UNIVERSIDAD NACIONAL AGRARIA DE LA SELVA

FACULTAD DE ZOOTECNIA

ESCUELA PROFESIONAL DE ZOOTECNIA

PRACTICA 8

DETERMINACI’ON DE COLESTEROL Y GLUCOSA

CURSO : BIOQUÍMICA NUTRICIONAL.

DOCENTE : Ing. PEREZ MENDOZA, GUDER ELVIRA.

ALUMNO : ESTRADA HUAMÁN, MAX LENIN

FECHA : 28 DE JUNIO DEL 2018.

 I. INTRODUCCIÓN

Los hidratos de carbono son compuestos orgánicos formados fundamentalmente

por C, O e H a partir de los cuales se puede obtener energía con gran rapidez y
que aportan, aproximadamente, más del 50 % de las calorías que recibimos de
la dieta.

Los niveles de glucosa en sangre la glucemia se mantienen dentro de unos

límites muy estrechos y constantes gracias, a la acción de dos hormonas: la
insulina y el glucagón. Así, tras la ingestión aumenta la glucemia pero, en las
personas con un correcto metabolismo hidrocarbonado, estos niveles
descienden rápidamente gracias a la liberación de insulina de manera que tras
1,5 a 2 horas la glucemia vuelve al nivel basal.

Objetivo:

- Determinar por espectrofotometría el contenido de la glucosa y colesterol

en plasma sanguíneo humano.
 II. REVISIÓN BIBLIOGRÁFICA

2.1. La glucosa.
Es un glúcido o carbohidrato, más precisamente un monosacárido, es una
de las estructuras más sencillas dentro de los azucares simples, estos
están presentes en forma libre en las frutas y la miel. Las hormonas
producidas en el cuerpo llamadas insulina y glucagón ayudan a controlar
los niveles de azúcar en la sangre. La determinación de glucemia es un
examen que mide la cantidad de un azúcar llamado glucosa en una muestra
de sangre (HUAMANGA I. 2014).
La glucosa es una molécula no ionizada de 6 átomos de carbono, por tanto
es una hexosa. Es el monosacárido más abundante en la naturaleza. Como
en su metabolismo no libera iones de hidrógeno no provoca acidosis, aun
con concentraciones en sangre muy elevadas. Principal combustible del
cerebro que consume alrededor de 140 gramos de glucosa al día
(BIOPSICOLOGÍA-2012).

2.2. Enfermedades relacionadas con la glucosa.

La enfermedad más común relacionada con el metabolismo de la glucosa
es la Diabetes mellitus que se caracteriza por la presencia de niveles
elevados de glucosa en sangre. Otra enfermedad relacionada con el
metabolismo de esta sustancia es la obesidad (BIOPSICOLOGÍA-2012).

La llamada hipoglucemia, cuando baja la glucosa en la sangre, ocurre

cuando su nivel de glucosa en la sangre disminuye a menos de 70 mg/dl.
Tener baja la glucosa en la sangre puede hacer que se sienta hambriento,
tembloroso, nervioso, sudoroso, mareado, adormilado, ansioso o confuso.
Una de las maneras de elevar el nivel de glucosa es consumiendo una
proporción de carbohidratos (A.A.D - 2009)
2.3. Importancia de la glucosa.

Lo podemos encontrar como ingrediente que se encuentra en muchos

Dulces y Golosinas, encontrándose no solo en su forma química de
Glucosa, sino también en sus fuentes de Fructosa y Galactosa, siendo
estos compuestos muy importantes en el momento en que estamos
realizando la Digestión, luego de disfrutar de una buena comida, teniendo
además los azúcares la funcionalidad de ser la principal fuente energética
de nuestro organismo, tanto para que podamos mover nuestros músculos
como también en la Alimentación Celular que nos permite reparar los tejido
y formarnos (EDITORIAL – 2013).

2.4. Niveles de glucosa normales.

Para el caso de glucosa, una persona sana con 90 mg/dL puede tener el
informe de una glicemia de 110 mg/dL y el un caso de algún paciente con
diabetes, la misma muestra tiene una variación entre 130 y 148 mg/ dL de
glucosa (SANDOVAL V. etal. 2012).

2.5. Colesterol.
El colesterol es un tipo de grasa que se encuentra normalmente en nuestro
organismo formando parte de las membranas celulares, lipoproteínas y
hormonas esteroideas; entre ellas se encuentran las hormonas sexuales:
progesterona, testosterona y estrógenos. Es también un importante
constituyente de la bilis que es secretada por la vesícula biliar y que
cumple una importante función en la digestión de las grasas y además el
colesterol es un precursor de la vitamina D (QUESADA, A- 2018).

2.6. Tipos de lipoproteínas.

2.6.1. Lipoproteínas de alta densidad El colesterol HDL recoge el

colesterol de los vasos sanguíneos y lo devuelve al hígado, que
se encarga de procesarlo y de enviado al exterior (GAVIN L.
2013).

2.6.2. Lipoproteínas de baja densidad La mayor parte del colesterol

es LDL, y este es el tipo de colesterol que tiene más
 probabilidades de obstruir los vasos sanguíneos, impidiendo
que la sangre fluya por el organismo como debería fluir (GAVIN
L. 2013).

2.7. Prueba del colesterol.

La prueba de colesterol es un análisis que mide la cantidad de cada
tipo de colesterol y de ciertos lípidos en la sangre. Un nivel demasiado
alto de colesterol LDL en la sangre puede ponerlo en riesgo de tener
una enfermedad del corazón y otros problemas de salud graves. Los
niveles altos de LDL pueden hacer que se forme placa, una sustancia
grasosa que estrecha las arterias y obstruye la circulación normal de
la sangre. Cuando se obstruye el flujo de sangre al corazón, puede
producirse un ataque al corazón infarto de miocardio, y cuando se
obstruye el flujo de sangre al cerebro, puede producirse un ataque
cerebral infarto cerebral o accidente cerebrovascular y enfermedad
arterial periférica (B.N.M. EE.UU. 2017)
2.8. Niveles de colesterol.
Para el caso del colesterol, si un paciente tiene 180 mg/dL de
colesterol valor considerado como normal, aleatoriamente hasta 257
mg/dL (SANDOVAL V. etal. 2012).
 III. MATERIALES Y MÉTODOS
1.1. Lugar y fecha.
Se llevó a cabo el día 28 de junio del 2018 en el laboratorio de bioquímica
nutricional que pertenece a la Universidad Nacional Agraria de la Selva, en
la ciudad de Tingo María, distrito de Rupa Rupa, provincia de Leoncio
Prado, departamento de Huánuco, Geográficamente está ubicado en una
latitud Sur de 09°17’49”, longitud Oeste 76°01’07” y una altitud de 660
m.s.n.m.

1.2. Materiales.
- Tubo de ensayos
- Matraces grandes y pequeños.
- Probeta de 100 ml y 1000ml.
- Agua destilada.
- Reactivo R-fenol.
- Agua para el aforado.
- 3 ml de reactivo enzima
- Frascos caramelo.
- Cocina eléctrica.
- Espectrofotómetro.

1.3. Metodología.

El método que empleó el Ing. Paredes Orellana, Walter Alberto en la

práctica fue de manera introductoria, explícito y detallado la parte
teórica, seguidamente se dio el uso del respectivo material para realizar
la práctica de la determinación glucosa y colesterol.

1.4. Procedimiento.
1.4.1. Determinación del nivel de colesterol.
- Para poder determinar el nivel de colesterol tomamos una muestra de
sangre en ayunas antes de que el individuo coma algún tipo de alimento
y así evitar un cálculo de información falsa, 5 ml.
- Si hay anticoagulante centrifugamos a la muestra y se logra separa el
suero.
 - Si no hay anticoagulante lo mantenemos a 45° por una hora y se genera
el suero.
- Si el suero es transparente este individuo está en buen estado si esta
lechoso está mal por el nivel de grasa contenida.

Preparar la solución trabajo.

- Una vez obtenida la muestra de la centrifuga preparamos el reactivo de
trabajo que consta de cuatro reactivos.
- Los reactivos grandes son dos: R. 4AF y R-fenol.
- Los reactivos pequeños son dos: El enzima y el patrón estándar.
- En una probeta adicionamos de 100 ml. Colocamos 50 parte de agua
destilada.
- Adicionamos 5 partes de R. 4AF.
- Adicionamos 5 partes de R. fenol.
- 40 partes de aforado con agua.
- 3 ml de R. enzima. Agitamos hasta homogenizar la solución.
- Guardamos en un frasco caramelo y con su fecha.

Procedimiento para realizar la lectura.

- En tres tubos de ensayos colocamos: m1, blanco; m2, estándar y m3,
desconocido.
Blanco Estándar Desconocido
Estándar 20 micro. L
Desconocido 20 micro. L de
sangre.
Sol. Trabajo. 2 ml 2 ml 2 ml

- Luego pasamos a las muestras por baño María a 37°C.

- Luego lo calibramos en el espectrofotómetro a 500 nm y nos arrojará
unos valores de absorbancia para cada muestra.
- Encontrar el valor corregido:
𝑉𝐶𝑆𝑡𝑎𝑛𝑑𝑎𝑟 = 𝑆 − 𝐵 =
𝑉𝐶𝐷𝑒𝑠𝑐𝑜𝑛𝑜𝑐𝑖𝑑𝑜 = 𝐷 − 𝐵 =
- Encontramos el factor de corrección del colesterol:
200
𝐹𝑐𝑐𝑜𝑙𝑒𝑠𝑡𝑒𝑟𝑜𝑙 = 𝑉𝐶𝑆 =
- Hallamos el valor de colesterol:
𝑉𝐶𝑜𝑙𝑒𝑠𝑡𝑒𝑟𝑜𝑙 = 𝐹𝐶𝑐𝑜𝑙𝑒𝑠 𝑥 𝑉𝐶𝐷 =

1.4.2. Determinación dela glucosa.

- Preparamos un kit de glicemia
- Los reactivos grandes son dos: R. 4AF y R-fenol.
- Los reactivos pequeños son dos: El enzima y el patrón estándar.
- En una probeta adicionamos de 1000 ml. Colocamos 50 parte de agua
destilada.
- Adicionamos 5 partes de R. 4AF.
- Adicionamos 5 partes de R. fenol.
- 40 partes de aforado con agua.
- 3 ml de R. enzima. Agitamos hasta homogenizar la solución.
- Guardamos en un frasco caramelo y con su fecha.

Precedemos a realizar la lectura.

Blanco Estándar Desconocido

Estándar 20 micro. L
Desconocido 20 micro. L de
sangre.
Sol. Trabajo 2 ml 2 ml 2 ml
glucemia 3

- Lo llevamos a baño María por 10 minutos, a 37°C y graduamos en el

espectrofotómetro a 505 nm.
- El espectrofotómetro nos arrojara un valor de observancia para cada
muestra.
- Hallamos el valor corregido de la glicemia.
- Encontrar el valor corregido de la glucosa.
𝑉𝐶𝑆𝑡𝑎𝑛𝑑𝑎𝑟 = 𝑆 − 𝐵 =
𝑉𝐶𝐷𝑒𝑠𝑐𝑜𝑛𝑜𝑐𝑖𝑑𝑜 = 𝐷 − 𝐵 =
- Encontramos el factor de corrección de la glucosa.
100
𝐹𝑐𝑐𝑜𝑙𝑒𝑠𝑡𝑒𝑟𝑜𝑙 = 𝑉𝐶𝑆 =
- Hallamos el valor de la glucosa:

𝑉𝑔𝑙𝑢𝑐𝑜𝑠𝑎 = 𝐹𝐶𝑔𝑙𝑢𝑐𝑜𝑠𝑎 𝑥 𝑉𝐶𝐷 =

 IV. RESULTADOS

4.1. Determinación de colesterol.

- Valores de absorbancia.
B=0.053.
S=0.062
D=0.061
- Encontrar el valor corregido de la glucosa.
𝑉𝐶𝑆𝑡𝑎𝑛𝑑𝑎𝑟 = 𝑆 − 𝐵 = 0.062 − 0.053 = 0.009
𝑉𝐶𝐷𝑒𝑠𝑐𝑜𝑛𝑜𝑐𝑖𝑑𝑜 = 𝐷 − 𝐵 = 0.061 − 0.053 = 0.008
- Encontramos el factor de corrección de la glucosa.
200 200
𝐹𝑐𝑐𝑜𝑙𝑒𝑠𝑡𝑒𝑟𝑜𝑙 = 𝑉𝐶𝑆 = 0.009 = 22222.22

- Hallamos el valor de la glucosa:

𝑉𝑐𝑜𝑙𝑒𝑠𝑡𝑒𝑟𝑜𝑙 = 𝐹𝐶𝑐𝑜𝑙𝑒𝑠𝑡𝑒𝑟𝑜𝑙 𝑥 𝑉𝐶𝐷 =
𝑉𝐶𝑜𝑙𝑒𝑠𝑡𝑒𝑟𝑜𝑙 = 22222.22 𝑥 0.008
𝑉𝐶𝑜𝑙𝑒𝑠𝑡𝑒𝑟𝑜𝑙 = 177.78 𝑚𝑔/100𝑐𝑐

4.2. Determinación de la glucosa.

- Valores de absorbancia.
B=0.052.
S=0.064
D=0.063
- Encontrar el valor corregido de la glucosa.
𝑉𝐶𝑆𝑡𝑎𝑛𝑑𝑎𝑟 = 𝑆 − 𝐵 = 0.064 − 0.052 = 0.012
𝑉𝐶𝐷𝑒𝑠𝑐𝑜𝑛𝑜𝑐𝑖𝑑𝑜 = 𝐷 − 𝐵 = 0.063 − 0.052 = 0.011
- Encontramos el factor de corrección de la glucosa.
100 100
𝐹𝐶𝑔𝑙𝑢𝑐𝑜𝑠𝑎 = 𝑉𝐶𝑆 = 0.012 = 8333.33
 - Hallamos el valor de la glucosa:
𝑉𝑔𝑙𝑢𝑐𝑜𝑠𝑎 = 𝐹𝐶𝑔𝑙𝑢𝑐𝑜𝑠𝑎 𝑥 𝑉𝐶𝐷 =
𝑉𝑔𝑙𝑢𝑐𝑜𝑠𝑎 = 8333.3 𝑥 0.011
𝑉𝑔𝑙𝑢𝑐𝑜𝑠𝑎 = 91.67 𝑚𝑔/100𝑐𝑐
4.3. Determinación del colesterol profesor WAPO.
- Valores de absorbancia.

B=0.087.

S=0.094

D1=0.093

D2=0.095

D3=0.096

- Encontrar el valor corregido del colesterol.

- 𝑉𝐶𝑆𝑡𝑎𝑛𝑑𝑎𝑟 = 𝑆 − 𝐵 = 0.094 − 0.087 = 0.007
- 𝑉𝐶𝐷𝑒𝑠𝑐𝑜𝑛𝑜𝑐𝑖𝑑𝑜 = 𝐷1 − 𝐵 = 0.093 − 0.087 = 0.006

𝑉𝐶𝐷𝑒𝑠𝑐𝑜𝑛𝑜𝑐𝑖𝑑𝑜 = 𝐷2 − 𝐵 = 0.095 − 0.087 = 0.008

𝑉𝐶𝐷𝑒𝑠𝑐𝑜𝑛𝑜𝑐𝑖𝑑𝑜 = 𝐷3 − 𝐵 = 0.096 − 0.087 = 0.009

- Encontramos el factor de corrección de la glucosa.

200 200
- 𝐹𝑐𝑐𝑜𝑙𝑒𝑠𝑡𝑒𝑟𝑜𝑙 = 𝑉𝐶𝑆 = 0.007 = 28,571.42

Hallamos el valor del colesterol:

- 𝑉𝑐𝑜𝑙𝑒𝑠𝑡𝑒𝑟𝑜𝑙 = 𝐹𝐶𝑐𝑜𝑙𝑒𝑠𝑡𝑒𝑟𝑜𝑙 𝑥 𝑽𝑪𝑫𝟏 =

- 𝑉𝐶𝑜𝑙𝑒𝑠𝑡𝑒𝑟𝑜𝑙 = 28571.42𝑥 0.006
- 𝑉𝐶𝑜𝑙𝑒𝑠𝑡𝑒𝑟𝑜𝑙 = 171.42 𝑚𝑔/100𝑐𝑐

- 𝑉𝑐𝑜𝑙𝑒𝑠𝑡𝑒𝑟𝑜𝑙 = 𝐹𝐶𝑐𝑜𝑙𝑒𝑠𝑡𝑒𝑟𝑜𝑙 𝑥 𝑽𝑪𝑫𝟐 =

- 𝑉𝐶𝑜𝑙𝑒𝑠𝑡𝑒𝑟𝑜𝑙 = 28571.42 𝑥 0.008
- 𝑉𝐶𝑜𝑙𝑒𝑠𝑡𝑒𝑟𝑜𝑙 = 228.57 𝑚𝑔/100𝑐𝑐
 - 𝑉𝑐𝑜𝑙𝑒𝑠𝑡𝑒𝑟𝑜𝑙 = 𝐹𝐶𝑐𝑜𝑙𝑒𝑠𝑡𝑒𝑟𝑜𝑙 𝑥 𝑽𝑪𝑫𝟑 =
- 𝑉𝐶𝑜𝑙𝑒𝑠𝑡𝑒𝑟𝑜𝑙 = 28571.42 𝑥 0.009
- 𝑉𝐶𝑜𝑙𝑒𝑠𝑡𝑒𝑟𝑜𝑙 = 257.14 𝑚𝑔/100𝑐𝑐
Nota: los valores normales de glucosa oscilan entre los 150 mg/100cc a 250
mg/100cc y los resultados del profesor marcan entre 171.42mg/100cc y 257.14
mg/100cc aunque se pasó unas unidades de más eso puede ser parte de las
malas muestras que se haya sacado o indicios de colesterol en el ingeniero
Wapo.

4.4. Determinación de la glucosa del profesor WAPO.

Valores de absorbancia.

B=0.1061

S=0.1082

D1 = 0.1094

D2 = 0.1087

D3 = 0.1078

Encontrar el valor corregido de la glucosa.

𝑉𝐶𝑆𝑡𝑎𝑛𝑑𝑎𝑟 = 𝑆 − 𝐵 = 0.1082 − 0.1061 = 0.0021

𝑉𝐶𝐷𝑒𝑠𝑐𝑜𝑛𝑜𝑐𝑖𝑑𝑜 = 𝐷1 − 𝐵 = 0.1094 − 0.1061 = 0.0033

𝑉𝐶𝐷𝑒𝑠𝑐𝑜𝑛𝑜𝑐𝑖𝑑𝑜 = 𝐷2 − 𝐵 = 0.1087 − 0.1061 = 0.0026

𝑉𝐶𝐷𝑒𝑠𝑐𝑜𝑛𝑜𝑐𝑖𝑑𝑜 = 𝐷3 − 𝐵 = 0.1078 − 0.1061 = 0.0017

Encontramos el factor de corrección de la glucosa.

100 100
𝐹𝐶𝑔𝑙𝑢𝑐𝑜𝑠𝑎 = 𝑉𝐶𝑆 = 0.0021 = 4,7619.04

Hallamos el valor de la glucosa:

𝑉𝑔𝑙𝑢𝑐𝑜𝑠𝑎 = 𝐹𝐶𝑔𝑙𝑢𝑐𝑜𝑠𝑎 𝑥 𝑽𝑪𝑫 𝟏 =
𝑉𝑔𝑙𝑢𝑐𝑜𝑠𝑎 = 47,619.04 𝑥 0.0033
 𝑉𝑔𝑙𝑢𝑐𝑜𝑠𝑎 = 157.14𝑚𝑔/100𝑐𝑐

𝑉𝑔𝑙𝑢𝑐𝑜𝑠𝑎 = 𝐹𝐶𝑔𝑙𝑢𝑐𝑜𝑠𝑎 𝑥 𝑽𝑪𝑫 𝟐 =

𝑉𝑔𝑙𝑢𝑐𝑜𝑠𝑎 = 47,619.04 𝑥 0.0026
𝑉𝑔𝑙𝑢𝑐𝑜𝑠𝑎 = 123.81 𝑚𝑔/100𝑐𝑐

𝑉𝑔𝑙𝑢𝑐𝑜𝑠𝑎 = 𝐹𝐶𝑔𝑙𝑢𝑐𝑜𝑠𝑎 𝑥 𝑽𝑪𝑫 𝟑 =

𝑉𝑔𝑙𝑢𝑐𝑜𝑠𝑎 = 47,619.04 𝑥 0.0017
𝑉𝑔𝑙𝑢𝑐𝑜𝑠𝑎 = 80.95 𝑚𝑔/100𝑐𝑐

Nota: Los resultados demuestran que el profesor Wapo presenta un nivel alto de
glucosa por lo que podría afirmarse que tiene diabetes. El nivel de glucosa
normales está entre los 70 y 110 mg/100cc. Y los del profesor oscilan entre 80
hasta 157.14 mg/100cc.
 V. DISCUSIÓN

Si un paciente tiene 180 mg/100cc de colesterol valor considerado como normal,

aleatoriamente hasta 257 mg/100cc (SANDOVAL V. etal. 2012) esto indica que
los valores de colesterol de profesor están en su normalidad.

Para el caso de glucosa, una persona sana con 90 mg/100cc puede tener el
informe de una glicemia de 110 mg/dL y el un caso de algún paciente con
diabetes, la misma muestra tiene una variación entre 130 y 148 mg/100cc de
glucosa (SANDOVAL V. etal. 2012) esto coincide con los niveles altos que se
presentan en la muestra de glucosa.

VI. CONCULSIÓN

En esta práctica se determinó el colesterol .El colesterol es el principal esterol

del organismo humano y precursor de todos los demás esteroides corporales.
Se encuentra formando parte de membranas celulares, lipoproteínas, ácidos
biliares y hormonas esteroideas. Los niveles normales es menos de 250 y
240, el resultado fue de 171. 42 mg/dl y 257. 14 mg/dl que se encuentra
dentro del rango. Un aumento del colesterol puede causar enfermedades
cardiovasculares. Es importante su correcta realización ya que ayuda en el
diagnóstico oportuno deformación de ateromas que provocan los infartos.
 La prueba si está por arriba de los niveles normales 75-115 mg/dl. Si
demuestra en el individuo una hiperglucemia 122 mg/dl y resultado
hipoglicémico 44.1 mg/dl. El diagnóstico temprano de nivel de glucosa es de
suma importancia para evitar problemas crónicos y efectos secundarios. En
el cambio del profesor los niveles de glucosa son muy altos indicando que
presenta diabetes.

VII. REFERENCIAS BIBLIOGRAFICAS

(HUAMANGA I. 2014).Determinación de glucosa. [ En línea].

https://es.slideshare.net/jhulisalove/practica-nro-2-bioquimica-
determinacion-de-glucosa. Consultado el 2 de julio del 2018.

(BIOPSICOLOGIA-2012).6.1. Glucosa. [En línea].

http://www.biopsicologia.net/nivel-3-participaci%C3%B3n-
 pl%C3%A1stica-y-funcional/6.1.-glucosa. Consultado el 2 de
julio del 2018.

(Asociación Americana de la Diabetes- 2009). Guía N° 15. Todo acerca de la

glucosa en la sangre. [En línea].
https://professional.diabetes.org/sites/professional.diabetes.org/fi
les/media/all_about_blood_glucose_spanish.pdf. Consultado el 2
de julio del 2018.

(EDITORIAL – 2013). Importancia de la glucosa. [En línea]

https://www.importancia.org/glucosa.php. Consultado el 2 de
julio del 2018

(QUESADA, A- 2018).Diagnóstico de Laboratorio. Principales pruebas de

Bioquímica Clínica y de Laboratorio. [En línea].
https://www.geosalud.com/nutricion/colesterol.htm Consultado el
2 de julio del 2018.

(GAVIN L. 2013).El colesterol y donde acecha. [En línea].

https://kidshealth.org/es/teens/cholesterol-esp.html. Consultado
el 3 de julio del 2018.

(BBIBLIOTECA NACIONAL DE ESTADOS UNIDOS-2017). Niveles de

colesterol. [En línea].
https://medlineplus.gov/spanish/labtests/cholesteroltest.html.
Consultado el 3 de julio del 2018.

(SANDOVAL V. etal. 2012). Precisión en la determinación de glucosa, colesterol

y triglicéridos séricos, en laboratorios clínicos de Lima, Perú.
Anales de la Facultad de Medicina, vol. 73, núm. 3, julio-
septiembre, 2012, pp. 233-238 Universidad Nacional Mayor de
San Marcos Lima, Perú. [En línea].
http://www.redalyc.org/pdf/379/37925140015.pdf. Consultado el
10 de julio del 2018.