IINFORME PRCTICA

Interacciones Simbióticas Entre Plantas Y Microrganismos

Escuela de Ciencias Agrícolas Pecuarias y del Medio Ambiente

ECAPMA
Universidad Nacional Abierta y a Distancia
UNAD
Mayo de 2018
 INTRODUCCION.

El suelo es el hábitat ideal para el desarrollo de los microorganismos ya

que su estructura constituye un entramado en el que pueden acomodarse
tanto en el exterior como en el interior de los agregados. La mayor
concentración de microorganismos se encuentra en la zona cercana a las
raíces en lo que se conoce como en nombre de rizosfera. Las raíces
corresponden a una biomasa de 5 a 6 ton por hectárea en un campo
cultivado. Su actividad bioquímica produce unos exudados radiculares,
que contienen, según las especies vegetales, entre el 10 y el 50 % de la
energía fijada por fotosíntesis. Estos exudados ricos en compuestos
carbonatados sirve de alimento a los microbios de la rizosfera que, a
cambio, proporcionan minerales que necesita la planta. (Asociación Vida
Sana)
Algunos tipos de bacterias y las micorrizas hacen parte de estos
microrganismos y se destacan por la importancia que representan en
algunos proceso que facilitan la nutrición de las plantas y el control de
patógenos, en el caso de las bacterias las podemos encontrarlas en la
naturaleza bajo dos formas:
 En estado libre en el suelo.
 En simbiosis
En estado libre pueden fijar nitrógeno en aerobiosis (nitrobacterias) o en
anaerobiosis (Clostridium, Klebsiella). Pero las cantidades de nitrógeno
fijadas por estos organismos son insuficientes para permitir el desarrollo
de la agricultura.
La fijación simbiótica es mucho más eficaz que la libre, siendo la más
común la simbiosis con plantas leguminosas. Esta fijación se hace
mediante bacterias del tipo Rhizobium que viven en los nódulos
radiculares de las leguminosas.
Se tiene conocimiento que el frijol es una de las especies agrícolas con
mayor capacidad de asociar microrganismos benéficos durante su ciclo
vegetativo, las nodulaciones presentes indican la presencia de bacterias
fijadoras de nitrógeno, el ejercicio practicado mediante la instalación de
tratamientos con frijol Caupí permitió observar y comparar el desarrollo
de esta especie bajo diferentes condiciones determinadas por un
inoculante, sustrato preparado y suelo sin tipo ningún de tratamiento.

OBJETIVOS

OBJETIVO GENERAL.

Reconocer funciones e importancia de la actividad simbiótica que

desempeñan algunos microorganismos en algunas especies
vegetales

OBJETIVOS ESPECIFICOS

 Establecer efectos de un inoculante en la fase germinativa del frijol

caupí bajo dos condiciones de sustrato.

 Comparar la presencia de nodulaciones indicadoras de la presencia

de bacterias endosimbióticas en raíces de frijol en las primeras 2
semanas de fase vegetativa

 Establecer influencia del inoculante en el desarrollo foliar y radicular

de la especie observada
MARCO TEORICO

Se ha demostrado que los Microorganismos promotores del crecimiento

vegetal, incluyendo Rizobacterias promotoras del crecimiento vegetal,
Bacterias promotoras del crecimiento, bacterias diazotróficas, fijadores de
nitrógeno de vida libre y Hongos formadores de micorrizas arbusculares
tienen un efecto directo o primario en la nutrición vegetal y, por ende, en
la estimulación del crecimiento de las plantas, no obstante, estudios
recientes muestran la potencialidad del uso de estos inoculantes como
agentes de Control Biológico o Biocontroladores, considerándolo como un
efecto secundario de esta interacción. (Cano, 2011)
En la rizosfera existen gran número de microorganismos que establecen
relaciones de simbiosis con las plantas. Estos microorganismos
intervienen en el ciclo de algunos elementos minerales como el fósforo,
el nitrógeno, el carbono, el hierro, etc. y favorecen la nutrición de las
plantas. A cambio se aprovechan de los exudados de las raíces en forma
de ácidos orgánicos, mucílagos, aminoácidos o azúcares. Los PGPR
favorecen el crecimiento de las plantas por diferentes mecanismos,
síntesis de fitohormonas (fundamentalmente el ácido indolacético),
promocionan el crecimiento de la raíz y la proliferación de los pelos
radicales, inhiben el crecimiento de microorganismos patógenos y
producen sustancias quelantes del hierro (sideróforos) que aumentan su
absorción por parte de las plantas. Además intervienen en la fijación del
nitrógeno (bacterias fijadoras de nitrógeno) y aumentan la absorción de
agua y nutrientes y la absorción del fósforo (micorrizas).
La entrada del microorganismo por las raíces de la planta genera la
paralización inmediata de la producción de la hormona auxina,
responsable del crecimiento, provocando los abultamientos descritos
llamados nódulos. Además, en el interior de la célula vegetal, la bacteria
condiciona a la planta la producción de una proteína transportadora de
oxígeno, similar a la hemoglobina presente en el interior de los glóbulos
rojos de la sangre, llamada Leg-hemoglobina. Y, ¿por qué este afán de
capturar el oxígeno celular? La fijación de nitrógeno se lleva a cabo a
través de un complejo enzimático, la nitrogenasa. Una característica muy
importante de éste es su extrema sensibilidad e inhibición por la presencia
de este gas oxidante (Nelson y Cox 2009). El oxígeno es la molécula final
aceptora de los electrones en el metabolismo aeróbico microbiano
productor de energía. Su disponibilidad en el citoplasma celular podría
acarrear serios problemas para el correcto funcionamiento del complejo
enzimático. La hemoglobina especial capturará este gas y lo incorporará
de un modo más específico al paso final de aceptación electrónica. (López
Pérez, 2016)

Principales Rizo bacterias fijadoras de nitrógeno.

Hay muchas rizobacterias fijadoras de nitrógeno de vida libre,

contribuyendo a la fijación de nitrógeno desde la atmosfera hacia las
plantas, incluyendo cultivos agronómicamente importantes. Los
diazótrofos en la rizósfera pertenecen a una amplia variedad de géneros
de los cuales los más investigados han sido Azotobacter y Azospirillum,
aunque muchos otros han sido reportados al poseer una asociación con
gramíneas tropicales y arroz.

Azotobacter sp, es un microorganismo habitante regular del suelo, fijador

de nitrógeno y productor de sustancias de crecimiento vegetal. Se
encuentra generalmente asociado a la rizósfera (zona de raíces) y en las
hojas (filósfera) de muchas plantas, forma unas estructuras especiales
llamadas quistes, se han demostrado reducciones de la fertilización
nitrogenada en un 40% e incremento de los rendimientos en un 25 a 50%
en hortalizas con la utilización de Azotobacter spp, aumentos del 11% en
rendimiento de zanahoria en maíz de 44% y en arroz del 8% y en un 16%
en cebada; se han demostrado efectos positivos en tomate, trigo, papa y
girasol. (Rusinque, 2010)

MATERIALES Y METODOS.

 Bandejas de siembra.
 Palas
 Suelo tratado
 Suelo sin tratar
 Arena de rio
 Lombriabono
 Desinfectante de suelo (TERRASAFE)
 Inoculante (MONIBAC)
 Semillas de Frijol
 Regla de 30 Cm
 Libreta de apuntes
El montaje del ensayo correspondiente a la práctica se realizó en
CORPOICA CI.Turipaná ubicado en el municipio de Cerete – Córdoba.
Una vez definido el sitio y los materiales a utilizar se procedió a la
preparación de sustratos para la siembra del material de frijol
seleccionado
El sustrato para los tratamientos 1 y 2 correspondiente a suelo tratado se
conformó de la siguiente manera.

2 partes de aluvión
1 parte de arena de rio
1 parte de materia orgánica (lombriabono)
Se realizo la mezcla de estos materiales, seguidamente la desinfección
correspondiente, para la cual se utilizó el producto TERRASAFE diluido en
agua a razón de 4 cc/lt agua, se utilizó una bomba de espalda de 20 litros
para esparcir la solución en el sustrato compuesto.
El sustrato sin preparación compuesto por solo suelo, inicialmente se le
realizó picado y zarandeado (colado) para eliminar terrones gruesos y
restos de material orgánico (pasto y raíces)
Después de disponer de los respectivos sustratos se realizó el llenado de
bandejas para la siembra, de esta manera obtuvimos.
2 bandejas de 20 cubetes con suelo tratado
2 bandejas de 20 cubetes con suelo sin tratar
La semilla de frijol fue seleccionada y separada formando 2 grupos de
semillas de 100 grs cada uno. (Grupo A , Grupo B)
El grupo de semillas “A” fue inoculado con el producto MONIBAC
CORPOICA el cual es un biofertilizante formulado a base de Azotobacter
chroococcum (Rizo bacterias) con una concentración mínima de 108
UFC/g de producto.
El tratamiento se realizó dejando inmersa la semilla por un tiempo de 30
minutos en el inoculo mencionado
El grupo de semillas “B” no se le practico ningún tratamiento solo se dejó
en remojo durante 24 horas
Una vez dispuesto los 2 sustratos y los 2 grupos de semillas de frijol se
procedió a realizar la siembra respectiva que conformaría los diferentes
tratamientos relacionados a continuación

 Tratamiento 1 = Suelo tratado – 20 Semillas de frijol sin inocular

sembradas en bandeja de 20 cubetes.
 Tratamiento 2 = Suelo tratado – 20 Semilla de frijol Inoculada con
MONIBAC sembradas en bandeja de 20 cubetes.
 Tratamiento 3 = Suelo sin tratamiento – 20 Semillas de frijol sin
inocular sembradas en bandeja de 20 cubetes.
  Tratamiento 4 = Suelo sin tratamiento – 20 Semillas de frijol
inoculadas MONIBAC sembradas en bandeja de 20 cubetes

Después de la instalación del experimento se tomó atenta nota del

proceso germinativo, igualmente después de germinados los
tratamientos, se tomó información diaria durante 12 días en cada uno de
los tratamientos, obteniendo la información descrita en la tabla de
resultados.
RESULTADOS OBTENIDOS

Tabla de Observacion: Interaciones simbioticas entre plantas y microrganismos

Curso: Microbiologia de suelos
Lugar de Practica; CI Turipana Cerete - Cordoba

a Tratamiento 1 Tratamiento 2 Tratamiento 3 Tratamiento 4

ha ant
c l
Fe de p Altura Planta N° de Long. De Vigor Altura N° de Long. De Vigor Altura N° de Long. De Vigor Altura N° de Long. De Vigor
N° prom (Cm) Nodulos Raiz Planta Planta Nodulos Raiz Planta Planta Nodulos Raiz Planta Planta Nodulos Raiz Planta
16/4/18 1 11 0 13 0 1 11 0 11 0
17/4/18 2 13 0 13 0 1 12 0 12 0
18/4/18 3 14 0 13 0 1 13 3 13 5
19/4/18 4 14 0 14 0 1 13 8 14 3
20/4/18 5 14 0 14 0 1 13 4 14 10
21/4/18 6 15 4 16 2 1 13 10 15 8
22/4/18 7 15 2 5,0 1 16 2 5,0 1 14 7 4,5 1 15 12 5,0 1
23/4/18 8 15 1 4,5 1 16 0 4,5 1 14 13 5,0 1 16 4 6,0 1
24/4/18 9 16 0 5,0 1 17 0 5,0 1 16 10 4,0 1 17 22 6,5 1
25/4/18 10 16 0 5,5 1 17 0 6,0 1 16 21 6,0 2 17 6 6,0 1
26/4/18 11 17 0 6,0 1 19 0 6,5 1 18 31 6,5 1 20 8 7,5 2
27/4/18 12 18 0 6,5 1 23 0 5,5 1 18 6 7,0 3 21 23 7,0 1
Promedios 14,8 0,58 5,4 1,00 15,9 0,3 5,4 1,0 14,3 9,4 5,5 1,5 15,4 8,4 6,3 1,2

Tratamiento 1 = Suelo tratado - Semilla sin inocular Vigor 1 = Planta sana y color de hojas acorde con el estado vegetativo de la planta
Tratamiento 2 = Suelo tratado - Semilla Inoculada (MONIBACK) Vigor 2 = Planta con deficiencias aparentes manifestadas en el color de la hoja ( verde palido)
Tratamiento 3 = Suelo sin tratamiento - Semilla sin inocular Vigor 3= Planta con evidente atraso en su desrrollo ( tallo cortos y deviles y color amarillento de hojas)
Tratamiento 4 = Suelo sin tratamiento - Semilla inoculada Moniback)
DISCUSION DE RESULTADOS.

De manera general la germinación del frijol se dio el 5to día después de la

siembra en todos los tratamientos lo que indica ninguna incidencia de la
composición de los arreglos en el proceso de germinación.
Las observaciones y mediciones del material germinado se realizaron
durante 12 días, los datos promedios de longitud de plantas, numero de
nódulos, longitud de raíces y vigor (aspecto) se detallan en la siguiente
tabla.

Prom. alturas Prom. nódulos Prom. Long Prom. vigor

raiz
TTO.1 14,8 0,58 5,4 1,17
TTO.2 15,9 0,3 5,4 1,0
TTO.3 14,3 9,4 5.5 1,3
TTO.4 15,4 8,4 6,3 1,2

Tratamiento 1 (TTO1) = Suelo tratado - Semilla sin inocular

Tratamiento 2 (TTO2) = Suelo tratado - Semilla Inoculada (MONIBAC)
Tratamiento 3 (TTO3) = Suelo sin tratamiento - Semilla sin inocular

Tratamiento 4 (TTO4) = Suelo sin tratamiento - Semilla inoculada

(MONIBAC)

De acuerdo a la información obtenida los tratamientos 2 y 4 (Semilla

inoculada con Monibac) obtuvo mejores registros de alturas en plantas
de frijol, con promedios de 15,9 y 15,4 cm. respectivamente, Mientras
que los tratamientos sin inoculación el promedio fue de 14, 8 y 14,3 Cm,
o sea un 7% menor.
En estos tratamientos La modulaciones en raíces no guardan la misma
tendencia a pesar de haber sido inoculadas con el mismo producto y bajo
las mismas condiciones como se puede observar en la tabla, el Tto 2
(inoculado) registro promedios de 0,3 nódulos/planta, mientras que su
similar, el TTo 4 registro 8,4 nódulos/planta, esto indica que el proceso
de inoculación con moniback no condiciona la presencia de nodulaciones
en la especie frijol Caupí.
Por otra parte relacionando número de nódulos con la variable sustrato
encontramos que los tratamientos con suelo tratado, (TTo1 y TTo2)
registraron baja presencia de nódulos, (0,58 y 0,3 nod /planta), mientras
que los tratamientos con suelo sin tratar aumento considerablemente la
producción de nódulos, con registros promedios de 9,4 y 8,4 nod./planta,
Es decir un 94.2 % más modulaciones comparadas con los TTo. con
sustratos tratados.
La reducción drástica de la presencia de nódulos en los primeros
tratamientos puede estar influenciada por el proceso de esterilización al
que fue sometido el sustrato. para esto se utilizó el producto West
Terrasafe el cual es una solución líquida de 1,3 Diformilpropano al 25%,
con acción fungicida, bactericida y virucida para control de patógenos,
este producto actúa bloqueando los grupos amino, en las paredes
celulares de hongos, bacterias y virus, con los que hace contacto,
impidiendo los procesos de ósmosis en el micro-organismo, causando su
muerte por shock osmótico.. (Green Forest, s.f.)
Hipotéticamente podemos decir que el producto utilizado no discrimina
entre microorganismos benéficos y no benéficos lo que podría estar
incidiendo de manera directa en los resultados encontrados.
Las mediciones en raíces mostraron poca variación entre tratamientos,
solo el tratamiento 4 muestra una ligera diferencia respecto a los demás
tratamientos aunque no es posible asociar esta tendencia al efecto del
tratamiento debido que se requieren repeticiones que validen la
tendencia. Igualmente las deducciones realizadas sobre los hallazgos
anteriores requieren de mayor rigurosidad que le den soporte y
confiabilidad.
 CONCLUSION.

La importancia de algunos microrganismos es un tema amplio y de gran

interés para la comunidad académica y científica, comprender las distintas
interacciones de estos grupos microbianos con los sistemas naturales es
un gran paso de la ciencia en la búsqueda de alternativas productivas
sustentables económica y ambientalmente.
Las observaciones realizadas durante la actividad práctica, realizada en el
CI Turipaná. permite vislumbrar el desempeño de un grupo de bacterias
fijadoras de nitrógeno (Azotobacter chroococcum) asociadas a una
especie agrícola. los resultados presentados son generales y no generan
información concluyente, sin embargo permiten evidenciar el grado de
simbiosis (nodulacion) del microrganismo con la planta, bajo diferentes
ámbitos y condiciones, el estudio también permitió conocer las posibles
implicaciones de un agente desinfectante sobre la población microbiana
de un sustrato. Sería muy importante continuar con la investigación
incluyendo elementos procedimentales y estadísticos los cuales
aportarían solides y rigurosidad a la información generada.
REGISTRO FOTOGRAFICO.
Referencias
Asociación Vida Sana. (s.f.). Microorganismos del suelo y biofertilización.
Obtenido de
http://ec.europa.eu/environment/life/project/Projects/index.cfm?fuseact
ion=home.showFile&rep=file&fil=CROPS-FOR-BETTER-SOIL_formacion-
5.pdf

Cano, M. A. (2011). INTERACCIÓN DE MICROORGANISMOS BENÉFICOS EN

PLANTAS.

Green Forest. (s.f.). Obtenido de

https://greenforest.com.co/producto/desinfectante-de-suelos-west-
terrasafe/

López Pérez, J. y. (2016). Aspectos básicos de la fijación de nitrógeno

atmosférico por parte de bacterias.

Rusinque, M. C. (2010). Obtenido de

http://repository.unimilitar.edu.co/bitstream/10654/13760/2/Document
o%20tesis%20maestria%20Mauricio%20Camelo.pdf