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I. INTRODUCCIÓN
Además las bacterias pueden ser divididas en autótrofas y heterótrofos. Las primeras
comprenden las bacterias del suelo y el agua que obtienen carbono y nitrógeno de la
atmósfera y de la materia inorgánica simple. Las bacterias heterótrofas requieren
compuestos orgánicos más complejos como fuente de carbono y nitrógeno, así como
proteínas o sus derivados, también requieren carbohidratos y grasas. Este último
grupo de organismos es el más importante en bacteriología médica.
II. OBJETIVOS
I. POR SU CONSISTENCIA:
1. Medios Líquidos o Caldos: Son aquellos que contienen, disueltos en agua, los
nutrientes necesarios para el crecimiento de los microorganismos.
3. Medios Semisólidos: Son similares a los medios sólidos, pero la concentración del
agente solidificante es menor, generalmente del 0,4% con lo que, una vez solidificados
mantienen una consistencia gelatinosa. Se utilizan, por ejemplo, para determinar la
movilidad de los microorganismos.
2. Medios definidos: Son aquellos que contienen los distintos nutrientes en forma de
productos químicos puros (pero no extra puros) y en concentraciones conocidas. Así,
un medio definido que permita el desarrollo de un microorganismo heterótrofo y "poco
exigente", como E. coli, debería contener sales inorgánicas y fuentes de carbono y
nitrógeno: MgSO4, KPO4H2, Na2PO4H, glucosa y NH4Cl. Otros elementos esenciales,
como hierro, manganeso y cobre, se encuentran generalmente presentes como
contaminantes de los productos químicos antes citados, en cantidades suficientes para
el crecimiento.
Muchos medios de cultivo utilizados en el laboratorio son medios generales en los que
se pueden desarrollar una gran variedad de microorganismos con distintos
requerimientos nutricionales. Sin embargo, en algunas ocasiones, es necesario aislar
a partir de una muestra un microorganismo que se encuentre en un bajo número y que
pueda ser enmascarado por otros microorganismos presentes en un número más
elevado. En esos casos es recomendable utilizar medios de cultivo que ayuden a
separar y diferenciar dichos microorganismos o que, de forma selectiva, favorezcan el
crecimiento de alguno de ellos. Estos medios pueden ser:
De la misma manera, la bilis y sales biliares convierten los medios de cultivo a los que
se añaden en selectivos para Salmonella ya que, además de inhibir a los
microorganismos Gram positivos, en concentraciones elevadas inhiben también a
bacterias Gram negativas fermentadoras de lactosa. Los colorantes, como el verde
brillante, inhiben selectivamente las bacterias Gram positivas, siendo también inhibidor
para la mayoría de las bacterias intestinales excepto para Salmonella.
Este colorante es la base del medio Agar Verde Brillante, utilizado para el aislamiento
de Salmonella a partir de muestras fecales. Los medios selectivos pueden serlo
también por su pH, así el Agar glucosado de Sabouraud ajustado a pH 5,6, se usa
para el aislamiento de hongos, que a ese pH crecen mejor que las bacterias.
IV. PROCEDIMIENTO
1. Sembrar un cultivo puro diferente en cada uno de los dos tubos con caldo Nutritivo y
en tubos con agar nutritivo inclinado.
2. Sembrar con el asa extendida los mismos cultivos puros en otros dos tubos con
agar nutritivo solidificado en forma recta (Figura 5)
1. Dividir en tres partes, una caja de Petri con EMB Agar, otra con Agar 110 y una de
MM. Sembrar en cada parte un cultivo puro diferente por estría simple.
2. En otra serie de tres cajas con cada uno de los medios antes descritos, sembrar por
estría cruzada la muestra problema.
Condiciones de incubación
1. Incubar las cajas en forma invertida a 37°C durante 24 horas. De las cajas
inoculadas por estría cruzada, seleccionar la colonia más aislada (generalmente del
cuarto cuadrante). Transferir una pequeña muestra de esta colonia a tubos inclinados
con agar nutritivo.
2. Incubar los tubos a 37°C durante 24-48 horas. Observar la aparición de colonias y
reportar la forma en que se distribuyen a lo largo del tubo.
V. CONCLUSIONES
VI. CUESTIONARIO
pH 6.5
pH 7.5 ± 0.2
pH 7.4 ± 0.2
pH 7.2 ± 0.2
pH 7.0 ± 0.2
pH 7.1 ± 0.2
pH 8.6
pH 7.2
pH 7.3 ± 0.2
pH 7.0 ± 0.2
VII. BIBLIOGRAFIA
o VILCHEZ UCEDA, Víctor. Manual de Practicas de Microbiología. p.32-38
o PEREZ CHABELA, María. Manual de Practicas del Laboratorio de
Microbiologia General. P 37-40