Bioquímica – Enfermería

Ejercicios Enzimas

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Enzimas
Temario
1. Enzimas y su función biológica
2. Cinética enzimática
3. Factores que afectan y regulan la actividad enzimática
4. Inhibidores enzimáticos

Objetivos
Identificar y analizar las principales características de las enzimas.
Identificar los parámetros cinéticos involucrados en las velocidades de
reacciones enzimáticas.
Reconocer los factores externos que afectan la velocidad de reacción enzimática.
Reconocer los inhibidores enzimáticos e identificar las variaciones de los
parámetros cinéticos que se ven afectados por dichos inhibidores.

1. Con respecto a las enzimas.

a) Defina lo que es una enzima y explique al menos 3 de sus características.

b) Como se define el sitio activo de una enzima, refiérase a la especificidad de la enzima

c) Cuáles son las variables que afectan la velocidad enzimática. Construya unos gráficos para
demostrar el efecto de T° y PH.

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2. Las prostaglandinas (PPG2) son responsables de respuestas inflamatorias en el

organismo, son sintetizadas a partir de ácido araquidónico en una reacción catalizada por la
enzima Ciclooxigenasa, esta enzima usa oxígeno para transformar el ácido araquidónico a PPG2.
Los datos cinéticos correspondientes a la formación de PPG2 enzimáticamente se expresan en la
siguiente tabla:

[S] Acido Razón de Razón de formación de

araquidonico formación de PPG2 PPG2 con 2mg/ml de
(mM) (mM/min) Ibuprofeno (mM/min)
0.5 19.5 12.67
1.0 22.1 19.01
1.5 36.9 24.45
2.5 43.9 35.04
3.5 44.0 38.00
4.0 44.0 38.01

a) Considerando las dos primeras columnas determine Km y Vmax. Justifique

b) El Ibuprofeno es un compuesto inhibidor de la ciclooxigenasa por lo tanto inhibe la síntesis de

PPG2 reduciendo así la inflamación a los tejidos. De acuerdo a la segunda y tercera columna
determine el tipo de inhibición que ejerce el Ibuprofeno sobre la enzima. Justifique su respuesta

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3. La penicilina es hidrolizada y con ello inactivada por la penicilinasa, un enzima

presente en algunas bacterias resistentes a este antibiótico. Supóngase que la
concentración de la enzima no cambia apreciablemente durante el ensayo.
A partir de los datos de los siguientes datos:

[Penicilina] Velocidad de la reacción

(moles/min)

0,1x10-6 1.1x 10-10

0,3 x10-6 2.5x 10-10
0,5 x10-6 3.0x 10-10
1,0 x10-6 4.5x10-10
3,0.x10-6 5.8x 10-10
5,0 x10-6 6.1x10-10
7.0 x10-6 6.1x10-10

a) ¿Esta enzima sigue la cinética de Michalis-Mentem? Si es así, Determine el valor de Km y

explique a que corresponde este parámetro

b) ¿Cuál es el valor de Vmax? ¿Qué significado tiene este valor?

c) ¿Cuál sería el efecto de un inhibidor competitivo y uno no competitivo? Explíquelo en

función de cómo variarían los parámetros cinéticos anteriores

d) Realice una estimación gráfica de cómo cambiaría la velocidad de la reacción de hidrólisis

de la penicilina, si aumenta la concentración de enzima disponible.

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e) De acuerdo a la siguiente representación del sitio activo de la enzima penicilinasa y la

estructura del sustrato, la penicilina:

¿A qué tipo de aminoácidos corresponden los residuos que se representan como R1, R2, R3 y R4?
De un ejemplo para cada uno de los casos.

R1:

R2:

R3:

R4:

f) Las siguientes moléculas son inhibidores de esta enzima, por lo tanto en función de la
estructura de cada una de ellas, prediga que tipo de inhibición produce, competitiva o no
competitiva. Explique