CUANTIFICACIÓN EXPERIMENTAL DE PROTEÍNAS Y AZÚCARES

REDUCTORES

Maria Paula Hernandez1, Laura Rendon Hernandez2

Universidad Icesi
Facultad de Ingeniería
Departamento de Ingeniería Bioquímica
Laboratorio de Biocatálisis
Santiago de Cali, Colombia
Septiembre 15 de 2018
26mariapaula@gmail.com1 , rendonlaura904@gmail.com2

1. Introducción Cuantificar estas proteínas y todas en

Las proteínas desempeñan un papel vital en
los seres vivos ya que ,construyen las células
vivas y son las biomoléculas más versátiles
y diversas, esto se debe principalmente a su
composición, la cual se constituye
escensialmente de carbono, hidrógeno,
oxígeno y nitrógeno (algunas presentan otro
tipo de elementos) (Olmo & Nave), los
aminoácidos son los encargados de formar
estos prótidos, y, se unen mediante enlaces
péptidos.
general es muy importante en el ámbito
ingenieril ya que hace mas acessible su
investigación, por esto se utilizo el método
de Bradford en esta practica con el fin de
realizar el conteo de las enzimas
menzionadas anteriormente, este
procedimiento se basa en que el colorante
Coomassie brilliant blue (figura 1 ) cambia
de color cuando entra en contacto con
proteínas a diferentes concentraciones

Durante esta praxis se empleo la proteína

albumina la cual es un protido vegetal y
animal que se encuentra principalmente en
el plasma sanguíneo, se puede encontrar en
fases liquidas y solidas (polvo), en el primer
estado mencionado presenta aplicaciones
industriales como clarificante, también se
utilizo la enzima proteasa la cual se clasifica
como hidrolasa (clase 3 según la UIBBM)
porque es la encargada de romper los
enzales peptídicos de las proteínas, esta
enzima se encuentra en todos los
organismos y es muy importante para
funciones metabólicas, una de sus
aplicaciones mas destacadas en la industria
es en los detergentes, como también es
empleada con fines médicos, su precio varia
dependiendo de la localidad en la que se
encuentra un promedio de este es 24 USD
por kilogramo en la ciudad de medellin
Colombia.
Ilustración 1 Colorante Coomassie brilliant blue
El método anteriormente mencionado se
empleo también en el extracto de levadura,
el cual es un extracto soluble en agua
formado por el autolisado de células de
levaduras. Es un producto rico en vitaminas
especialmente del complejo B, aminoácidos
y otros factores de crecimiento. (Wikipedia,
2018).
La cuantificación de azucares reductores
fue otro de los procesos que se llevaron a
cabo durante la practica, estos azucares son
aquellos que poseen su grupo carbonilo
(grupo funcional) intacto, y que a través del
mismo pueden reaccionar como reductores
(dadores de electrones) con otras moléculas
que actuarán como oxidantes (aceptando
electrones). (Lehninger, 1998). Por otro
lado, el método DNS fue el que se empleo
pues Entre los métodos más utilizados para
la cuantificación de azúcares reductores se
encuentra el método del DNS ya que se basa
en la reducción del azúcar reducido por la
glucosa u otro azúcar reductor al ácido 3-
amino-5-nitrosalicílico, cuya presencia
puede detectarse por lectura de la
absorbancia en la zona de 540-570 nm
(Rodriguez).
Las reacciones que se dieron durante esta
practica fueron de hidrolisis como ya se
nmenciono anteriormente y de hidrolisis de
polisacáridos en el caso de la cuantificación
de azucares,el producto que se esperaba
obtener con los métodos descritos
anteriormente mediante absorbancia fueron
la presencia de azúcar en la muestra y de
proteínas.
2. Materiales y Método
Presentar la metodología como un digrama
de flujo de proceso (Bloques). Las
corrientes de flujo deben tener detallado las
cantidades (masicas o volumetricas), así
como la descripción de sus componetes.
3. Análisis de Resultados
Se presentan los resultados obtenidos
durante la práctica realizada con su
respectivo análisis y discusión de los
mismos. Se trata de analizar, el significado
y la utilidad de los resultados obtenidos.
Se redacta de forma impersonal. Por
ejemplo: se elaboró, se encontró, se obtuvo,
etc.
Los resultados incluyen la siguiente
información:
 Datos primarios: Valores medidos,
pesos tomados, etc.
 Cálculos: Presentar una muestra de
cálculo a partir de los datos primarios.
Por ejemplo: cálculo de la
concentración de soluciones, etc.
Datos y cálculos
Ejemplo:
% Rendimiento= Valor Experimental
_________________ X 100
Valor Teórico
% Error = Valor Teórico-Valor Experimental
___________________________ x 100
Valor Teórico
 Tablas, gráficos y figuras de los
resultados.
FIGURA EJEMPLO
Figura 1. Ejemplo de Figura
 Causas de error: mencionar las posibles
fuentes de error que afectaron el valor
de los resultados obtenidos, por
ejemplo:
Errores instrumentales (especificar).
Errores humanos (especificar).
Preguntas de la guía de laboratorio
1. Para el método de Bradford, elabore
una gráfica de absorbancia versus
concentración a partir de los
resultados obtenidos para las
soluciones estándar de albúmina
(BSA), obtenga la ecuación de la
 recta y su coeficiente de correlación. El porcentaje de cada elemento del informe
que contribuye en la nota final del mismo es
el siguiente:

Item Porcentaje
5. Referencias
Introducción 10
Corresponden a las referencias Materiales y métodos 15
bibliográficas de los libros, artículos (Diagrama de Flujo)
científicos, direcciones electrónicas, etc., Análisis de resultados 70
que se hayan consultado para el trabajo. y Preguntas de la guia
Estas deben ser claras y completas. Referencias 5

El formato para citar las referecias es el que

se maneja en la revista Biochemical
Engineering Journal, ver:
https://www.elsevier.com/journals/biochem
ical-engineering-journal/1369-703x/guide-
for-authors

Ejemplo:
[1] J. van der Geer, J.A.J. Hanraads, R.A.
Lupton, The art of writing a scientific
article, J. Sci. Commun. 163 (2010) 51–59.

PRESENTACION DEL INFORME

El tipo de letra empleado para la redacción

del texto del informe es Times New Roman,
en tamaño 12, justificado e interlineado
sencillo.

El tamaño del papel puede ser carta o A4.

Cada informe presentado en forma de

artículo debe llevar la introducción, los
materiales y método, el análisis de
resultados, las respuestas de las preguntas de
la guía del laboratorio y las referencias
bibliográficas.