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UNIVERSIDAD NACIONAL

AUTÓNOMA DE MÉXICO

FACULTAD DE ESTUDIOS
SUPERIORES ZARAGOZA

Carrera: Q.F.B.
Laboratorio de BCT I

INFORME DE PRÁCTICA
“Curva estándar de la albúmina”

Fecha de entrega: 28 de agosto de 2018

Equipo: 4
Grupo: 1402

Integrantes de equipo:

Cortés Vega Ingrid Alejandra


González Pérez Sebastián Tomás
Guevara Alcántara Elizabeth
Sandoval Gallardo Erika Verónica
Curva estándar de la albúmina

Objetivos
Desarrollar y analizar una curva estándar.
Determinar la concentración de albúmina en la clara de huevo por el método de Lowry.

Resultados
Figura 1. Reacción entre una proteína con el reactivo de Biuret y de Folin-Ciocalteu

Cuadro 1. Valores requeridos para la preparación de las muestras.


Tubo Blanco 1 2 3 4 5 6 7
Solución problema - 0.2 0.4 0.6 - - - -
(mL)
Solución patrón - - - - 0.1 0.2 0.4 0.8
(mL)
H2O destilada 2.0 1.8 1.6 1.4 1.9 1.8 1.6 1.2

Cuadro 2. Valores obtenidos gráfica y experimentalmente de cada muestra.


Tubo 1 2 3 4 5 6 7
Concentración (mg) 0.031 0.015 0.019 0.01 0.02 0.04 0.08
Absorbancia 0.176 0.085 0.105 0.055 0.119 0.135 0.175
Concentación de
albúmina (g/100 mL) 15.5 11.25 9.5
Gráfica 1. Curva estándar de la albúmina en la clara de huevo.
Análisis de resultados
La reacción que se muestra en la figura 1 es la reducción de los iones de cobre en
condiciones alcalinas, lo que forma un complejo con los enlaces peptídicos (reacción de
Biuret).Después lo que se muestra es la reducción del reactivo de Folin-Ciocalteu por el
complejo cobre-enlace peptídico, la cual causa un cambio de color a azulado en la solución,
con una absorción en el rango de 640 a 750 nm.

Para preparar las muestras se requirieron tres tubos de solución problema con diferentes
concentraciones al igual que cuatro tubos de solución patrón como se muestra en el cuadro
1. La solución problema fue preparada con la clara de huevo al 10mg/100 mL de agua. En
total para todos los tubos se utilizó un volumen de 2mL de disolución.

Los valores expresados en el cuadro 2 fueron los obtenidos después de medir la


absorbancia de cada muestra en un espectrofotómetro a 640 nm; las muestras en los tubos
2 y 3 fueron diluidas con una proporción 1:3, por lo que se tuvo que considerar para los
cálculos. Finalmente se muestran resaltados con rojo los datos finales de las
concentraciones de la proteína (albúmina) obtenidas por medio de la gráfica 1, donde se
puede observar que el dato en el tubo 2 de 11.25 g/100mL fue el valor más cercano al
teórico, el cual es de 11 g/100mL.

Conclusiones
Los objetivos de la práctica se cumplieron, ya que se logró desarrollar y analizar una curva
estándar de una proteína, en este caso la albúmina, y determinar la concentración de la
misma en la clara de huevo por el método de Lowry.

Las ventajas de este ensayo son su sensibilidad, y lo más importante, su exactitud. Sin
embargo, requiere de más tiempo al preparar las disoluciones y las diluciones, ya que si las
muestras están muy concentradas, no puede ser correctamente medida la absorbancia.

La curva estándar en un proceso analítico relaciona la señal (absorbancia) y las


características del analito (concentración), de modo que la calibración se realiza para
obtener la señal de respuesta como función de la concentración real del analito.
Bibliografía
1. Laneri J L, Casás R. Manual de procedimientos para el control microbiológico de
alimentos. Paraguay: Instituto Interamericano de Cooperación para la Agricultura;
2001.
2. Harris C D. Análisis químico cuantitativo. 3ª ed. México: Editorial Reverté; 2007.
3. Connors K A. Curso de análisis farmacéutico (ensayo del medicamento). 1ª ed.
Barcelona: Editorial Reverté; 1981.
4. UPIIGBiotech/site [Internet]:Curvas de calibración para proteínas y azúcares
reductores; 2012 [actualizado 04 abril 2014, citado 26 ago 2018]. Disponible en:
https://sites.google.com/site/upiigbiotech/home/practica-1

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