Informe 2

UNIVERSIDAD NACIONAL DE INGENIERIA
FACULTAD DE INGENIERIA AMBIENTAL
CONCENTRACION DE MICROORGANISMOS
SEGUNDO LABORATORIO DEL CURSO DE MICROBIOLOGIA SANITARIA II –

SA324
ALEXANDER JULIO LOPEZ CASTROMONTE – 20151358F
DOCENTE: ING. JORGE GILBERTO TELLO CEBREROS
Lima, Perú
2017
Facultad de Ingeniería Ambiental
Índice
1. Resumen…………………………………………………………………………..…6
2. Introducción……………………………………………………………………….…7
3. Objetivos…………………………………………………………………………..…8
4. Marco teórico……………………………………………………………………..…9
4.1. Agua estancada……………………….……………………………………….9
4.1.1. Microorganismos comunes en agua estancada………..…..………9
4.2. Importancia de la concentración de microorganismos……....…….…..….13
4.3. Métodos de determinación…………………………………………………..13
4.3.1. Método de la celda de Sedgwick-Rafter……………………...……..13
4.3.2. Método de la franja……………………………………………………15
5. Resultados………………………………………………………………………….16
5.1. Resultados del microscopio 13 (Propio)………………………..………….16
5.2. Resultados del microscopio 15………………………………………….….18
5.3. Resultados del microscopio 4…………………………………………..…..19
5.4. Resultados del microscopio 6……………………………………………….19
5.5. Resultados del microscopio 22……………………………………….…….20
5.6. Resultados del microscopio 1……………………………………………….21
5.7. Resultados del microscopio 30…………………………………………..…22
5.8. Resultados del microscopio 2…………………………………………….…22
5.9. Resultados del microscopio 29……………………………………………..23
5.10. Resultados del microscopio 28…………………………………………..24
5.11. Resultados del microscopio 24……………………………………..……24
5.12. Resultados del microscopio 25…………………………………………..25
6. Discusión de resultados………………………………………………………..…26
2
7. Conclusiones……………………………………………………………………….27
8. Recomendaciones………………………………………………………………...29
9. Cuestionario……………………………………………………………………..…30
10. Fuentes de información……………………………………………………………38
11. Anexos………………………………………………………………………….…..39
12. Apéndice………………………………………………………………………..…..40
12.1. Cálculos desarrollados…………………..………...………………….……40
12.2. Limites permisible en el agua potable………………………………...…..44
12.3. Diagramas de flujo……………………………………………….………....45
3
Índice de tablas
Tabla 5.1: Objetivo de 10X………………………………………………………………16
Tabla 5.2: Objetivo de 43X…………………………………………….……………………16
Tabla 5.3: Objetivo de 10X ……………………………………………………………...….17
Tabla 5.4: Objetivo de 43X ……………………………………………………………..…..18
Tablas 5.5: Método de la celda Sedgwick-Rafter……………………………………...18
Tabla 5.6: Método de la celda Sedgwick-Rafter………………………………………..19
Tabla 5.7: Método de la franja………………………………………………………….…..19
Tabla 5.8: Método de la celda Sedgwick-Rafter………………………………………..19
Tabla 5.9: Método de la franja………………………………………………………….…..20
Tabla 5.10: Método de la celda Sedgwick-Rafter………………………………...……20
Tabla 5.11: Método de la franja………………………………………………………20
Tabla 5.12: Método de la celda Sedgwick-Rafter…………………………………..21
Tabla 5.13: Método de la franja…………………………………………………...….21
Tabla 5.15: Método de la franja…………………………………………………..…..22
Tabla 5.16: Método de la celda Sedgwick-Rafter………………………….....……22
Tabla 5.17: Método de la franja………………………………………………………23
Tabla 5.18: Método de la celda Sedgwick-Rafter………………………..…………23
Tabla 5.19: Método de la celda Sedgwick-Rafter……………………….………….24
Tabla 5.20: Método de la franja……………………………………………...……….24
Tabla 5.21: Método de la celda Sedgwick-Rafter…………………………….…….24
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Índice de figuras:
Figura 4.1: Vista de cianobacterias en microscopio………………..……………9
Figura 4.2: Células de Euglena……………………………………………...……10
Figura 4.3: Algas verdes filamentosas………………………………………..….11
Figura 4.4: Organismos de la clase Hydrozoa………………………………......12
Figura 4.5: Método de la celda…………………………………………………….14
Figura 4.6: Método de la franja……………………………………………………15
Figura 12.1: Limites permisible según DIGESA para el agua potable………..44
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1. Resumen
En el presente informe desarrollaremos los diversos aspectos del trabajo de
laboratorio realizado, sobre la importancia de la concentración de
microorganismos (algas), en la ingeniería sanitaria, abarcando los sistemas de
abastecimiento, tratamiento, etc., y en las fuentes de agua. Para determinar
esta concentración de algas, se conocen 2 métodos convencionales y
estándar; el método de la celda de Sedgwick y el método de la franja, el
docente dispuso la realización de ambos métodos por cada alumno, los
resultados nos darán una idea de la concentración existente en las muestras
evaluadas.
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2. Introducción
Las algas abarcan un grupo muy diverso de organismos, que al igual que las
plantas, habitan en diversos ambientes. El término alga se refiere
generalmente a una célula fotótrofa que contiene clorofila, tiene estructuras
reproductivas simple, y no posee raíz, tallos ni hojas. Las algas liberan
oxígeno por medio de la fotosíntesis. Se estima que cerca del 70-80% que
respiramos proviene del oxígeno liberado por ellas. Además de producir
oxígeno, las algas son fuente de alimento para peces y animales acuáticos,
formando el primer eslabón en la cadena alimenticia. Es por eso que en todos
los cuerpos de agua hay un nivel básico de algas que son parte del balance
ecológico. No obstante, el agua estancada causa problemas en la calidad del
agua. Cuando el agua está estática, hay altas temperaturas y alta
concentración de nitrato y fósforo, pueden surgir floraciones de algas.
Cuando un tipo específico de alga comienza a crecer exponencialmente

puede sofocar otros organismos que son importantes para el balance
ecológico. Esto da como resultado una reducción en la penetración de luz en
la columna de agua y un aumento en el nivel de pH, lo cual inhibe el
crecimiento de plantas y por lo tanto, del nivel de oxígeno disuelto en las
capas más profundas del cuerpo de agua. El balance ecológico se distorsiona
aún más a medida que las bacterias aerobias en el fondo comienzan a morir
y los nutrientes son absorbidos por las bacterias anaerobias, causando un
deterioro del agua y eventualmente la muerte masiva de peces y otros
organismos acuáticos.
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3. Objetivos
Conocer los métodos para determinar la concentración de microorganismos,

observar y determinar cuál de los dos métodos es el más preciso.
Determinar la concentración de microorganismos de una muestra de algas del

laboratorio por el método de la celda Sedgwick – Rafter y el método de la
franja.
Determinar el número de campos con el método de la celda Sedgwick – Rafter

y el método de la franja con objetivos de 10X y 43X.
Determinar el número promedio de microorganismos por campo por el método

de la celda Sedgwick – Rafter y el método de la franja.
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4. Marco Teórico
4.1. Agua Estancada
Se genera debido a que el agua puede quedar atrapada en la superficie del

suelo porque está saturado o porque es impermeable y no hay suficiente
desnivel para que escurra. Si existe un cantidad importante de materia orgánica
y nutrientes, los microorganismos crecerán hasta que se acabe todo el oxígeno
(disuelto en el agua) que necesitan para respirar.
Cuando esto ocurre, suelen predominar en el agua los microorganismos que

pueden vivir sin oxígeno y utilizan otras sustancias para respirar. El agua
estancada tiene entonces ese típico olor a "podrido", debido a sustancias como
sulfuros, metano e hidrógeno, que son producidas por los microorganismos al
respirar. Este fenómeno es muy importante en los humedales. Si bien la
cantidad de agua en estos sistemas es pequeña, se produce en ellos gases
que se dispersan a través de la atmósfera, como el metano y el óxido nitroso,
que tienen un papel muy importante en el aumento del efecto invernadero.
4.1.2. Microorganismos comunes en agua estancada
Bacterias
Las cianobacterias son microorganismos más comúnmente en el agua. El agua

de color azul-verde en un estanque o zanjas se debe a estos microorganismos.
Anabaena y Nostoc son cianobacterias que son comunes en el agua del
estanque. La espiroqueta es otro grupo de bacterias se encuentran
comúnmente en el agua del estanque.
Figura 4.1: Vista de cianobacterias en microscopio.
9
Protozoos
Los protozoos son eucariotas unicelulares que a diferencia de las procariotas

tienen un núcleo que contiene material genético. Sus células están obligados
también membrana orgánulos celulares. Euglena es un microorganismo en los
estanques que se mueve con la ayuda de los flagelos. Ameba forma otro grupo
de protozoos que se mueven con la ayuda de seudópodos o patas falsas.
Ciliados como el Paramecium, Ophrydium Vorticella y moverse en el agua con
la ayuda de su poco pelo como las estructuras llamadas cilios número.
Figura 4.2: Células de Euglena

Fuente: https://www.thoughtco.com/about-euglena-cells-4099133
Algas
Las algas son otro grupo diverso de plantas que pueden ser unicelulares o
pluricelulares, autótrofos, pero son en su mayoría es que hacen su propio
alimento a través del proceso de la fotosíntesis. Algunas de las algas comunes
que se encuentran en el agua del estanque se Chlamydomonas, Euglena y
espongomonas.
Mientras que Chlamydomonas es un flagelado freestyle spongomonas utilizar

sus flagelos de recogida de alimentos en lugar de moverse y vivir en una matriz
gelatinosa. Volvox es un alga que vive en colonias. Diatomeas, Spirogyra,
Oedogonium, Cladophora, y Porphyridium tipos Zygnema ciertas algas
filamentosas que son los microorganismos encontrados en el agua del grifo.
10
Las algas tienen la capacidad de modificar el pH, la alcalinidad, el color y la
turbiedad.
Las pequeñas algas verdes unicelulares son las más importantes para
mantener el nivel adecuado de oxígeno disuelto en los estanques de
estabilización.
Figura 4.3: Algas verdes filamentosas.

Fuente: http://slideplayer.com/slide/10681761/
11
Rotíferos
Los rotíferos son un tipo de micro-multicelulares animales que se encuentran

más frecuentemente en agua dulce, aunque algunas formas se adaptan a la
vida en las aguas saladas de los mares y océanos. Estos animales toman su
nombre del penacho de cilios está presente en la parte delantera del cuerpo
alrededor de la boca. Ellos utilizan sus cilios para impulsar a sí mismos y
también la comida directamente en la boca.
Sin embargo, todos dependen de los cilios de rotíferos para la locomoción. La

mayoría de las formas tienen libre los dos pies, como estructuras en su parte
trasera con la que se unen al sustrato mientras se alimenta. Alimentación de
rotíferos “incluye algas, bacterias y desechos de los peces muertos.
Hidra
La hidra es otro animal de agua dulce se encuentra con más frecuencia en el

agua del estanque. Este animal pertenece a la clase Hydrozoa cuyos miembros
viven principalmente en las aguas marinas. Hydra es un depredador que caza
sus presas con la ayuda de células especializadas urticantes llamadas
cnidocitos.
Estas células urticantes están presentes en los tentáculos que rodean la boca.
En el otro extremo del cuerpo tubular de la hidra es un disco basal o el pie, con
la que la hidra se une al sustrato.
Figura 4.4: Organismos de la clase Hydrozoa.

Fuente: http://mesosyn.com/animals3.html
12
4.2. Importancia de la concentración de microorganismos
El agua de buena calidad es de importancia fundamental a la fisiología humana

y la supervivencia del hombre depende en gran medida de su disponibilidad.
Antes de que pueda ser descrita como potable, tiene que cumplir con ciertas
características físicas, químicas y microbiológicas, los cuales están diseñados
para asegurar que el agua es aceptable.
Contando los microorganismos permite una estimación de la población

microbiana. Para la ingeniería sanitaria, ya que el conteo de estos permite
conocer si su presencia rebasa los límites permisibles, y el agua llega a tener
una sobre saturación de estos.
Algunos microorganismos pueden ser utilizados como indicadores en un

ambiente específico que ha sido contaminado. Estos deben pertenecer a
especies que representen fielmente las características del medio, deben ser
confiables y fácilmente identificables.
Los indicadores microbiológicos ideales deben reflejar no solamente la

presencia o ausencia de contaminación de un tipo específico, sino también los
niveles de dicha contaminación y sus fluctuaciones periódicas.
Las algas son habitantes comunes y normales de aguas poco profundas y se

encuentran en todo suministro de agua expuesto a la luz del sol, aunque
algunas algas se encuentran en el suelo y en superficies expuestas al aire.
Conocer el número y clase de algas presentes en estanques de aguas negras
es de gran utilidad para ver el avance del proceso de oxidación.
4.3. Métodos de determinación
4.3.1. Método de la celda de Sedgwick-Rafter
De acuerdo al propósito del estudio se selecciona el método a seguir. La

cámara (celda) del Sedgwick-Rafter es el dispositivo más comúnmente usado
para el recuento de plancton, de fácil manipulación y proporciona datos
razonables cuando se utiliza con un microscopio calibrado y equipado con un
micrómetro ocular de Whipple.
Un mililitro de la muestra alícuota es colocado en la cámara de Sedgwick-Rafter

(S-R). La cámara S-R mide 50 mm de longitud, 20 mm de ancho y 1 mm de
13
profundidad, el área total es de 1000 mm2 y el volumen es 1000 mm3. Es
necesario contar con un microscopio y un micrómetro ocular de Whipple, el cual
es un disco de vidrio que contiene un retículo grabado que divide el campo en
cien partes o cuadraditos iguales.
El valor en micras del área de cada uno de los cuadraditos varía según el ocular
y objetivo utilizado. Este valor debe ser medido para cada objetivo del
microscopio con un micrómetro de objetivo que es una lámina de vidrio que
contiene el centro una línea de 1 mm de longitud, dividida en 100 partes iguales
(10micras).
Espesor 1 mm
Volumen 1 ml
Ancho 20 mm
Largo 50 mm
Figura 4.5: Método de la celda.
Para calibrar el microscopio se coloca el micrómetro de objetivo sobre la platina

del microscopio y la cuadrícula de Whipple en el ocular, se hace la superposición
de ambos y de esta manera se puede medir el lado de uno de los cuadritos.
El área del cuadradito se obtiene multiplicando este valor por 100 y por lo tanto el
número de campos comprendidos en toda la cámara de Sedgwick-Rafter. El
recuento se realiza por campos y se cuentan las algas presentes en dial azar de
cada cuadrícula de Whipple. Una concentración de 10 a 100 organismos por
campo microscópico reduce el error del recuento.
14
4.3.2. Método de la franja
Muy parecido al método anterior, a diferencia que ya no se utiliza la celda

Sedgewick sino un portaobjeto con un cubre objeto. Para este método se coloca
una gota de cantidad de conocida con un gotero en la muestra y se tapa con el
cubreobjetos sin dejar la presencia de burbuja. Luego se procede a contar el
número de microorganismos por campo.
1 Gota
Figura 4.6: Método de la franja.
15
5. Resultados
5.1. Resultados del microscopio 13 (Propio).
5.1.1. Método de la celda Sedgwick-Rafter
Tabla 5.1: Objetivo de 10X
Nro. de Nro. de
Campo Microorganismos
1 70
2 53
3 45
4 42
5 81
6 73
7 30
8 36
9 51
10 60
11 71
12 73
13 55
14 43
15 83
Nro. de Campo Nro. de Microorganismos Nro. de Campo Nro. de Microorganismos

1 14 17 11
2 10 18 14
3 9 19 13
4 12 20 8
5 11 21 11
6 13 22 12
7 13 23 15
8 11 24 10
9 10 25 13
10 12 26 14
11 9 27 15
12 11 28 9
13 12 29 10
14 9 30 13
15 10 31 14
16 13 32 16
16
5.1.1.1. Concentración de microorganismos
Concentración de microorganismos (10X) = 32190 m.o/mL
Porcentaje de error = 4.56 %
5.1.2. Método de la franja
Nro. de Campo Nro. de Microorganismos

1 18
2 20
3 14
4 16
5 14
6 13
7 11
8 10
9 8
10 12
11 7
12 15
13 12
14 16
17
Nro. de Campos Nro. de Microorganismos Nro. de campo Nro. de Microorganismos

1 2 16 3
2 3 17 4
3 2 18 3
4 4 19 2
5 3 20 4
6 2 21 2
7 2 22 3
8 5 23 1
9 2 24 4
10 3 25 1
11 1 26 5
12 2 27 4
13 3 28 3
14 2 29 3
15 1 30 2
5.1.2.1. Concentración de microorganismos
Porcentaje de error = 5.96 %
5.2. Resultados del microscopio 15
Tabla 5.5: Método de la celda Sedgwick-Rafter
OBJETIVO 10X OBJETIVO 43X
N° de campos a lo ancho de LA CELDA 11 -
N° de campos a lo largo de la Celda 28 -
N° de campos en el total de la Celda 308 -
Suma total de microorganismos 308
Promedio de M.O. por campo 28 -
Concentración de M.O./ml 8624 -
18
N° de campos a lo ancho de LA CELDA 13 34
N° de campos a lo largo de la Celda 32.5 85
N° de campos en el total de la Celda 422.5 2890
Suma total de microorganismos 209 141
Promedio de M.O. por campo 16.08 4.15
Concentración de M.O./ml 7115.4 11993.5
Tabla 5.7: Método de la franja
OBJETIVO 10X OBJETIVO 43 X
N° de campos a lo largo del cubreobjetos 14 36
N° de campos en el total del cubreobjetos 196 1296
Volumen de la gota utilizada (ml) 0.0781 ml 0.0781 ml
N° de campos a lo largo de la Celda 30 82.5
N° de campos en el total de la Celda 360 2722.5
19
Suma total de microorganismos 669 -
Promedio de M.O. por campo 55.75 -
N° de campos a lo largo del cubreobjetos 12 -
N° de campos en el total del cubreobjetos 144 -
20
Volumen de la gota utilizada (ml) 0.0455 ml -
Concentración de M.O./ml 79383.56 -
N° de campos a lo largo de la Celda 30 75
N° de campos en el total de la Celda 360 2250
Promedio de M.O. por campo 70 14
Concentración de M.O./ml 25200 31500
Promedio de M.O. por campo 11 3
Volumen de la gota utilizada (ml) 0.06060 ml 0.06060
Concentración de M.O./ml 40837 62370
21
22
Concentración de M.O./ml 6061.57 29376
Concentración de M.O./ml 53784 241060.7
23
5.11. Resultados del microscopio 24.
24
5.12. Resultados del microscopio 25.
Tabla 5.23. Método de la celda Sedgwick-Rafter
25
6. Discusión de resultados
Los resultados son muy dispersos, sin embargo el número de campos

empleados por cada alumno son similares.
Se supone esta gran diversidad de resultados, debido a las interferencias,

como el tiempo de conteo sobretodo, que implica evaporación y pérdida de
microorganismos.
Para el método de la franja cabe destacar, que los goteros brindaban

volúmenes muy distintos, y se supone que a menor volumen o muestra, debe
haber una menor cantidad de microorganismos, con respecto a un mayor
volumen de muestra.
Varios alumnos no precisan sus resultados con el objetivo de 43X, deberían

indicar las dimensiones del espesor de sus celdas y la de las dimensiones
requeridas para poder observar con el objetivo de 43X.
26
7. Conclusiones
El método de la Celda Sedgwick Rafter se realizó con objetivos de 10 X y 43X

obteniéndose las siguientes concentraciones 32190 y 30720
microorganismos por 1 ml respectivamente.
El método de la franja se realizó con objetivos de 10 X y 43X obteniéndose

las siguientes concentraciones 60133 y 63720 microorganismos por 1 gota
equivalente a 0.0424 ml.
Cabe indicar que la realización del conteo para el microscopio 13 fue en dos
sesiones distintas.
Comparando el promedio de microorganismos obtenido con método de la

franja y con el método de la celda de S-R ambos con objetivo 10X, el primer
método posee menos microorganismos (13 m.o./campo) que el método de la
celda (58 m.o/campo).
Sin embargo, con el método de la franja se obtiene una mayor concentración

de microorganismos (60133 m.o/ml) que con el de la celda (32190 m.o/ml).
El conteo se realizó solo a aquellas algas notorias verdes, la presencia de

microrganismos oscuros no se contabilizaron ya que se trataba de algas
muertas, el resultado entre ambos objetivos varía, debido a la falta de
calibración y exactitud, así como que en ciertos campos estas algas estaban
acumuladas unas sobre otras.
Observamos que con el objetivo de 43X, se puede visualizar muchos más

campos que con el objetivo de 10X. Sin embargo en relación a la cantidad de
microrganismo / campo es inversamente ya que con el objetivo de 10X se
observa un promedio aproximado de 11 a 12 microorganismos / campo y con
el objetivo de 43 X se observa un promedio de 2 microorganismo / campo
aproximadamente.
Concluimos que la forma más rápida para el recuento de microorganismos es

la celda de Sedgwick Rafter además es la más precisa, de fácil manipulación
y proporciona datos razonables, a pesar que no se utilizó el micrómetro del
ocular de Whipple que es indispensable para este laboratorio.
27
Es importante para la ingeniería sanitaria conocer las concentraciones de
algas, ya que estas pueden obstruir los filtros de arena, producir sabores y
olores al agua y también pueden forman plancton en los reservorios de
sistemas de abastecimiento de agua entre otros, por eso es importante
conocerlas y saber en qué cantidades se encuentran.
28
8. Recomendaciones
Se recomienda que el conteo de microorganismos en cada celda sea lo más

rápido posible ya que la intensidad de luz de la lámpara del microscopio puede
hace que parte del líquido analizado se evapore.
Al agregar el líquido a la celda o al colocar el cubreobjetos sobre la gota de

agua debe evitar que se formen burbujas de aire que distorsionan la adecuada
determinación de la concentración de microorganismos.
El microscopio utilizado debe estar en buenas condiciones ya que se debe

observar nítidamente los microorganismos para poder contarlos. Sobre todo
cuando se realizara el desplazamiento de la celda pues no se cuenta con un
dispositivo que permita moverlo en dirección correcta, y se debe utilizar un buen
pulso del que maneja el microscopio.
Antes de agregar la muestra, esta se debe agitar, para homogenizar el líquido

y así obtener mejores resultados.
Para calcular el número de campos se debe tener mucho cuidado con las
tangentes y el punto de cambio a otro campo.
Sería recomendable realizar los dos métodos el de la franja y celda en un

mismo día, ayudaría a verificar cual es el mejor método y más preciso para la
toma de una muestra. Sin embargo esto no se pudo debido a la falta de tiempo
por lo que se realizó en dos sesiones.
Al momento de realizar el conteo de gotas para un volumen de 5ml o de 10 ml,

hacerlo con mucho cuidado, precisión y con el mismo gotero con el que se va
colocar la muestra en el portaobjeto, para así obtener un cálculo de volumen
de la gota aproximado a utilizar.
Se debe utilizar un mejor equipamiento, pues el realizar el conteo tomando las

tangentes, induce a mucho error, además no es lo conveniente para el método.
29
9. Cuestionario
9.1. ¿Cuál es la concentración de algas en la muestra de estanque de

arquitectura? Comparar con los demás grupos.
Teniendo en consideración la gran diversidad de resultados obtenidos, se

debe tener en cuenta a priori, el porcentaje de error, y se ha encontrado que
el microscopio 13 posee un error de apenas 5% para método de la celda y de
la franja por lo que podríamos concluir que la concentración de la muestra
utilizada por ese microscopio es ciertamente de aproximadamente 32190,
tomando como base al objetivo de 10X. Sin embargo hay que destacar que
este procedimiento está sujeto a muchas interferencias, errores y omisiones
que pueden generarse con el transcurso de la experiencia. Por ultimo recalcar
que la mayoría de alumnos obtuvo concentraciones que varían en el rango de
20000-40000 microorganismos por mililitro para un objetivo de 10X.
9.2. Señale las concentraciones de algas que crean problemas en los

sistemas de abastecimiento de agua.
Las algas difieren de los otros grupo de seres pequeños o microscópicos por
poseer sus pigmentos internos llamados clorofila, que a veces están ocultos
parcialmente o enmascarados por otros pigmentos, lo que las capacita en
presencia de la luz a combinar agua con anhídrido carbónico para formar
almidón o sustancias análogas y liberar oxígeno.
Las algas tiene la capacidad de modificar el pH, la alcalinidad, el color y la

turbiedad.
En el proceso de purificación natural, las algas oxigenan el agua y utilizan los

subproductos de los procesos de depuración. Las pequeñas algas verdes
unicelulares son las más importantes para mantener el nivel adecuado de
oxígeno disuelto en los estanques de estabilización.
La ingeniería sanitaria divide a las algas en cuatro grandes grupos: algas

verdeazules, algas verdes, flagelados pigmentados y diatomeas.
El crecimiento excesivo de cianobacterias (algas verde azules) y algas verdes

en un reservorio de agua traen consecuencias negativas para la calidad del
agua. Las toxinas de las cianobacterias no solo han causado muchas veces
mortandad de peces y animales domésticos, sino también son responsables
30
de causar enfermedades y dolencias en los seres humanos, inclusive se han
relacionado con casos de cáncer de hígado. Cuando las aguas superficiales
son usadas con fines de consumo humano, la presencia de cianobacterias
representa un riesgo para el abastecimiento de agua potable ya que las
toxinas y los metabolitos olorosos tienen la capacidad de disolverse en el agua
y escapar a los métodos convencionales de tratamiento de agua. Bajo esta
situación el agua adquiere un mal olor y sabor en el agua, y en el peor de los
casos, ponen en riesgo la salud de los consumidores.
9.3. Explicar los problemas que ocasionan los microorganismos en los

sistemas de abastecimiento de agua.
Sabor y olor del agua
El origen principal de los gustos y olores en las fuentes de agua proviene de

los desagües y desechos industriales. Los productos de la descomposición
bacteriana, sobre todo la anaerobia, tales como: metano, mercaptanos,
hidrogeno sulfurado, etc., se caracterizan siempre por el olor intenso que
producen. Además de ellos, son innumerables los subproductos aminicos y
ácidos grasos que tiene sabor propio característico. Las industrias de papel
arrojan desechos que siempre producen sabores y olores en el agua que son
difíciles de eliminar. Muchos de ellos son reducidos por la acción biológica de
los procesos de auto purificación de los cursos de agua. Los fenómenos
estacionales también pueden originar la intensificación cíclica del olor, sobre
todo después de un periodo de estiaje, cuando las lluvias caen nuevamente y
remueven la capa de lodo que se depositó durante el periodo de menor
corriente de agua.
Algas
Las algas constituyen uno de los más grandes importantes factores que
causan sabor y olor en las aguas de abastecimiento. De las investigaciones
llevadas a cabo por Maloney, con cultivo de algas del género Chlorococcum,
se pudo sacar las siguientes conclusiones:
a) La producción de olor es mucho más intensa cuando las algas en el

cultivo, después de pasar por una fase de multiplicación activa, entran en
una fase de declinación y comienzan a disminuir en número porque son
destruidas por un proceso de autolisis o ruptura “espontanea” de las
31
células con liberación de productos metabólicos (no se trata, en este caso,
de productos de descomposición orgánica).
b) La intensificación del olor con la disminución del pH, así como también
los experimentos realizados con la destilación al vacío o al vapor del
material extraído de las algas, confirman las conclusiones anteriores de
que el olor de las algas está relacionado con varios componentes
metabólicos, especialmente ácidos volátiles resultantes de la acidificación
de sales orgánicas.
Color y turbidez
Algas
Las algas interfieren en la floculación y coagulación, con la alteración del pH

que producen en el agua. Además las algas se depositan en gran número en
los sedimentos produciendo un aumento en el lodo sedimentado.
Mediante el proceso de fotosíntesis las algas toman el CO2 del medio,

provocando la precipitación de carbonatos. Esto trae como consecuencia la
elevación del pH del agua hasta alcanzar valores elevados (10,0), como es el
caso de las aguas donde ocurre el fenómeno de floración.
Por otro lado en las noches, la ausencia de luz y la suspensión de la actividad

fotosintetizante pasa a predominar la reacción contraria de la respiración, con
el consiguiente aumento del CO2 y disminución del pH.
Esas oscilaciones en el pH ocasionan dificultades en las estaciones de

tratamiento. Un número elevado de algas inducen a la formación de flocs.
Las algas se acumulan en los filtros, el lecho filtrante, expuesto a la luz solar,
permite el desarrollo de estas, ocasionando una capa biológica viva que
recibe la denominación de “Schmutzdecke”. Esta capa biológica también
puede formarse por la asociación de otros tipos de microorganismos, como
sucede cuando los filtros están cubiertos, en cuyo caso pasan a predominar
los hongos y bacterias de vida libre.
Floración de las algas, fijación en las paredes de los reservorios y corrosión

son también problemas de consideración causados por las algas.
32
9.4. Señale los controle preventivos y correctivos que se deben realizar a los
microorganismos: bacterias, algas protozoarios y virus.
Medidas sanitarias preventivas pueden ser adoptadas en el sentido de

proteger las fuentes contra la polución. Tales medidas deben ir desde la
fiscalización contra el lanzamiento “in natura” de los desagües domésticos
hasta medidas que impidan la infiltración de dicho material cuando procede
de fosas negras, lo que puede saturar en una extensión grande el suelo
adyacente a una fuente, con agua polucionada. El estudio de una fuente,
como probable abastecimiento de agua, debe estar siempre precedido de un
levantamiento sanitario que incluya, además del recuento de coliformes y
otras determinaciones biológicas y químicas que determinan la calidad del
agua, algunas respecto a las: características del suelo que rodea a la fuente,
como probable, anotándose las áreas de drenaje cultivadas.
Los procesos de naturaleza física y química que se llevan a cabo en un curso

de agua y que son responsables del fenómeno de la autopurificacion actúan
también sobre los organismos patógenos, destruyéndoles en gran proporción.
Esos procesos son principalmente:
Sedimentación
Antagonismo entre diferentes microorganismos
Luz
Temperatura
Oxidación
Para las algas serian:
Anhídrido carbónico
Sales minerales
Luz
Las medidas correctivas en cuanto concierne a bacterias, virus y algas se

limitan a la desinfección de las aguas por cloración u otros desinfectantes
como sulfato de cobre, yodo, ozono, etc.
33
9.5. Explique el problema que ocasionan las algas cianobacterias en zonas
de recreación.
En aguas dulces, el término "algas" se usa para organismos microscópicos

muy pequeños, en principio organismos unicelulares, algunos de los cuales
forman colonias y así, alcanzan tamaños visibles a simple vista como
partículas verdes diminutas. Estos microorganismos generalmente se
dispersan finamente en todo el agua y pueden causar una considerable
turbiedad si alcanzan densidades altas. Las "cianobacterias" son organismos
con ciertos rasgos de bacterias y algunos de algas. Son similares a las algas
en tamaño pero a diferencia de otras bacterias, contienen pigmentos verde-
azulados o verdes y por lo tanto, realizan la fotosíntesis. Por ello, también se
denominan "algas verde-azuladas". En contraposición a la mayoría de algas,
muchas especies de cianobacterias pueden acumularse para formar natas en
la superficie, a menudo denominadas "afloramientos", con una densidad
celular sumamente alta. Los casos conspicuos de intoxicación pecuaria han
conducido al estudio de la toxicidad cianobacteriana, y durante las últimas 2
a 3 décadas, se ha identificado la estructura química de varias toxinas
cianobacterianas (“cianotoxinas”) y se han establecido sus mecanismos de
toxicidad. Por contraste, apenas se han investigado los metabolitos tóxicos de
las algas de agua dulce, pero se ha mostrado la toxicidad para especies de
agua dulce de Dynophyceae y Prymnesiophyceae (véase el punto 2.2).
Debido a que las especies marinas de estos géneros a menudo contienen
toxinas, en verdad es razonable esperar especies tóxicas entre estos grupos
incluso en las aguas dulces. Al comparar la causa relativa de la inquietud que
surge en caso de cianobacterias tóxicas con aquella que surge de algas de
agua dulce potencialmente tóxicas, los mecanismos de concentraciones de
células son un factor clave. Si bien muchas especies de algas de agua dulce
también pueden proliferar intensivamente en aguas eutróficas (o sea,
“excesivamente fertilizadas”), no forman natas superficiales densas como las
cianobacterias, y en consecuencia, las toxinas que pudieran contener no se
acumulan a concentraciones tales que puedan convertirse en peligrosas para
salud humana o del ganado. En contraposición a las cianobacterias, las algas
de agua dulce no han sido implicadas en casos de envenenamiento de
ganado o intoxicación de la fauna silvestre. Por estas razones, esta
contribución se centrará en gran parte en los riesgos para salud debidos a
34
cianobacterias en aguas dulces destinadas a la recreación. Se incluirá
información sobre los efectos para la salud de las algas de agua dulce.
Algunas especies de cianobacterias también proliferan en aguas costeras
salobres, en particular en condiciones tranquilas. Nodularia spumigena es el
más generalizado de estos organismos, contiene toxinas y puede formar
natas superficiales. Las aguas salobres también alojan algas tóxicas tales
como Prymnesium.
Las toxinas de algas y cianobacterias son sustancias naturales, pero la

actividad humana ha conducido a la fertilización excesiva ("eutroficación") de
muchos cuerpos de agua, especialmente durante las tres últimas décadas.
Esto a su vez causa la proliferación anormal de algas y cianobacterias (en
agua dulce) y por lo tanto tiene un impacto considerable sobre la calidad del
agua recreacional. En climas templados el predominio de cianobacterias es
sumamente pronunciado durante los meses de verano, cuando la demanda
de aguas recreacionales es más alta. En algunas regiones, las cianobacterias
han sido abundantes por más de una generación. Mientras que anteriormente,
con frecuencia la idea común era no nadar "donde el agua afloraba"; los
usuarios (debido a la falta de opciones) ahora han aceptado esta calidad de
agua como “normal” para su región. Se han reportado múltiples anécdotas de
niños jugando con las natas. Por lo tanto, la eutroficación junto con una falta
de conciencia por parte de la población puede conducir a riesgos para la salud
causados por cianotoxinas. Las toxinas cianobacterianas en el agua dulce
fueron consideradas un tema de interés sólo recientemente, ya que nuestro
conocimiento sobre su presencia y distribución ha estado fuertemente limitado
por la falta de métodos adecuados para la detección y vigilancia. Desde los
años sesenta hasta finales de los años ochenta, la detección se realizó
principalmente con un bioensayo con ratones para evaluar la seguridad de los
abastecimientos de agua potable. Debido al costo elevado (así como
limitaciones éticas de aplicabilidad), este método no es apropiado para
grandes programas de monitoreo rutinario o tipo sondeo. Sin embargo, ahora
existen métodos efectivos de análisis químico para las toxinas conocidas, y
los ensayos immunológicos sensibles así como los ensayos con enzimas se
han vuelto comercialmente disponibles para los más importantes (por
ejemplo, microcistinas y saxitoxina, véase a continuación). Estas brindan
nuevas posibilidades para programas de sondeo orientados hacia la
35
evaluación del riesgo potencial así como hacia la vigilancia regular. Los
programas de sondeo recientes y en curso en varios países muestran que las
concentraciones de toxina cianobacteriana en las aguas recreacionales y
potables se aproximan más a los niveles de inquietud que algunos de los
productos químicos industriales y antropogénicos que actualmente son el
centro de la atención pública y son tratados por la legislación.
9.6. Explique los problemas que ocasiona el crecimiento de plantas acuáticas

y algas en lagos ¿Cómo se soluciona?
Plantas acuáticas superiores
Un problema que con frecuencia surge del desarrollo de plantas ornamentales

terrestres en las proximidades de las residencias es el de la penetración de
las raíces en los tubos de conducción de desagües. Se puede solucionar esta
dificultad, mediante la aplicación periódica de sulfato de cobre en los inodoros
o en los buzones de inspección teniendo siempre el cuidado de no aplicar en
dosis superiores a 2 kg por metro cubico de agua servida, en los casos de
residencias cuyos desechos son tratados en tanques sépticos.
La vegetación acuática superior todavía se puede combatir por medio de los

peces, especialmente lo del genero Tilapia. En el Brasil, existe la especie
Tilapia melanopleura, importada hace algunos años del Congo Belga, que ha
dado excelentes resultados en el control de la vegetación superior en los lagos
y lagunas donde estos vegetales constituyen un problema. Estos peces no se
desarrollan en aguas corrientes o en climas fríos. Además de ser peces muy
voraces, se reproducen con gran facilidad en los ambientes favorables y
ofrecen una carne muy sabrosa, siendo doblemente ventajosa su
implantación en los lagos donde la vegetación superior, ya sea sumergida o
emergente, constituyen un problema sanitario o de cualquier naturaleza. Pero
no son eficientes en el control de la totora.
Algas
Han sido muchos los casos de floraciones masivas de algas en el mundo, y

es evidente es que el número de floraciones se eleva año con año. El
crecimiento excesivo de cianobacterias (algas verde-azules) y algas verdes
en los reservorios de agua pueden puede traer consecuencias negativas para
la calidad del agua. El agua se vuelve verde, los filtros de arena se tapan, y
36
algunas algas pueden producir geosminas y MIB (Metilisoborneol) que dan un
sabor terroso al agua, lo que puede resultar en quejas de clientes. Además,
las cianobacterias pueden llegar a producir toxinas que causan enfermedades
graves en los seres humanos que consuman el agua. Es por eso que las
floraciones de algas se evitan, y se desea el control. Conocer los factores que
contribuyen al crecimiento de algas, y sus opciones de control le ayudará a
mantener el equilibro en los cuerpos de agua.
La presencia de cianobacterias es un problema grave y global. Los métodos

convencionales para controlar las floraciones de algas en lagos y embalses
de gran tamaño presentan sus ventajas y desventajas. Algunos métodos
puedan ser nocivos para el medio ambiente como los alguicidas, mientras que
otros llegan a ser muy costosos, como en la aireación. La siguiente sección
explica el nuevo concepto de combinación de monitoreo en tiempo real de la
calidad del agua, un software basado en la web, y el ultrasonido para
monitorear, predecir y controlar floraciones de algas en grandes cuerpos de
agua superficial.
Para tratar y controlar el crecimiento de algas comúnmente se utilizan 4

métodos:
a) Químicos
b) Aireación
c) Mezcladores
d) Ultrasonido
37
10. Fuentes de información
Branco M. Samuel, Hidrobiología aplicada a la ingeniería sanitaria, Lima, Perú,

1969, cap. 3 y 4.
http://www.cofes.org.ar/descargas/relas/5_jornada/6_Algas_vs_Potab.pdf
(Visualizado el 22/10/2017)
http://www.bvsde.paho.org/bvsacd/scan/013761/013761-07.pdf (Visualizado
el 22/10/2017)
http://pmadesinaloa.com.mx/detalle.php?id=46 (Visualizado el 23/10/2017)
https://ep00.epimg.net/descargables/2012/07/24/e47e72254b2bdd44e9b0dc7
b1574ef56.pdf (Visualizado el 23/10/2017)
https://www.edu.xunta.gal/centros/cpiasrevoltas/aulavirtual2/pluginfile.php/23
3/mod_resource/content/0/ecosistemas/microorganismos_auga.pdf
http://www.bvsde.paho.org/bvsacg/fulltext/inspecciones/lec6.pdf (Visualizado
el 24/10/2017)
https://www.aulados.net/Botanica/Curso_Botanica/Algas/4_Algas_texto.pdf
38
11. Anexos
39
12. Apéndice
12.1. Cálculos desarrollados
12.1.1. Método de la celda de Sedgwick-Rafter (Objetivo 10X)
a) Determinación del número de campos a lo largo de la celda
15 campos ------------- 20 mm
Nro. de campos a lo largo ------------- 50 mm
 Hay 37 campos a los largo de la celda.
b) Determinación del número promedio de microorganismos.
Suma total de microorganismos = 866
Numero de campos en el ancho = 15
 X = 866/15 = 57.73 = 58
c) Determinación del número de campo totales en la celda
 Campos totales = (15)(37) = 555 campos
d) Determinación de la concentración de microorganismos
X̅ . N 0 de campos en toda la celda

Concentración de m. o =
ml
58 x 555 𝑚. 𝑜
Concentración de m. o = = 32190
1 ml 𝑚𝐿
12.1.2. Método de la celda de Sedgwick-Rafter (Objetivo 43X)
a) Determinación del número de campos a lo largo de la celda
32 campos ------------- 20 mm
Nro. de campos a lo largo ------------- 50 mm
 Hay 80 campos a los largo de la celda.
40
Numero de campos en el ancho = 32
 X = 377/32 = 11.78 = 12
c) Determinación del número de campo totales en la celda
 Campos totales = (32)(80) = 2560 campos
X̅ . N 0 de campos en toda la celda

Concentración de m. o =
ml
12 x 2560 𝑚. 𝑜
Concentración de m. o = = 30720
1 ml 𝑚𝐿
Hallando el error:
objetivo (10X) − objetivo(43X)

%Error = | | x 100%
objetivo (10 X)
32190 − 30720
%Error = | | x 100% = 4.56%
32190
12.1.3. Método de la franja (Objetivo de 10X)
a) Determinación del número de campos en todo el cubreobjetos.
Campos en un lado = 14
Total 𝑁 0 de Campos = 14 ∗ 14 = 196 𝐶𝑎𝑚𝑝𝑜𝑠
Numero de campos por lado = 14
41
186 𝑚. 𝑜
𝑥̅ = = 13.28 = 13
14 𝑐𝑎𝑚𝑝𝑜
c) Determinación del volumen de una gota.
118 gotas ------------- 5 mL

1 gota ------------- X mL
 X = 0.0424 mL
X̅ . N 0 de campos en todo el cubreobjeto N 0 de gotas

Concentración de m. o = x
gota volumen (ml)
13 x 196 118 gotas 𝑚. 𝑜

Concentración de m. o = x = 60133
gota 5 (ml) 𝑚𝐿
12.1.4. Método de la franja (Objetivo de 43X)
a) Determinación del número de campos en todo el cubreobjetos.
Campos en un lado = 30
Total 𝑁 0 de Campos = 30 ∗ 30 = 900 𝐶𝑎𝑚𝑝𝑜𝑠
Numero de campos por lado = 30
81 𝑚. 𝑜
𝑥̅ = = 2.7 = 3
30 𝑐𝑎𝑚𝑝𝑜
42
c) Determinación del volumen de una gota.
118 gotas ------------- 5 mL

1 gota ------------- X mL
 X = 0.0424 mL
X̅ . N 0 de campos en todo el cubreobjeto N 0 de gotas

Concentración de m. o = x
gota volumen (ml)
3 x 900 118 gotas 𝑚. 𝑜

Concentración de m. o = x = 63720
gota 5 (ml) 𝑚𝐿
43
12.2. Limites permisible en el agua potable.
Figura 12.1: Limites permisible según DIGESA para el agua potable.
44
12.3. Diagramas de flujo
Método de la celda Sedgwick-Rafter
Colocar con la pipeta 1ml

de muestra en la celda y
cerrar con cuidado.
Colocar la celda en la platina.
Realizar el conteo de campos y

los microorganismos tomando
las tangentes.
Debe realizar el conteo rápido

por las interferencias ya
conocidas.
Con los datos del

ANCHO, procederemos a
calcular la concentración.
45
Medición de la franja
Se contabiliza el número de
gotas contenidas en 5 mL.
Se coloca 1 gota sobre el

portaobjetos y se coloca el
cubreobjetos.
El cubreobjetos debe tener

una línea divisoria que
ayude el conteo rápido.
Contar rápidamente para

evitar las interferencias
conocidas.
Anotar los resultados:

número de campos y
número de
microorganismos.
46

Informe 2

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UNIVERSIDAD NACIONAL DE INGENIERIA

FACULTAD DE INGENIERIA AMBIENTAL

SEGUNDO LABORATORIO DEL CURSO DE MICROBIOLOGIA SANITARIA II –

ALEXANDER JULIO LOPEZ CASTROMONTE – 20151358F

DOCENTE: ING. JORGE GILBERTO TELLO CEBREROS

4.1. Agua estancada……………………….……………………………………….9

4.1.1. Microorganismos comunes en agua estancada………..…..………9

4.2. Importancia de la concentración de microorganismos……....…….…..….13

4.3. Métodos de determinación…………………………………………………..13

4.3.1. Método de la celda de Sedgwick-Rafter……………………...……..13

4.3.2. Método de la franja……………………………………………………15

5.1. Resultados del microscopio 13 (Propio)………………………..………….16

5.2. Resultados del microscopio 15………………………………………….….18

5.3. Resultados del microscopio 4…………………………………………..…..19

5.4. Resultados del microscopio 6……………………………………………….19

5.5. Resultados del microscopio 22……………………………………….…….20

5.6. Resultados del microscopio 1……………………………………………….21

5.7. Resultados del microscopio 30…………………………………………..…22

5.8. Resultados del microscopio 2…………………………………………….…22

5.9. Resultados del microscopio 29……………………………………………..23

5.10. Resultados del microscopio 28…………………………………………..24

5.11. Resultados del microscopio 24……………………………………..……24

5.12. Resultados del microscopio 25…………………………………………..25

10. Fuentes de información……………………………………………………………38

12.1. Cálculos desarrollados…………………..………...………………….……40

12.2. Limites permisible en el agua potable………………………………...…..44

12.3. Diagramas de flujo……………………………………………….………....45

Tabla 5.1: Objetivo de 10X………………………………………………………………16

Tabla 5.2: Objetivo de 43X…………………………………………….……………………16

Tabla 5.3: Objetivo de 10X ……………………………………………………………...….17

Tabla 5.4: Objetivo de 43X ……………………………………………………………..…..18

Tablas 5.5: Método de la celda Sedgwick-Rafter……………………………………...18

Tabla 5.6: Método de la celda Sedgwick-Rafter………………………………………..19

Tabla 5.7: Método de la franja………………………………………………………….…..19

Tabla 5.8: Método de la celda Sedgwick-Rafter………………………………………..19

Tabla 5.9: Método de la franja………………………………………………………….…..20

Tabla 5.10: Método de la celda Sedgwick-Rafter………………………………...……20

Tabla 5.11: Método de la franja………………………………………………………20

Tabla 5.12: Método de la celda Sedgwick-Rafter…………………………………..21

Tabla 5.13: Método de la franja…………………………………………………...….21

Tabla 5.14: Método de la celda Sedgwick-Rafter…………………………………..22

Tabla 5.15: Método de la franja…………………………………………………..…..22

Tabla 5.16: Método de la celda Sedgwick-Rafter………………………….....……22

Tabla 5.17: Método de la franja………………………………………………………23

Tabla 5.18: Método de la celda Sedgwick-Rafter………………………..…………23

Tabla 5.19: Método de la celda Sedgwick-Rafter……………………….………….24

Tabla 5.20: Método de la franja……………………………………………...……….24

Tabla 5.21: Método de la celda Sedgwick-Rafter…………………………….…….24

Tabla 5.22: Método de la celda Sedgwick-Rafter…………………………………..25

Tabla 5.23: Método de la celda Sedgwick-Rafter…………………………………..25

Figura 4.1: Vista de cianobacterias en microscopio………………..……………9

Figura 4.2: Células de Euglena……………………………………………...……10

Figura 4.3: Algas verdes filamentosas………………………………………..….11

Figura 4.4: Organismos de la clase Hydrozoa………………………………......12

Figura 4.5: Método de la celda…………………………………………………….14

Figura 4.6: Método de la franja……………………………………………………15

Figura 12.1: Limites permisible según DIGESA para el agua potable………..44

Cuando un tipo específico de alga comienza a crecer exponencialmente

Conocer los métodos para determinar la concentración de microorganismos,

Determinar la concentración de microorganismos de una muestra de algas del

Determinar el número de campos con el método de la celda Sedgwick – Rafter

Determinar el número promedio de microorganismos por campo por el método

4.1. Agua Estancada