SOLUCION DEL TALLER

PRESENTADO POR:

Juan Gabriel Solano Vidal

Danny Steven León

PRESENTADO A:

Bibiana Duarte

MATERIA:

Microbiología

UNIVERSIDAD DEL CAUCA

POPAYAN
16-05-2018
1. La revista en la cual encontramos este artículo, es una revista en la cual se publica
información con respecto a la investigación realizadas en dos sectores que se
relacionan entre sí, el sector agropecuario y el sector agroindustrial. Sus
publicaciones tienen un alto impacto ya que de dichos artículos has salido nuevas
ideas para las personas que quieren darle un enfoque más agrario a sus
investigaciones, además se puede conocer más a fondo cierto tipo de
microorganismos, los cuales, en varios casos son el tema principal de los análisis y
estudios realizados.

2. Este artículo fue publicado en el año 2015

Las referencias recientes son las siguientes:

- [1] BELKACEM-HANFI, N., FHOULA, I., SEMMAR,

N., GUESMI, A., PERRAUD-GAIME, I., OUZARI,
H., BOUDABOUS, A. and ROUSSOS, S. Lactic
acid bacteria against post-harvest moulds and
ochratoxina isolated from stored wheat. Biological
Control, 76, 2014, p. 52-59.

- [2] VÉLEZ, J., GUTÍERREZ, L. y MONTOYA, O. Evaluación

de la actividad bactericida de bacterias
ácido lácticas aisladas en calostro de cerdas
frente a Salmonella typhimurium. Revista Facultad
Nacional de Agronimía, 68(1), 2015, p.
7481-7486

- [4] ALDUNATE, M., SRBINOVSKI, D., HEARPS, A.,

LATHAM, C., RAMSLAND, P. GUGASYAN, R.,
CONE, R. and TACHEDJIAN, G. Antimicrobioal and
immune modulatory effects of lactic and short
chain fatty acids produced by vaginal microbiota
associated whit eubiosis and bacterial vaginosis.
Frontiers in Physiology, 6, 2015, p. 164.

3. Probiotico:
Alimento que contiene bacterias vivas que contribuyen al equilibrio de la flora
intestinal y potencian el sistema inmunológico.
 Crecimiento:
El crecimiento es un término usado para referirse a un aumento en la cantidad, el
tamaño de un microorganismo, animal, persona o una situación.

Antagonismo:
Combinación de dos antimicrobianos en el cual uno de ellos interfiere con la
actividad del otro.

Patógeno:
En el ámbito de la infectología, un patógeno es un elemento capaz de originar una
enfermedad a la biología de un huésped, ya sea un humano, animal o planta.

4. El articulo da a conocer una investigación que se realizó con el fin de analizar el

crecimiento de L. plantarum y su efectos sobre microorganismos patógenos como
E. coli, S. typhimurium, C. perfringens, y S. aureus. En el cual su principal objetivo
fue determinar el efecto probiotico de la lactobacillus plantarums sobre los
microorganismos mencionados anteriormente. Para esto fue necesario hacer pruebas
en las cuales se tuvieron en cuenta parámetros como el pH, UFC/ ml, la cinética y el
tiempo.

5. el objetivo de la presente investigación busca determinar el efecto probiótico de L.

plantarum sobre E. coli, S. typhimurium, C. perfringens y S. aureus en condiciones
in vitro.

6. el problema identificado en el artículo fue que hay bacterias patógenas que

presentan proliferación y posesión en el intestino de los mamíferos, lo cual se busca
encontrar una bacteria láctica ya que son agentes que previenen trastornos
digestivos y enfermedades, que fuera capaz de inhibir estas bacterias patógenas
Salmonella typhimurium, Clostridium perfringens y Staphylococcus aureus. Para
ello se utilizó la bacteria L. plantarum porque presento susceptibilidad de
Dicloxacilina, Ciprofloxacina y Penicilina. La bacteria láctica inhibió las cepas
patógenas en las metodologías utilizadas y se espero buenos resultados.

7. Lo propuesto en el artículo es muy importante ya que da a conocer el efecto de una

bacteria como es lactobacillus plantarums sobre cuatro agentes patógenos, los
cuales se pueden encontrar es diversos ambientes como los alimentos. Entonces,
este estudio favorece la implementación de nuevas alternativas para reducir el
 riesgo de contraer una enfermedad causada por ejemplo por E. coli atacándola
directamente con alimentos probioticos o con medicinas convencionales como por
ejemplo la penicilina.
Esta investigación hace aportes en el área de la medicina, en el área agroindustrial y
en el área agropecuaria trayendo consigo nuevos métodos de prevención en todas
las tres áreas mencionadas.
8.

9. La metodología usada fue coherente con el objetivo, ya que dentro de la

investigación se realizaron varias pruebas que permitieron conocer bien cuáles son
las condiciones en las cuales las bacterias se reproducen, cual es el efecto de los
probioticos sobre las bacterias, en qué condiciones se da un mayor crecimiento de
bacterias y la manera más eficiente de reducir la reproducción de estas. Para tener
una mayor claridad se muestran tablas y graficas que permiten tener una mayor idea
de que tan efectivo fue este proceso.

10. - La bacteria lactobacillus plantarums fue importante dentro de este estudio ya que
es capaz de mantener a raya los microorganismos patógenos y evita que estos
florezcan, cabe resaltar que es una bacteria beneficiosa.

- Escherichia coli es una bacteria patógena que en su mayoria genera

enfermedades de trasmisión almentaria como el síndrome urémico hemolítico.
 - Salmonella typhimurium es una bacteria que se encuantra especialmente en
pollos y sus huevos, por lo cual no se recomienda tenerlos como mascota, fue
útil dentro de la investigación ya que no es tan común esta bacteria.

- Clostridium perfringens esuna bacteria gram-positiva anaeróbica e inmóvil que

se encuentra ampliamente distribuida en el ambiente, como en el intestino de los
seres humanos, en el suelo, el agua o en los alimentos. Y es la caudante de
algunos cuadros clínicos como: toxiinfecciones alimentarias, celulitis e
infecciones inespecíficas.

- Staphylococcus aureus es una bacteria facultativa gam-positava, puede producir

varias enfermedades como: infecciones cutáneas, celulitis, abscesos profundos,
meningitis, neumonía, etc

11
Cepas ATCC son microorganismos certificados para el control de calidad en
microbiología y es utilizado en disciplinas como la clínica, alimenticia, farmacéutica,
cosmética o ambiental. Sus características genotípicas y fenotípicas garantizan la
identidad del microorganismo y al tener esta documentación, el laboratorio evitará
realizar pruebas adicionales para la identificación de las cepas, lo que se traduce en
ahorro de tiempo y recursos.

Antibiograma:
Es la prueba microbiológica que se realiza para determinar la susceptibilidad de una
colonia bacteriana a un antibiótico o grupo de antibióticos. El antibiograma permite
definir para cada antibiótico, si la bacteria es sensible (antibiótico eficaz),
medianamente sensible (antibiótico eficaz en ciertas condiciones) o resistente
(antibiótico ineficaz). El antibiograma permite medir la capacidad de un antibiótico a
inhibir el crecimiento bacteriano. Por tanto, permite evaluar la eficacia de un antibiótico
sobre una bacteria.

M.R.S. AGAR:
Medio para el aislamiento y enumeración de lactobacilo
 Composición (Fórmula por litro) pH final: 6,4 ± 0,2

Peptona de carne 10,00 g

Extracto de carne de buey 8,00 g

Extracto de levadura 5,00 g

Glucosa 20,00 g

Fosfato Dipotasio 2,00 g

Acetato de Sodio 5,00 g

 Citrato Triamonio 2,00 g

Sulfato de Magnesio 0,20 g

Sulfato de Manganeso 0,05 g

Agar agar 10,00 g

Tween 80 Polisorbato 1,00 g

(BHI) Agar:

Es un medio de uso general adecuado para el cultivo de una amplia variedad de tipos de
organismos, incluidos las bacterias, levaduras y hongos filamentosos, a partir de muestras
clínicas.

Fórmula* por litro de agua purificada

Infusión de cerebro y corazón de (sólidos) 8,0 g

Digerido péptico de tejido animal 5,0

Digerido pancreático de caseína 16,0

Cloruro sódico 5,0

Glucosa 2,0

Fosfato disódico de hidrógeno 2,5

Agar 13,5

pH 7,4 ± 0,2

12. Escala de Mc Farland

La utilidad de la escala es poder realizar suspensiones bacterianas ajustadas a un patrón,
generalmente se suele usar el 0,5 Mc Farland, para esto se toma una muestra de nuestra
bacteria y la inoculamos en un tubo con solución salina, en el momento en que se produzca
un poco de turbidez ya estamos en el 0,5 (de forma visual).
La finalidad, es establecer una relación entre una precipitación química y una suspensión
bacteriana. Creamos 10 estándares (en la tabla aparece la composición de estos) y por
espectrofotometría, creamos una recta patrón, de forma que vamos a poder detectar la
concentración de nuestras diluciones bacterianas (de manera aproximada, ya que depende
de factores como el tamaño de la bacteria, la formación de agregados,...). La escala se basa
en la capacidad de precipitación del cloruro de bario en presencia de ácido sulfúrico
 13. En la primera prueba se observó que los diferentes antibióticos los cuales pueden
ser resistentes o sensibles observando donde tienen un efecto inhibidor según se
diámetro, esto es importante ya que algunos microorganismos son muy resistentes
debido al antagonismo natural de supervivencia.
Una inhibición se debe a la producción de ciertos compuestos antimicrobianos, en la
prueba in vitro se evidencio que la bacteria typhimurium requiere mayores
concentraciones, debido a que fue susceptible.
Para las pruebas de producción de catalasa y gas de L. plantarum fueron negativos,
lo que es un resultado positivo ya que lo que no se quiere es que se alteren las
funciones del tracto intestinal.
Se encontró también resistencia a sales biliares, lo cual es positivo e importante, ya
que en el organismo se secreta la bilis. La bacteria también fue resistente a los
diferentes cambios de pH en la cual fue puesta, esto es importante ya que se mostró
difícil de acabar a las diferentes escalas de pH, lo que quiere decir que sobrevivirá
en varios medios en donde se desee su crecimiento y reproducción.

14.

Se determinó la inhibición de L. plantarum sobre las bacterias patógenas a concentraciones

de 50,75 y 100 µl La evaluación del sobrenadante se realizó utilizando dos metodologías,
en sensidiscos y cilindros colocados sobre las cajas de petri que se incubaron en las mismas
Se observa que las cepas presentan mayor susceptibilidad en el método de sensidisco que
en el método de cilindros; a pesar de ello, el sobrenadante no inhibió a C. perfringensen
ninguno de los métodos, pero si a S. aureus, con mayor susceptibilidad al sobrenadante en
el método del sensidisco filtrado. S. tiphymurium y E. coli mostraron susceptibilidad al
sobrenadante únicamente con el método de sensidisco.
Se evidencia una fase exponencial de la cinética de crecimiento después de trascurrir un
tiempo después de iniciada la fermentación, a medida que pasa el tiempo el pH descendió y
la acidez aumentó.
El crecimiento bacteriano nuevamente demostró la resistencia de L. plantarum a bajas
concentraciones de pH Y el aumento de la acidez evidencia el proceso fermentativo de los
carbohidratos presentes en el medio de cultivo

A medida que trascurre el tiempo se evidencia una disminución del azúcar durante la
cinética se debe a su empleo en los procesos metabólicos de la bacteria láctica; de esta
manera se garantiza que la cepa obtenga energía para su normal desarrollo y genere ácidos
orgánicos que permitan un descenso del pH como lo demuestra el cuadro
Mientras que el consumo de proteína se muestra descenso durante las primeras horas de
fermentación, debido posiblemente a su utilización en la formación de nuevas células,
también se observa un incremento durante la fase exponencial, lo cual indica la formación
de sustancias proteicas en el medio como biocinas y aminoácidos libres,

15. Se llega a buenos resultados encontrando una bacteria láctica que previene trastornos
digestivos logrando reducción del pH, producción ácidos orgánicos, producción de biocinas
y buena capacidad de adherencia a la mucosa intestinal de los mamíferos que le permite
competir por espacio en el intestino de los mamíferos es así donde inhibe las bacterias
patógenas y se eliminaría la utilización de antibiótico en animales, logrando así un animal
que pueda estar libre de enfermedades y que pueda ser para consumo humano

16. La bacteria L. plantarum puede ser utilizada dentro de los alimentos probioticos para la
prevención de bacterias patógenas y la reproducción de microorganismos en el ser humano.

La bacteria L. plantarum presenta una mayor inhibición de bacterias patógenas lo cual pude
ser de gran ayuda al ser consumida para la regulación y eliminación de bacterias en el
intestino y prevenir enfermedades.

Bibliografías:

- https://salud.ccm.net/faq/5924-antibiograma
- http://mdmcientifica.com/cepasatcc
- Pérez-y-Terrón, Rocío, Thania S Gonzalez-Montfort, y Jesús Muñoz-Rojas.
«Antagonismo microbiano asociado a cepas bacterianas provenientes de
jitomate (Lycopersicum esculentum Mill) y maíz (Zea Mays)» 1, n.o 3 (s. f.): 8.