seguridad para proporcionar protección en los ojos.
Mascarilla y guantes para evitar contaminarse con sustancias tóxicas.
Zapato de piso normal o tenis

MATERIAL DE VIDRIO

No debe recibirse material de trabajo defectuoso o deteriorado.


El material de vidrio en general y sobre todo el sometido a frecuentes calentamientos como
vasos de precipitado y matraces Erlenmeyer, pueden romperse con facilidad cuando se
someten a presión.
El material de vidrio rayado o que presente despostilladuras debe descartarse antes de que se
quiebre.

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Los pedazos de vidrio roto, particularmente los de pequeño tamaño nunca deben recogerse con
la mano. Debe usarse cepillo o recogedor y una aspiradora.

NORMAS GENERALES EN EL MANEJO DE REACTIVOS QUÍMICOS

Conocer las propiedades físicas, químicas y toxicológicas de los reactivos químicos con los que
se va a trabajar.
Nunca deben tomarse alimentos ni tampoco se debe fumar en el laboratorio esto reduce el
riesgo de ingestión o inhalación accidental de las sustancias químicas.
No deben probarse sustancias químicas o disoluciones ni tampoco inhalar vapores sobre todo
si no se tiene información sobre las sustancias.
Es necesario limpiar inmediatamente cualquier sustancia tirada o líquido derramado. Los
ácidos y bases derramados deben neutralizarse con bicarbonato de sodio antes de limpiar el
área afectada. Para efectuar la limpieza deben usarse guantes de plástico.
La transferencia de líquidos que emiten vapores tóxicos o corrosivos como el HCl y HNO3 o
NH4OH debe efectuarse bajo la campana.
Las reacciones químicas que desprenden vapores o que involucran disolventes volátiles,
inflamables o tóxicos también deben realizarse bajo la campana.
La transferencia de volúmenes precisos de soluciones debe efectuarse con pipetas
volumétricas previstas de una perilla de succión o de una propipeta. Nunca debe pipetearse por
aspiración directa con la boca.
Las diluciones de ácidos concentrados siempre deben efectuarse añadiendo el ácido
concentrado al agua y nunca a la inversa.
Las soluciones que se preparan, siempre deben etiquetarse correctamente en el momento de
su preparación.
Antes de utilizar solventes inflamables (alcohol, éter, acetona, etc.) es preciso verificar que no
se encuentren mecheros encendidos en la cercanía.
En caso de que alguna sustancia química entre en contacto con la piel (manos, cara y sobre
todo con los ojos), debe lavarse la zona afectada con abundante agua durante 15 minutos por
lo menos.

RECOMENDACIONES ESPECÍFICAS PARA EL MANEJO DE ALGUNOS REACTIVOS


QUÍMICOS

ÁCIDOS PELIGROS Y CUIDADOS

Ácido fluorhídrico HF Causa quemaduras de acción retardada en la piel, en


contacto con las uñas causa fuertes dolores y solo si se
atiende a tiempo se puede evitar la destrucción de
tejidos.
Las soluciones concentradas de estos ácidos lesionan
Ác. Sulfúrico H2SO4, ác. rápidamente la piel y los tejidos internos. Sus
Fosfórico H3PO4 y ác. quemaduras tardan en sanar y pueden dejar cicatrices.
Clorhídrico HCl. Los accidentes más frecuentes son salpicaduras y
quemaduras al pipetearlos directamente con la boca.
En estado anhidro es un explosivo poderoso. Dicho
estado se puede formar al poner en contacto el HClO4
Ác. perclórico HClO4 con agentes deshidratantes como el H2SO4, P2O5.
En contacto con materiales orgánicos (madera, algodón,
grasa, etc) puede hacerlos explotar por calentamiento o
por impacto.
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Daña permanentemente los ojos en unos cuantos


Ác. Nítrico HNO3 segundos y es sumamente corrosivo en contacto con la
piel, produciendo quemaduras dolorosas; mancha las
manos de amarillo por su acción sobre las proteínas.

HIDRÓXIDOS PELIGROS Y CUIDADOS

Los hidróxidos de Sodio y Potasio sólidos y las soluciones


NaOH, KOH, NH4OH concentradas de NH4OH pueden lesionar la piel y las
mucosas.

PERÓXIDOS PELIGROS Y CUIDADOS

Los peróxidos de Sodio y Bario pueden causar incendio o


explosión al humedecerse en contacto con papel y
materiales orgánicos. El peróxido de Hidrógeno se
descompone con violencia en agua y oxígeno. En
Na2O2, BaO2, H2O2 contacto con la piel puede causar ampollas.
El peróxido de Hidrógeno o agua oxigenada que se
emplea como antiséptico es una solución muy diluida que
no es peligrosa si se manipula en forma adecuada.

CLORATOS Y PELIGROS Y CUIDADOS


PERCLORATOS
Cuando se ponen en contacto o se mezclan con material
combustible pueden ocasionar incendio. Debe evitarse su
contacto con azufre, sulfuros, metales pulverizados, sales
de amonio y compuestos orgánicos.

SOLVENTES ORGÁNICOS PELIGROS Y CUIDADOS

El éter es oxidado por el O2 atmosférico. Si sus gases se


Éter concentran en el laboratorio forman peróxidos y éstos son
explosivos.

Es de los más peligrosos por su bajo punto de ebullición y


Éter etílico baja temperatura de ignición. Se deberá trabajar siempre
con pequeñas cantidades.

Todos los solventes orgánicos presentan un riesgo


Alcoholes, Acetona, potencial de INCENDIO O EXPLOSIÓN. Los vapores de
Benceno, Tolueno estos solventes forman mezclas explosivas con el aire. El
incendio provocado por solventes no se debe apagar con
agua ya que se expandería; se debe utilizar una manta,
arena o extinguidor.

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RECONOCIMIENTO DE ALGUNOS MATERIALES DE LABORATORIO

2.- COMPETENCIAS / CAPACIDADES


 Observa y grafica los materiales que el profesor te mostrará, y escucha atentamente su
explicación sobre el uso de cada uno de ellos.

3.- MATERIALESY EQUIPOS


PIPETA: …………………………………….
TUBO DE ENSAYO: …………………………………….
VASO DE PRECIPITADOS: …………………………………….
ESPÁTULA: …………………………………….
MATRAZ ERLENMEYER: …………………………………….
PROBETA: …………………………………….
CAJA DE PETRI.…………………………………….
PIPETA. …………………………………….

4.-PROCEDIMIENTO

 Discuta y analice en equipos las reglas y normas de seguridad e higiene en el


laboratorio asignadas por el profesor; por ejemplo: los principios generales de
seguridad, las causas más comunes de accidentes, los equipos de protección y manejo
de material de vidrio, y las Normas generales en el manejo de reactivos químicos
 Compare las recomendaciones específicas en el manejo de algunos reactivos
químicos.
 Grafique y exponga los equipos y la clasificación de los materiales de laboratorio
utilizados en la practica de bioquímica, que les asigno el profesor.

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CLASIFICACIÓN DE MATERIALES DE LABORATORIO

A.- MATERIALES DE VIDRIO

VASO DE TUBO DE ENSAYO: REFRIGERANTES:


PRECIPITACIÓN: SE USA PARA SIRVE PARA
SE USA COMO REALIZAR CONDENSAR VAPORES
RECIPIENTE PARA REACCIONES USANDO AGUA FRÍA.
OBTENER QUÍMICAS
PRECIPITADOS

LUNA DE RELOJ: AGITADOR O PIPETA: SIRVE PARA


SE USA PARA VARILLA: SIRVE PARA EXTRAER LÍQUIDOS DE
DESHIDRATAR MEZCLAR LIQUIDOS. SUS ENVASES EN
MEZCLAR SOLIDOS Y VOLÚMENES
COMO TAPA DE DETERMINADOS.
VASOS.

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BALÓN DE FONDO BALÓN DE FIOLA:


PLANO: SE USA PARA DESTILACIÓN: SIRVE SIRVE PARA PREPARAR
REACCIONES Y PARA PARA HERVIR SOLUCIONES
HERVIR. SUSTANCIAS VALORADAS.
SEPARABLES.

EMBUDO: PROBETA MATRAZ DE


SE USA PARA GRADUADA: ERLENMEYER: SIRVE
TRASVASAR LÍQUIDOS SE EMPLEA PARA PARA MEZCLAR, HACER
Y PARA FILTRACIONES. MEDIR EL VOLUMEN CULTIVOS DE
DE LOS LÍQUIDOS. MICROORGANISMOS Y
COMO RECIPIENTE PARA
REACCIONES.

GRADILLA: SE USA COMO SOPORTE DE LOS TUBOS DE ENSAYO

B.- MATERIALES DE METAL.

SOPORTE UNIVERSAL: REJILLA DE PINZAS:


SE USA COMO BASE PARA EL ASBESTO: SE SE USA PARA SUJETAR
MONTAJE DE DIVERSOS APARATOS USA PARA CRISOLES U OTROS
(DESTILACIÓN) PROTEGER DEL MATERIALES
FUEGO DIRECTO SOMETIDOS A CALOR.
EL MATERIAL DE
VIDRIO.
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MECHERO DE BUNSEN: BALANZA DE TRIPLE BARRA: SIRVE PARA


PROPORCIONA CALOR, PESAR SUSTANCIAS EN GRANOS.
FUNCIONA CON GAS PROPANO.

C.- MATERIALES DE PORCELANA

CAPSULA: SE USA PARA LA SEPARACIÓN MORTERO CON PILÓN: SIRVE PARA


DE MEZCLAS POR EVAPORACIÓN. MOLER SÓLIDOS.

D.- MATERIAL DE MADERA

5.- RESULTADOS:
……………………………………………………………………………………………………
……………………………………………………………………………………………………
……………………………………………………………………………………………………
……………………………………………………………………………………………………
……………………………………………………………………………………………………
……………………………………………………………………………………

6.- CONCLUSIONES
Llegue a conclusiones generales en base a lo expuesto por cada uno de los equipos.

……………………………………………………………………………………………………
……………………………………………………………………………………………………
……………………………………………………………………………………………………
……………………………………………………………………………………………………
………………………………………………………………………………………

7-CUESTIONARIO
 Explica las medidas de bioseguridad en el laboratorio.

 Explica las medidas de cuidado de los equipos de laboratorio


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 Grafica o dibuja cada uno de los procedimientos utilizados en la práctica de laboratorio.


 ¿Mencione cuales son las reglas de Seguridad dentro de un laboratorio?

 ¿Cómo recomendarías que estas reglas fueran reconocidas y recordadas por las personas que
realizan trabajos, incluyéndote a ti?

 ¿En caso de no contar en el laboratorio con alguna de las instalaciones de seguridad mencionadas
¿Qué precauciones adicionales debes tener en cuenta?

 ¿Cuál es tu opinión acerca del uso de ropa adecuada y protección a los ojos dentro del laboratorio?

8-REFERENCIA BIBLIOGRÁFICA

 Lehninger, A. (1989).Bioquímica: 2da Edición Omega Barcelona- Espafia


 Eric Conn, Paul Stumpf, George Bruening, Roy Doi . Bioquímica Fundamental. Editorial Limusa,
Cuarta Edición México 736 paginas

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RECONOCIMIENTO DE MATERIALES Y EQUIPOS DE LABORATORIO

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PRACTICA Nº 2
Laboratorio de: Bioquímica Fecha :
Unidad temática:
Tiempo: 4 horas
Practica:: DETERMINACIÓN DEL PH Y
PREPARACIÓN DE SOLUCIONES AMORTIGUADORAS
Indicador de logros y evaluación de resultados:
Correcta manipulación de instrumentos de laboratorio y de los procedimientos para el reconomiento
de biomoléculas orgánicas teniendo en cuenta las medidas de Bioseguridad.
Elaboración de informe final de la práctica.

1.-INTRODUCCIÓN
El pH: Los bioquímicos usan el pH para indicar de forma precisa la acidez o basicidad de una sustancia.
Normalmente oscila entre los valores de 0 (más ácido) y 14 (más básico).
INDICADOR DE pH: Los indicadores son colorantes orgánicos, que cambian de color según estén en
presencia de una sustancia ácida, o básica.

Figura 1. Escala de colores que toma el extracto de la col morada: en presencia de ácidos (1-6) y bases (8-14).

Los ácidos y bases son los dos tipos de sustancias más comunes en el laboratorio y en el mundo Cotidiano. A
finales del siglo XIX, Arrhenius formuló la primera definición:
ÁCIDO: Toda sustancia capaz de ceder protones (H+). BASE: Toda sustancia capaz de ceder oxhidrilos (OH-).
En 1923 Brönsted-Lowry, propusieron una definición más amplia:
ÁCIDO: Toda sustancia capaz de ceder protones (H+).BASE: Toda sustancia capaz de aceptar protones (H+).
Considerando que el agua, H2O es el solvente por excelencia y puede actuar como aceptor o dador de H+. La
reacción de autoionización correspondiente es: H2O + H2O H3O+ + OH –
Una manera de evaluar la acidez de una sustancia es por el conocimiento de la [H+], pero suelen ser cantidades
muy pequeñas y poco cómodas de manejar, una medida más práctica, es la basada en la definición de pH del
químico Danés Soren Sorensen en 1909, cuando realizaba un trabajo para el control de calidad de la elaboración
+
de la cerveza y es usada actualmente en todos los ámbitos de la Ciencia, medicina e ingeniería. pH = -log [H ]
Se establece una escala de acidez o escala de pH, en base al producto iónico del H2O a 25 °C, (Kw= 1x 10-14 ),
que varía en el intervalo 0 y 14. Soluciones ácidas tienen más H +, por ello pH< 7. Las soluciones básicas tienen
más OH-, el pH >7 y en las soluciones neutras [H+] = [OH-], pH = 7

Ecuación de Henderson-Hasselbach: La ecuación de Henderson-Hasselbach, ha sido derivada de la Ley de


acción de masas de Gulberg y Waage, del concepto de constante de equilibrio y de la ionización de ácidos y
bases débiles. Se utiliza para calcular el pH teórico de una mezcla de ácidos débiles y sus sales.
Para el siguiente sistema en equilibrio:

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2.- COMPETENCIAS / CAPACIDADES:


 Determina el pH y realiza las reacciones de soluciones amortiguadoras
 Explica y describe químicamente las reacciones

3.- MATERIALES Y EQUIPOS:


Materiales:

 Tubos de ensayo
 Gradilla de metal
 Pipeta serológica 2mL y 5mL
 Bagueta
 Espátula
 Beacker 250mL
 Balanza analítica
 Trípode
 Rejilla de asbesto
 Pinza de madera

Reactivos:

 Sol. de NaOH 0,01M


 Sol. de HCl 0,01M
 Sol. de CH3COOH 0,01M
 Sol. de NH4OH 0,1 M
 Sol. de NH4Cl 0,1 M

Muestras biológicas y químicas:

 Limón, Vinagre, Refresco-frutiño preparado, Leche, Crema dental, Jugo de naranja, jugo de toronja, leche
de magnesia, limpiador doméstico, clorox, champú, jabón líquido, agua oxigenada, alcohol, crema de
manos, perfume, gaseosa

4.-PROCEDIMIENTO
EXPERIMENTO 1: Determinación de pH de diferentes sustancias usando Papel indicador:

a-Tomar una muestra de cada sustancia (Limón, Vinagre, Refresco-frutiño preparado, Leche, Crema dental, Jugo
de naranja, jugo de toronja, Agua expuesta al aire con 3 días de anticipación, leche de magnesia, limpiador
doméstico, clorox, champú, jabón líquido, agua oxigenada, alcohol, crema de manos, perfume, desodorante, jabón
de loza, jabón de tocador), si es líquida con un gotero, si es sólida, humedecerla un poco con agua en un plato
desechable, usando la microespátula.

b-Tomar pedacitos de papel indicador (recortar con tijeras limpias y no tocar con los dedos ni los guantes sucios ni
húmedos) con las pinzas ó el depilador, y colocar sobre la muestra por uno de los extremos el papel y registrar la
coloración que arroja cada muestra, registrar datos en una tabla. Compararlos con las tablas de pH llevadas a
clase (laminadas)

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EXPERIMENTO 2.- DETERMINACIÓN DEL PH TEORICO Y PRACTICO EN LAS SIGUIENTES


SO LUCIO NES :

NaOH 0,01 M
HCl 0,01 M
CH3COOH 0,1 M
NH4OH 0,1 M
NH4Cl 0,1 M

Determinar el valor del pH teórico según la ecuación de Henderson-Hasselbach. Tomar 10 mL de cada


solución y determinar el valor del pH práctico utilizando el pH-metro.

EXPERIMENTO 3.- INFLUENCIA DEL pH EN LA SOLUBILIDAD DE SUSTANCIAS ORGÁNICAS –


SOLUBILIDAD DEL BENZOATO DE SODIO

En un vaso de precipitados de 100 mL de capacidad disolver 10 mg de benzoato de sodio con 10 mL de agua


destilada, inmediatamente medir su pH, luego adicionar 5 gotas de HCl concentrado agitar y observar. Medir
nuevamente el pH de la solución final.

EXPERIMENTO 4.- NATURALEZA AMORTIGUADORA de la ALBÚMINA

Preparar 4 tubos de prueba con los siguientes reactivos:

Tubo 1.- 1 gota de HCl 0,1 M + 1 gota de anaranjado de metilo + 2 mL de H 20


Tubo 2.- 1 gota de HCl 0,1 M + 1 gota de anaranjado de metilo + 2 mL de H 20
Tubo 3.- 1 gota de NaOH 0,1 M + 1 gota de fenolftaleína + 2 mL de H 20
Tubo 4.- 1 gota de NaOH 0,1 M + 1 gota de fenolftaleína + 2 mL de H 20

A los tubos 1 y 3 agregar 3 mL de solución de albúmina, agitar y observar.


A los tubos 2 y 4 agregar 3 mL de H2O, agitar y o b s e r v a r .
Explicar sus resultados.

5.- RESULTADOS:
Registrar los resultados en una tabla siguiente:

sustancia observaciones pH (papel Acido o Base Que crees que


indicador) sucede?
Limón

Vinagre

Refresco

Leche

Saliva

Crema Dental

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FARMACOLOGÍA Fecha : 14-08-2017
CIENCIAS DE LA SALUD

6.- CONCLUSIONES
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7.-CUESTIONARIO:
 Explique ¿por qué es importante conocer el pH de las sustancias que utilizamos en nuestro hogar?
 Consulte otros tipos de indicadores y su rango de coloración en medio ácido y básico y dibuje la
escala para cada uno.
 Realice las ecuaciones químicas para cada una de las experiencias realizadas.
 ¿Cuál es la importancia del sistema buffer en el organismo?

8.- REFERENCIA BIBLIOGRÁFICA


 Lehninger, A. (1989).Bioquímica: 2da Edición Omega Barcelona- Espafia
 Eric Conn, Paul Stumpf, George Bruening, Roy Doi . Bioquímica Fundamental. Editorial Limusa,
Cuarta Edición México 736 paginas

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PRACTICA Nº 3
Laboratorio de: Bioquímica Fecha :
Unidad temática:
Practica:: RECONOCIMIENTO DE CARBOHIDRATOS Tiempo: 4 horas
Indicador de logros y evaluación de resultados:
Correcto uso de instrumentos y materiales de laboratorio para el reconocimiento de carbohidratos
teniendo en cuenta las medidas de Bioseguridad.
Elaboración de informe final de la práctica.

1.- INTRODUCCIÓN
Los carbohidratos, glúcidos o azúcares constituyen una de las más importantes clases de moléculas
constituyentes de los organismos. Los carbohidratos son los compuestos orgánicos más abundantes de la biosfera
y a su vez los más diversos. Normalmente se los encuentra en las partes estructurales de los vegetales y también
en los tejidos animales, como glucosa o glucógeno. Estos sirven como fuente de energía para todas las
actividades celulares vitales. Son complejos terciarios en los cuales el hidrógeno y el oxígeno están en igual
proporción que el agua. Los más comunes son los sacáridos, los cuales se dividen también en monosacáridos o
azúcares simples, disacáridos y polisacáridos. Los carbohidratos son derivados aldehídicos o cetónicos de
alcoholes polioxidrilados y por lo tanto tienen las propiedades características de esos grupos como son la
formación de oxina e hidrazonas. Existen diferentes tipos de reacciones químicas que sirven para determinar
cualitativamente la presencia de carbohidratos (monosacáridos, disacáridos y polisacáridos)
La glucosa se usa mucho como alimento y como agente edulcorante, industrialmente se fabrica en grandes
cantidades por hidrólisis de almidón. La fórmula estructural de la sacarosa no tiene grupos hidroxilos glucósidos
libres, ni contiene grupo aldehídico libre ni potencial, ya que las dos unidades de monosacáridos están unidos por
los hidroxilos glucósidicos, ello trae como consecuencia que la sacarosa no presente mutarrotación, no sea
reductora y no forme osazona.

2.- COMPETENCIAS / CAPACIDADES


 Realiza las reacciones de caracterización de azucares
 Explica y describe químicamente las reacciones

3.- MATERIALES Y EQUIPOS


MATERIALES
Tubos de ensayo (18) • Gradilla • Pinza para tubo de ensayo • Pipetas (3 de 1mL, 2 de 5mL)
• Vaso de precipitado (2 de 50mL) • Vidrio de reloj • Trípode • Mechero Bunsen o de alcohol
• Espátula • Agitador de vidrio • Rejilla con asbesto • Agua destilada

REACTIVOS
Reactivo de Fehling A y B • Reactivo De Lugol • Reactivo de Seliwanoff • Reactivo de Molish • Reactivo de Bial • HCl
concentrado y diluído • Bicarbonato. • Sacarosa (azúcar común) • Fructosa (refresco) • Lactosa (leche) • Almidón
(harina). • Galactosa, xilosa, ribosa, maltosa.

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4.- PROCEDIMIENTO

4.1. Experiencia: REACCIÓN DE FEHLING


Tomar la muestra que se quiera analizar (aproximadamente 3 mL) • Añadir 1 mL de Fehling A y 1 mL de
Fehling B. El líquido del tubo de ensayo adquirirá un fuerte color azul. •Calentar el tubo al baño María o
directamente en un mechero de laboratorio. • La reacción será positiva si la muestra se vuelve de color rojo
ladrillo. • La reacción será negativa si la muestra queda azul, o cambia a un tono azul-verdoso.

3.4.2. Experiencia: REACCIÓN LUGOL


Este método se usa para identificar polisacáridos. El almidón en contacto con unas gotas del reactivo de
Lugol (disolución de yodo y yoduro potásico) toma un color azul-violeta característico. •Agregar en un tubo de
ensayo unos 3 mL del glúcido a investigar. •Añadir unas gotas de Lugol, si la disolución del tubo de ensayo se
torna de color azul-violeta, la reacción es positiva.

3.4.3. Experiencia: REACCIÓN MOLISH


• En un tubo de ensayo, colocar 2 mL de cada una de las muestras indicadas, adicionar 3 gotas de reactivo
de Molish y mezclar. Añadir en zona (dejar resbalar por las paredes del tubo, lentamente), 2 mL de ácido
sulfúrico concentrado. • La formación de un anillo de color púrpura en la interfase indicará que la reacción es
positiva.

3.4.4. Experiencia: REACCIÓN BIAL


• En tubos de pruebas, colocar 2 mL de cada una de las muestras indicadas, adicionar 4 mL de reactivos de
Bial, calentar en baño maría durante 10 a 15 minutos hasta ebullición. • La coloración verde indica la
presencia de pentosas.

3.4.5. Experiencia: REACCIÓN DE SELIWANOFF


• Colocar en tubos de pruebas 5 mL de reactivo de Seliwanoff y 3 mL de las muestras indicadas, llevar a
baño maría durante 4 a 5 minutos. La coloración salmón 8 rojo cereza evidencia la presencia de cetohexosas.

3.4.6. Experiencia: AZÚCARES NO REDUCTORES


Tomar una muestra de sacarosa y añadir unas 10 gotas de ácido clorhídrico al 10%.
• Calentar a la llama del mechero durante un par de minutos. Dejar enfriar y realizar la prueba de Fehling. •
Observa el resultado. La reacción positiva nos dice que hemos conseguido romper el enlace O-glucosídico de
la sacarosa. (Se recomienda antes de aplicar la reacción de Fehling, neutralizar con bicarbonato, Fehling sale
mejor en un medio que no sea ácido.)

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5.- RESULTADOS:
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6.- CONCLUSIONES
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7.-CUESTIONARIO
 ¿Por qué razón LOS CARBOHIDRATOS tienen diferentes resultados con los reactivos? Explique.
 ¿Los polisacáridos y monosacáridos utilizan un mismo reactivo? ¿Qué cambios se observa con cada
una de éstas moléculas? Explique.
 Explique las propiedades de cada uno de los reactivos utilizados en la práctica de laboratorio.
 Realice las ecuaciones químicas para cada una de las experiencias realizadas
 Indique otros métodos cualitativos para identificación de glucosa y sacarosa

8.-BIBLIOGRAFÍA
 Lock de Ugaz O. Investigación Fitoquímica: Métodos en el estudio de productos naturales
 Dominínguez, X. A. Métodos de Investigación Fitoquímica. Editorial Limusa, México D.F.1973
 Gibaja O. S. Guía para el análisis de los compuestos del carbono Lima – Perú 1977

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PRÁCTICA N° 4
Laboratorio de: Bioquímica Fecha :
Unidad temática:
Practica: RECONOCIMIENTO DE PROTEÍNAS Tiempo: 4 horas
Indicador de logros y evaluación de resultados:
Correcto uso del microscopio y materiales de laboratorio teniendo en cuenta las medidas de
Bioseguridad.
Elaboración de informe final de la práctica.

1.- INTRODUCCIÓN
Aminoácidos: En la estructura general de los aminoácidos se observa que tienen en común un átomo
de carbono central (alfa) al que están unidos covalentemente un ácido carboxílico, un grupo amino y un
átomo de hidrógeno. Además de ello, al átomo de carbono alfa se une una cadena lateral, designada R,
que es diferente para cada uno de los 20 aminoácidos comunes.

Las proteínas son compuestos biológicos conformados principalmente por la unión de alfa aminoácidos
unidos unos a otros en forma lineal mediante enlaces peptídico.
La conformación estructural de una proteína que se da en forma natural (proteína nativa) es una
característica extremadamente importante de las proteínas. A través de estudios con rayos X de ciertas
proteínas nativas y polipéptidos sintéticos, Pauling y Corey propusieron que toda o ciertas partes de
algunas proteínas contenían aminoácidos dispuestos en forma helicoidal específicamente como una alfa
hélice. En otras proteínas, tales como las del músculo o el pelo, se observan otras estructuras.
La desnaturalización de las proteínas puede ser definido como algún cambio en la estructura de la
proteína nativa que no produce la ruptura de los enlaces peptídicos.
Los agentes desnaturalizantes, tales como el calor, ácidos, bases, agitación, rayos X, oxidación o
reducción y urea, actúan rompiendo los enlaces de hidrógeno, afectando los tales como el calor, ácidos,
bases, agitación, rayos X, oxidación o reducción y urea, actúan rompiendo los enlaces de hidrógeno,
afectando los puentes salinos, oxidando o reduciendo los enlaces disulfuro, etc. dando por resultado un
compuesto que posee una diferente conformación, así como diferentes propiedades que la proteína
nativa. La solubilidad de las proteínas depende no sólo de la variedad de los grupos individuales de los
aminoácidos y de la menera de plegarse la cadena peptidicasino también de las propiedadres del
sistema solvente en elcual se encuentra la proteína.
La solubilidad de las proteínas es muy variable. Muchas de ellas se hallan en soluciones coloidales en
agua, o en soluciones salinas; pero diferentes reactivos afectan su solubilidad. Las cadenas de
aminoácidos que conforman las moléculas proteicas contribuyen con grupos cargados positiva y
negativamente pueden reaccionar con otros iones de carga opuesta y con el agua. En consecuencia,
existen interacciones moleculares: proteína - proteína, proteína-pequeños iones y proteína-agua. Alguna

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condición por la cual se incremente la interacción proteína - proteína, o de crezca la interacción


proteína-agua, decrecerá su solubilidad y viceversa.
La fuerza iónica del medio, el pH, la temperatura y el efecto del solvente son los cuatro factores
principales que afectan la solubilidad de las proteínas, relacionados todos con las estructuras
secundaria y terciaria.

2.- COMPETENCIAS / CAPACIDADES


 Conoce los métodos de obtención de la albúmina
 Realiza las reacciones de caracterización de los aminoácidos y proteínas
 Explica y describe químicamente las reacciones.

3.- MATERIALES Y EQUIPOS


Materiales:
 Tubos de ensayo
 Gradilla de metal
 Pipeta 2mL y 5mL
 Becker 250mL y 500mL
 Espátula
 Bagueta

Reactivos:
 HCl Q.P
 Hidróxido de sodio 40%, 10%
 Sol. Sulfato de amonio 75%
 Acetona
 Sol. Albumina 1%
 Sol. De ferrocinaruro de potasio
 Fenilalanina Q.P
 Tiroxina Q.P
 Triptofano Q.P
 Ácido sulfúrico Q.P
 Rvo. De Biuret
 Rvo. De ninhidrina

4.-PROCEDIMIENTO
Preparar una solución de albúmina con la clara de un huevo diluido en agua

A. Determinación de las propiedades de las proteínas

Reacción de Desnaturalización: Disponer de 5 tubos de ensayo

Tubo N°1: 2mL de solución de albúmina y luego calentar.


Tubo N°2: 2mL de sol. de albúmina y X gotas de HCl concentrado

de precipitación mediante aniones:

Tubo N°1: 1mL de solución de albúmina.


Tubo N°2: 1mL de sol. de albúmina y II gotas de HCl 10%

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Tubo N°3: 2mL de sol. de albúmina y II gotas de NaOH 10%

B. Reacciones de coloración: Determinación de aminoácidos

Método de la ninhidrina: Grupo amino libre


En un tubo de ensayo añadir 1mL de la Solución de albúmina 1%, llevar a baño maría por 5 minutos.
Observar y anotar los resultados

Reacción con acetato de plomo alcalino: Aminoácidos azufrados

En un tubo de ensayo añadir 1mL de la Solución de cisteína, metionina y 1mL de acetato de plomo alcalino a
cada uno de los tubos de ensayo.
Observar y anotar los resultados.

C. Determinación de proteínas:

Reacción de Biuret:

En un tubo de ensayo añadir 1mL de solución de albúmina, adicionar 1 mL. de una


solución de NaOH 10% y luego añadir 1 gota de sulfato de cobre 1%.

5.- RESULTADOS

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6.- CONCLUSIONES
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7.-CUESTIONARIO
 Realice las ecuaciones químicas de cada una de las experiencias
 Indique otras técnicas por las cuales se pueda identificar aminoácidos o proteínas

8.- REFERENCIA BIBLIOGRÁFICA


 Lock de Ugaz O. Investigación Fitoquímica: Métodos en el estudio de productos Naturales
 Dominínguez, X. A. Métodos de Investigación Fitoquímica. Editorial Limusa, México D.F. 1973
 Gibaja O. S. Guía para el análisis de los compuestos del carbono Lima – Perú 1977

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PRÁCTICA Nº 05
Laboratorio de: Bioquímica Fecha :
Unidad temática:
Practica: DETERMINACION DE COLESTEROL EN SANGRE Tiempo: 4 horas

Indicador de logros y evaluación de resultados:


Correcta diferenciación de células procariotas y eucariotas teniendo en cuenta las medidas de
Bioseguridad.
Elaboración de informe final de la práctica.

1.- INTRODUCCIÓN
El colesterol es el esteroide más abundante en el organismo humano. Es un componente
habitual de la dieta (carne, leche, huevos), pero fundamentalmente el, organismo lo sintetiza en
el hígado. Es importante mencionar que una de sus principales funciones biológicas es la de
regular la fluidez de las membranas celulares y la de constituirse como uno de los precursores
de hormonas esteroideas, gestágenos y corticoides, andrógenos, estrógenos, vitaminas y otros
compuestos biológicos

Se desplaza por la sangre en partículas denominadas lipoproteínas, que contienen tanto lípidos
como proteínas. El organismo cuenta con tres tipos de lipoproteínas:

Lipoproteínas de baja densidad (LDL): Contienen cerca del 70 por ciento del colesterol del
suero y favorecen los trastornos cardiovasculares

Lipoproteínas de baja densidad (HDL): Acumulan el 20 por ciento del colesterol total y tienen
un efecto protector

Lipoproteínas de muy baja intensidad (VLDL): Contienen en torno al 10 por ciento del
colesterol total del suero y la mayor parte de los triglicéridos.La principal consecuencia del
exceso de colesterol en sangre es el desarrollo de enfermedades coronarias (EC). Que son
frecuentes en las poblaciones cuya alimentación es rica en grasas saturadas

La hipercolesterolemia está estrechamente ligada a la arterosclerosis, una alteración


degenerativa que ataca a las arterias en las que se forman placas de ateroma.
que obstruyen total o parcialmente los vasos de las arterias ocasionando una falta de riego. Si la
falta de riego se localiza en las arterias coronarias que irrigan el corazón se puede originar una
angina de pecho o un infarto de miocardio. Si se produce en las arterias cerebrales son
frecuentes las hemorragias y trombosis cerebrales. Cuando la obstrucción se localiza en las
extremidades puede favorecer la gangrena de un miembro y, en el peor de los casos, su
amputación.

2.- COMPETENCIA / CAPACIDADES:


 Determina colesterol en el suero sanguíneo. Concientiza el riesgo que genera concentraciones
elevadas de colesterol (ateroma) o bajas (afección hepática o tiroidea).

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3.- MATERIALES Y EUIPOS


Equipos y materiales.

 Espectrofotómetro.
 Centrifuga.
 Baño María regulado a 37ºC.
 Jeringas descartables x 5ml. con aguja hipodérmica estéril,
 Tubos vacutainers tapa roja, adaptador y aguja vacutainer
 Algodón, ligadura.
 Tubos de prueba de 13 x 100mm.
 Pipetas de 10 mL.
 Micropipetas de 0 a 50 uL.
 Punteras amarillas, gradillas y baguetas.

Reactivos.

 Set de reactivos para colesterol (enzimático).


 Muestra biológica.
 Alcohol medicinal.

4.- PROCEDIMIENTO:
 En una gradilla disponer tres tubos de prueba de 13 x 100 mm, rotularlos con P (problema), S
(Standard) y B (blanco) luego proceder como sigue.
 Reposo x 20 minutos.

REACTIVOS P S B

Suero del paciente 10 ul - -

Standard de colesterol 200mg/dl - 10ul -

Agua destilada - - 10 ul

Reactivo enzimático 1mL 1mL 1mL

 Leer a 650 nn, llevando el espectrofotómetro a cero en absorbancia con el blanco de reactivos.
 Para obtener la concentración de colesterol de la muestra problema, se aplica la siguiente
fórmula.

mg de colesterol/ dL = absorbancia del problema X 200


absorbancia del standard

5-RESULTADOS
Concentraciones de colesterol, en mg/dL, obtenidos por los alumnos en las muestras analizadas.

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6.- CONCLUSIONES
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7.- CUESTIONARIO
 Describa como se realiza la biosíntesis del colesterol.
 ¿Qué ocurre cuando el LDL-colesterol no es fagocitado?
 Mencione cuatro métodos para la determinación de colesterol en sangre, indicando ¿cuál? de
ellos es el más exacto y por qué. y ¿Porqué?
 Mencione lo requisitos indispensables que debe observar una persona, para que su
determinación de colesterol sea real.
 Explicite la biosíntesis de colesterol a partir de la ingesta de carbohidratos.

8.- REFERENCIA BIBLIOGRÁFICA

 Stryer l , Berg JM. Bioquímica. 5ta ed. Barcelona. Reverte. 2003.


 Devlin TM. Bioquímica. 4ª ed. Barcelona. Reverte. 2004.
 Lehninger. Principios de Bioquímica.4ª ed. Barcelona. Omega. 2006.
 Mathews CK, Van Holde KE Bioquímica. 3a ed. Madrid. Addison Wesley. 2002.

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PRÁCTICA Nº 06
Laboratorio de: Bioquímica Fecha :
Unidad temática:
Practica: RECONOCIMIENTO DE LAS PROPIEDADES Tiempo: 4 horas
DE LAS ENZIMAS
Indicador de logros y evaluación de resultados:
Correcto uso del microscopio y procedimientos de laboratorio teniendo en cuenta las medidas de
Bioseguridad.
Elaboración de informe final de la práctica.

1.-INTRODUCCIÓN
El almidón constituye un importante componente de la dieta de los seres humanos. El proceso de
digestión de este nutriente se inicia en la cavidad oral, lugar en que actúa la alfa-amilasa salivar, enzima
que tiene la propiedad de hidrolizar los enlaces alfa 1,4 del almidón y formar polisacáridos de menor
peso molecular.

2.- COMPETENCIAS / CAPACIDADES


 Determina la hidrólisis por la amilasa salivar.
 Concientiza la importancia de la hidrólisis.

3.- MATERIALES Y EQUIPOS


Equipos y materiales.
 Tubos de prueba de 13 x 100mm.
 Pipetas de 10 mL.
 Micro pipetas de 0 a 50 uL.
 Punteras amarillas, gradillas y baguetas.
 Baño maria
 reloj
 lugol
 Gradillas
 Muestra: saliva
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Reactivos.
 Tampon fodfsto 0.1 M pH 6.5
 Almidon 1%
 HCl 0.5N
 Agua destilada

4.- PROCEDIMIENTO.
HIDROLISIS DEL ALMIDÓN POR LA AMILASA SALIVAR

Para realizar el experimento se prepararán los siguientes medios de reacción:

1 2 3

mL. tampón fosfato 0.1 M pH 6.5 1 1.0 1.0


mL. de almidón al 1% 2
. 2.0 2.0
mL. ácido clorhídrico 0.5 N -.0 -- 1.
mL. de agua destilada 0
- - 5
- 1. ---
5
2 a 37° C durante
Colocar los tubos de ensayo en el baño maría 2 min, luego adicionar:
.
0

Colocar nuevamente los tubos en baño maría y sacar alícuotas de 0.5 mL. de cada uno de los tubos
a los 5, 10, 15 y 20 minutos, y adicionarlos a los tubos previamente preparados que contienen 2.0 mL
de ácido clorhídrico 0.05 N, de acuerdo al siguiente esquema:

Tubo N° 1 2 3

Luego adicionar a cada tubo:

Gotas de solución de Lugol 1 gota 1gota 1gota


Dejar en reposo durante 1 minuto y observar el color formado.
Durante el desarrollo del experimento se observarán modificaciones del color inicial de los
tubos como consecuencia de la acción de la alfa-amilasa salivar.
El experimento concluye cuando uno de los tubos muestre un color pardo claro.

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5.- RESULTADOS
Se determinó la acción enzimática sobre el almidón
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6.- CONCLUSIONES
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7.-CUESTIONARIO
 Describa como se realiza la hidrolisis del almidón mediante la enzima.
 ¿Qué ocurre cuando hay deficiencia de esta enzima?

8.-REFERENCIA BIBLIOGRÁFICA:
 Stryer l, Berg JM. Bioquímica. 5ta ed. Barcelona. Reverte. 2003.
 Devlin TM. Bioquímica. 4ª ed. Barcelona. Reverte. 2004.
 Lehninger. Principios de Bioquímica.4ª ed. Barcelona. Omega. 2006.
 Mathews CK, Van Holde KE Bioquímica. 3a ed. Madrid. Addison Wesley. 2002

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ANEXOS

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CIENCIAS DE LA SALUD

REACTIVOS UTILIZADOS EN LABORATORIOS DE INVESTIGACIÓN EN BIOQUÍMICA


La Bioquímica es la rama de la ciencia que estudia los procesos químicos que ocurren en los
organismos vivos. Su objetivo es estudiar la composición química de los seres vivos, es decir,
las biomoléculas, las interacciones que ocurren entre ellas, sus transformaciones y fisiología.
Es una ciencia empírica, por lo tanto, su desarrollo está unido a la observación y
experimentación. Son diversas las técnicas experimentales, instrumentos y reactivos utilizados
en bioquímica. Por ello, se erige como un pilar fundamental de la biotecnología y es esencial
para afrontar grandes problemas como el cambio climático o el agotamiento de las reservas de
combustibles fósiles, y enfermedades actuales y futuras.
Entre los reactivos de bioquímica que la empresa distribuidora de reactivos químicos para la
investigación, Wako Chemicals, lista en su catálogo, se encuentran:

3-(1-Anilinoethylidene)-5-benzylpyrrolidine-2,4-dione
Este reactivo es un agente de sincronización celular, empleado en cultivos sincronizado de
células. Actúa como inhibidor de la división celular y se utiliza para acumular células durante la
fase mitótica (fase M). Mediante su uso, la división celular se reanuda más suavemente en
comparación con los inhibidores convencionales derivados de alcaloides vegetales. El método
de cultivo sincronizado es esencial para aclarar el mecanismo de proliferación de las células
huésped; la cuantificación bioquímica de los cromosomas es más fácil y esto hace que sea
ampliamente utilizado en diferentes campos de investigación, entre ellos el cáncer. Para saber
más de este producto clic aquí.

Acromopeptidasa Lítica Purificada y Acromopeptidasa Lítica

Cruda
La Acromopeptidasa es una enzima lisil endopeptidasa de alto poder bacteriolítico. Su actividad
bacteriolítica es más potente y su espectro bacteriolítico más amplio que el de la lisozima de
albúmina. Esta enzima puede causar la lisis de grampositivos
como Staphylococcus, Streptococcus, Clostridium y Leuconostoc y, además, es activa contra
algunos microorganismos Gram negativos. Se usa en investigaciones referentes al aislamiento
y la caracterización molecular de bacterias causantes de infecciones en humanos.

Agosterol A
El Agosterol A es un compuesto esteroide aislado de la esponja marina Spongia sp. Actúa
inhibiendo específicamente dos tipos de transportadores ABC: la P-glicoproteína (P-
gp/MDR1/ABCB1) y la proteína de resistencia a múltiples fármacos 1 (MRP1/ABCC1). Estos
transportadores ABC juegan un papel importante en la extrusión de fármacos de la célula y su
sobreexpresión puede ser una causa del fallo de la quimioterapia anticancerígena y
antimicrobiana. Este reactivo es una sustancia prometedora que invierte completamente la
resistencia a múltiples fármacos del cáncer.

Ácido L- Ascórbico Fosfatado


Se ha demostrado que el fosfato de ácido L-ascórbico (Asc 2-P) promueve el crecimiento
celular y la síntesis de colágeno. Específicamente, Asc 2-P aumenta los niveles de estado
estacionario de mRNA para las cadenas de colágeno tipo I y eleva las tasas de transcripción de

BIOQUÍMICA DEPARTAMENTO ACADÉMICO DE CIENCIAS BÁSICAS


Escuelas profesionales
UNIVERSIDAD EnfermeríaObstetricia
PRIVADA ARZOBISPO LABORATORIO DE Terapia física
LOAYZA
QUÍMICA, BIOQUÍMICA Y Código : F02-FCS
FACULTAD Versión : v.01
FARMACOLOGÍA Fecha : 14-08-2017
CIENCIAS DE LA SALUD

los genes de colágeno tipo I. Además, es útil en sistemas de cultivo como un derivado de
vitamina C de acción prolongada y mayor estabilidad. Se reporta su uso en investigaciones
médicas y de la industria alimentaria, entre otras. Para saber más de este producto clic aquí.

Peptidoglicano de Micrococcus luteus


El peptidoglicano, peptidoglucano o mureína, es un copolímero muy resistente que protege a
las bacterias de una ruptura osmótica en ambientes acuáticos a la vez que les da forma. Es un
constituyente de la pared celular en la mayoría de los procariotas. Inicia una variedad de
actividades fisiológicas tales como pirogenicidad y reactividad con el fluido corporal del gusano
de seda (reactivo SLP). Se puede considerar como un reactivo estándar de gran utilidad para la
identificación de microorganismos, además de sus aplicaciones en las investigaciones
biotecnológicas y farmacéuticas.

Deshidrogenasa del Sorbitol


La Sorbitol deshidrogenasa o SDH, es una enzima citosólica, que actúa en el metabolismo de
los carbohidratos convirtiendo, junto a la enzima aldosa reductasa (AR), a la glucosa en
fructuosa sin el consumo de ATP. En los tejidos donde la SDH es baja o ausente, como en la
retina, la lente, el riñón y las células nerviosas, el sorbitol puede acumularse en condiciones de
hiperglucemia, provocando la entrada de agua en las células al aumentar la presión osmótica y
perjudicando así la función tisular. Se considera que complicaciones de la Diabetes como la
retinopatía, la nefropatía o la neuropatía periférica pueden deberse en parte a este fenómeno.

La enzima SDH de Wako, ha sido obtenida a partir de microorganismos y presenta una alta
especificidad. El uso de este reactivo es de gran utilidad no solo en laboratorios de
investigación relacionados con la Diabetes y sus complicaciones sino además en la
cuantificación de Sorbitol en alimentos.
Además de estos seis reactivos antes descritos, Wako Chemicals cuenta con otros reactivos de
gran valor para los laboratorios bioquímicos. Estos son por ejemplo, el Curdlan, utilizado como
soporte en geles de filtración, como apoyo en cromatografía de afinidad, inmovilización de
enzimas, etc; el antibiótico Higromicina B o la enzima Superóxido Dismutasa tipo Mn (SOD)
importante defensa antioxidante contra los radicales de oxígeno libre.

Bibliografía:
 Aok, I. S., Chen, Z., Higasiyama, K., Setiawan, A., Akiyama, S., & Kobayashi, M. (2001).
Reversing effect of agosterol A, a spongean sterol acetate, on multidrug resistance in
human carcinoma cells. Japanese Journal of Cancer Research, 92(8), 886-895.
 Grant, B. F., Seib, P. A., Liao, M. L., & Corpron, K. E. (1989). Polyphosphorylated L‐
ascorbic Acid: A Stable Form of Vitamin C for Aquaculture Feeds. Journal of the World
Aquaculture Society, 20(3), 143-157.
 He, S., Li, R., Kanwar, J., & Zhou, S. (2011). Structural and functional properties of human
multidrug resistance protein 1 (MRP1/ABCC1). Curr Med Chem., 18(3), 439-481.
 Tsuchiya, M., Asahi, N., Suzuoki, F., Ashida, M., & Matsuura, S. (1996). Detection of
peptidoglycan and β-glucan with silkworm larvae plasma test. FEMS immunology and
medical microbiology, 15 (2-3), 129-134.

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