INSTITUTO TECNOLÓGICO DE ACAPULCO

DEPARTAMENTO DE INGENIERÍA QUÍMICA Y BIOQUÍMICA

INGENIERÍA BIOQUÍMICA
MICROBIOLOGÍA DE LOS ALIMENTOS
M.C. ALDAY DIAZ MIGUEL ANGEL

DISEÑO EXPERIMENTAL No. 3:

TECNICA DE MILES AND MISRA DE MESÓFILOS AEROBIOS

EQUIPO: 4 GRUPO: “B”

ALUMNO: LAURA ISABEL BENITEZ ROJAS 15320526

FECHA DE ENTREGA: 02/09/18

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INDICE

1. INTRODUCCION ................................................................................................. 3
2. MARCO TEORICO .............................................................................................. 4
3. HIPOTESIS ......................................................................................................... 5
3.1 HIPÓTESIS NULA ............................................................................................... 5
3.2 HIPÓTESIS DE TRABAJO .................................................................................. 5
3.3 HIPÓTESIS ALTERNATIVA ................................................................................ 5
4. PLATEAMIENTO DEL PROBLEMA..................................................................... 6
5. MATERIAL Y REACTIVO .................................................................................... 7
6. CALCULOS ......................................................................................................... 7
7. PROCEDIMIENTO .............................................................................................. 8
8. BIBLIOGRAFIA.................................................................................................... 9

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1. INTRODUCCION

La carne (principalmente la cruda) además de ser altamente susceptible a deterioro,

también puede constituir un vehículo para la propagación de enfermedades
transmitidas por alimentos (ETAs) (Bhandare y col., 2007; Podpečan y col., 2007).
Durante el sacrificio y procesamiento, todos los tejidos potencialmente comestibles
pueden estar sujetos a contaminación por diversas fuentes, ya sea interna o externa
al animal. En animales vivos,
las superficies en contacto con el medio ambiente albergan una variedad de
microorganismos, por lo que en muchas ocasiones los contaminantes se derivan de
la piel del animal, o bien, de aquellos presentes en heces. Sin embargo, se ha
determinado que las carnes procesadas son más susceptibles a contaminarse con
microorganismos patógenos durante las diferentes etapas de su procesamiento
(Datta y col., 2012).

La presencia de patógenos en la cadena de producción de un alimento, aún en bajos

números, es indeseable y se considera como la mayor causa de enfermedades
gastrointestinales alrededor del mundo (McDonald y Sun, 1999). Además de los
componentes de la carne, los embutidos tienen otras fuentes de microorganismos
como en los ingredientes de condimentación y formulación. En las tripas envasadas
en sal predominan Bacillus, clostridium y Pseudomonas. Se ha demostrado que en
todos los ingredientes del embutido de carne de cerdo las tripas aportan la mayor
cantidad de bacterias.

Para tratar de determinar la calidad microbiológica de la carne se utiliza la búsqueda

y cuantificación de microorganismos indicadores, los cuales, aunque pueden no ser
patógenos, su presencia indica la probabilidad de que también pueden estar
presentes microorganismos patógenos y estas determinaciones incluyen la cuenta
de bacterias mesofílicas viables totales, coliformes totales, bacterias del grupo
Enterobacyeriaceae, Echerichia coli, estreptococos fecales y Aeromonas.

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2. MARCO TEORICO

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3. HIPOTESIS

3.1 Hipótesis nula

El conteo por medio de la técnica miles and misra servirá para cuantificar el numero
de unidades de colonia en la suspensión bacteriana.

3.2 Hipótesis de trabajo

Por medio de la técnica de miles and misra en la sección de la dilución 10-6 se podrán
cuantificar entre 30 – 300 colonias de bacterias mesofílicas.

3.3 Hipótesis alternativa

El conteo por medio de la técnica de miles and misra no funcionara para cuantificar
el numero de unidades de colonia en la suspensión bacteriana.

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4. PLATEAMIENTO DEL PROBLEMA

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5. MATERIAL Y REACTIVO

2 cajas Petri con 3 divisiones Agar cuenta estándar 1.175 g

6 pipetas Pasteur Mortadela

1 matraz de erlenmer Algodón

1 agitador de vidrio Gasas

6 tubos de 15 x 150 Cinta testigo

Solución Salina fisiológica Cinta masking

Pipeta de 5ml Agua destilada

Probeta de 150 ml Licuadora

Gradilla 1 vaso de precipitado

Mechero de Bunsen

6. CALCULOS
Se cuentan las diluciones que presentan como máximo 20 unidades formadoras de colonias
(UFC).

La siguiente ecuación se usa para calcular el número de unidades formadoras de colonias (UFC)
por ml de la alícuota / muestra original.

𝑈𝐹𝐶 𝑝𝑜𝑟 𝑚𝐿 = 𝑁ú𝑚𝑒𝑟𝑜 𝑝𝑟𝑜𝑚𝑒𝑑𝑖𝑜 𝑑𝑒 𝑐𝑜𝑙𝑜𝑛𝑖𝑎𝑠 𝑝𝑎𝑟𝑎 𝑢𝑛𝑎 𝑑𝑖𝑙𝑢𝑐𝑖ó𝑛 𝑥 50 𝑥 𝑓𝑎𝑐𝑡𝑜𝑟 𝑑𝑒 𝑑𝑖𝑙𝑢𝑐𝑖ó𝑛

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1. PROCEDIMIENTO

TÉCNICA DE MILES & MISRA

Se efectuan diluciones seriadas al decimo en S.S.F, hasta la dilucion 10 -6

Inmediatamente , y comenzando con la dilucion mayor , se

depositan 1 gota(o.o5 mL) de cada dilucion, en el sector
correspondiente de la placa que habia sido previamente dividida
en 3 sectores radiales numerados.

La superficie de la placa debe estar suficientemente seca para

permitir que se absorba la gota de la muestra , en 15 a 20
minutos.

Las placas se dividen en sectores iguales. Los sectores serán

etiquetados con el número de dilución.

En cada división de la placa, se deja caer 1 x 20 𝜇L de la dilución apropiada

sobre la superficie del agar cuenta estándar y la gota permite que se
extienda de forma natural.
incubar a 37° C por 18 hrs despues de ese tiempo comenzar el conteo.

En la descripción original del método, una caída desde una altura de 2.5 cm se extendió
sobre un área de 1.5 – 2.0 cm.
Es importante evitar tocar la superficie del agar con la pipeta.

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2. BIBLIOGRAFIA

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