INSTITUTO TECNOLÓGICO DE ACAPULCO

DEPARTAMENTO DE INGENIERÍA QUÍMICA Y BIOQUÍMICA

INSTITUTO NACIONAL DE MÉXICO

INGENIERÍA BIOQUÍMICA

MICROBIOLOGÍA DE ALIMENTOS
GRUPO: “B”

PROFESOR: M.C. MIGUEL ÁNGEL DÍAZ ALDAY

PRÁCTICA No 1: S. beta hemolítico

EQUIPO #4

INTEGRANTES:
BENÍTEZ ROJAS LAURA ISABEL
MERINO GARCÍA ELIZABETH
MORALES MELGOZA ERICK
GUZMÁN DÍAZ CRISTINA

FECHA DE ENTREGA: 30 AGOSTO /2018

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ÍNDICE

CONTENIDO
Aportación de cada integrante del equipo………………………………………….……….…3
Introducción……………………………………………………………………………………….4
Marco teórico……………………………………………………………………………………..4
Planteamiento del problema ........................................................................................... 7
Objetivos......................................................................................................................... 7
Metodología .................................................................................................................... 8
Hipótesis ......................................................................................................................... 11
Justificación .................................................................................................................... 11
Material, equipo y sustancias .......................................................................................... 12
Cálculos…………………………………………………………………………………………...12
Resultados...................................................................................................................... 13
Conclusión ...................................................................................................................... 14
Bibliografía ...................................................................................................................... 14
Anexo ............................................................................................................................. 15

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APORTACION DE CADA INTEGRANTE DEL EQUIPO:

1. PORTADA - ELIZABETH
2. INDICE- LAURA
3. INTRODUCCION- ELIZABETH
4. MARCO TEORICO- ELIZABETH
5. PLANTEAMIENTO DEL PROBLEMA -
LAURA
6. JUSTIFICACION- CRISTINA
7. OBJETIVOS- LAURA
8. HIPOTESIS - ERICK
9. METODOLOGIA- CRISTINA
10.MATERIAL Y REACTIVO -CRISTINA
11.CALCULOS- LAURA
12.RESULTADOS- LAURA
13.CONCLUSION-ERICK
14.BIBLIOGRAFIA
15.ANEXOS

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INTRODUCCION

El Streptococcus B hemolítico Grupo A (SBHGA) es un coco Gram (+) que puede

encontrarse en las vías respiratorias superiores y en la superficie cutánea en
pacientes sanos. Frecuentemente produce enfermedades como faringoamigdalitis
e infecciones de piel, pero puede llegar a causar una amplia variedad de infecciones
invasoras con alta mortalidad, debido a factores de virulencia patógena como
constituyentes somáticos, enzimas y toxinas.
Las infecciones invasoras por este microorganismo se definen como aquellas en
las que se logra obtener el aislamiento del patógeno desde un sitio habitualmente
estéril del organismo y corresponden a síndrome de shock tóxico (SST), fasceítis
necrotizante, bacteriemias e infecciones focales como celulitis, neumonía,
empiema, meningitis, artritis y osteomielitis.

MARCO TEORICO

El género Streptococcus (del griego στρεπτό κοκκος; grano trenzado) es un grupo

de bacterias formado por cocos gram -positivospertenecientes al filo firmicutes1 y al
grupo de las bacterias ácido lácticas. Estas bacterias crecen en cadenas o pares,
donde cada división celular ocurre a lo largo de un eje. De allí que su nombre, del
griego στρεπτος streptos, significa que se dobla o retuerce con facilidad, como una
cadena. Los Streptococci son oxidasa– y catalasa–negativos.

Las especies conocidas de estreptococus que producen enfermedades a humanos

son:

 Estreptococos del grupo A: Streptococcus pyogenes producen amigdalitis

e impétigo.
 Estreptococos del grupo B: Streptococcus agalactiae producen meningitis
en neonatos y trastornos del embarazo en la mujer.
 Neumococo: Streptococcus pneumoniae es la principal causa de neumonía
adquirida en la comunidad.
 Streptococcus viridans: es una causa importante de endocarditis y de
abscesos dentales.
 Streptococcus mutans: causa importante de caries dental. Pertenece al
grupo de estreptococos viridans.

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Algunas especies de los grupos C y G tienen en su pared la proteína G, que, por

su capacidad de unión a anticuerpos, tiene importantes aplicaciones en
biotecnología.

El estreptococo beta hemolítico del grupo A es un patógeno bacteriano de

importancia médica principalmente por sus secuelas no supurativas; a partir de la
década de los ochenta ha habido un incremento en la frecuencia y gravedad de las
formas clínicas conocidas, así como el número de casos de enfermedad reumática
a nivel mundial00' 14'). Más recientemente se ha reconocido su participación en el
síndrome de choque tóxico, lo que sugiere un cambio en la epidemiología de la
bacteria"-6 ' 351. El estreptococo beta hemolítico del grupo A es un coco Gram
positivo que se agrupa en cadenas, posee cápsula y su pared está constituida por
carbohidratos, proteínas y ácido lipoteicoico. Es microaerofílico, catalasa negativa y
sensible a la bacitracina. El ácido láctico, o su forma ionizada, el lactato (del lat. lac,
lactis, leche), también conocido por su nomenclatura oficial ácido 2-hidroxi-
propanoico o ácido α-hidroxi-propanoico, es un compuesto químico que desempeña
importantes roles en varios procesos bioquímicos, como la fermentación láctica. Es
un ácido carboxílico, con un grupo hidroxilo en el carbono adyacente al grupo
carboxilo, lo que lo convierte en un ácido α-hidroxílico (AHA) de fórmula H3C-
CH(OH)-COOH (C3H6O3). En solución puede perder el hidrógeno unido al grupo
carboxilo y convertirse en el anión lactato.

El ácido láctico es quiral, por lo que se pueden encontrar dos enantiómeros

(isómeros ópticos). Uno es el dextrógiro ácido D-(+)-láctico o d-ácido láctico (en este
caso, el ácido (R)-láctico); el otro es el levógiro ácido L-(-)-láctico o ℓ-ácido láctico
(en este caso, ácido (S)-láctico), que es el que tiene importancia biológica. La
mezcla racémica (cantidades idénticas de estos isómeros) se llama d,ℓ-ácido láctico.
Fue refinado por primera vez por el químico sueco Carl Wilhelm Scheele en 1780 a
partir de leche agria. En 1808, Jöns Jacob Berzelius descubrió que se libera ácido
láctico en los músculos al realizar esfuerzos físicos intensos. Su estructura fue
determinada por Johannes Wislicenus en 1873. En 1856 Louis Pasteur descubrió el
lactobacillus y su rol en la producción de ácido láctico. Este ácido comenzó a ser
producido comercialmente por la compañía alemana Boehringer Ingelheim en 1895.

En 2006 la producción global de ácido láctico alcanzó 275,000 toneladas con un

crecimiento promedio anual de 10%.

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BACTERIAS LACTICAS

Las bacterias lácticas (BAL) son un grupo de microorganismos representadas por

varios géneros con características morfológicas, fisiológicas y metabólicas en
común. En general las BAL son cocos o bacilos Gram positivos, no esporulados, no
móviles, anaeróbicos, microaerofílicos o aerotolerantes; oxidasa, catalasa y
benzidina negativas, carecen de citocromos, no reducen el nitrato a nitrito y
producen ácido láctico como el único o principal producto de la fermentación de
carbohidratos.

En 1985, los miembros del diverso género Streptococcus fueron reclasificados en

Lactococcus, Enterococcus, Vagococcus, y Streptococcus basado en las
características bioquímicas, así como moleculares. Históricamente, los
estreptococos eran segregados principalmente basado en su serología, el que se
había comprobado que correlacionaban bien con las definiciones taxonómicas
actualizadas. Los Lactococci -anteriormente clasificadas en el grupo Lancefield N
de los estreptococos- se usan extensamente como iniciadores de fermentación de
lácteos, estimándose que los humanos consumen 1018 lactococci anualmente.

Lactobacilos búlgaros, nombre común con el que se conoce a las colonias de las
bacterias Lactobacillus bulgaricus, las cuales son conglomerados de bacterias
lácticas y levaduras de asociación simbiótica estable embebidas en una matriz de
polisacáridos, cuyo tamaño varía de entre 5mm y 2.5 mm; de consistencia elástica
y de color blanco-amarillento (Ulloa- Lappe, 1993). A pesar de que fueron
descubiertas por el búlgaro Dr. Stamen Grigorov en 1905 (1878 -1945), siendo aún
estudiante de medicina, las bacterias Lactobacillus bulgaricus y Streptococcus
thermophilus , las responsables de la fermentación de la leche, ya eran conocidas
por los antiguos tracios que vivían en el territorio de la Bulgaria moderna desde
6000-7000 a. C. Las utilizaron para inducir la fermentación de la leche de oveja para
obtener yogur, queso, etc., y que serían los primeros alimentos probióticos en el
mundo.Se considera una bacteria termofila que resiste temperaturas desde 45 oC
a 115 *C.

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PLANTEAMIENTO DEL PROBLEMA

La transmisión de enfermedades por medio de alimentos es muy común a pesar de

que hoy en día se tienen las normas sanitarias necesarios. Tanto como bacterias,
como hongos y levaduras, pueden alimentarse de todos los aportes nutricionales
que están destinados para el consumo humano.
Las dos principales causas de que los alimentos resulten contaminados son la no
aplicación de las normas o la mala aplicación. Esto puede ocurrir tanto por falta de
información como por ahorrar insumos en la elaboración del alimento y así obtener
más ganancia de su venta. (Food and Drug Administration. 2003)
Los fabricantes y vendedores artesanales, al no prestar atención a estos hechos,
son uno de los más propensos en recurrir en estas faltas. Provocando gastos a la
comunidad consecuencia de las enfermedades que pudieron ser evitadas.
La determinación y conteo del Estreptococos beta hemolítico es una referencia
buena para determinar la calidad del alimento, y ver la cantidad de bacterias
patógenas para la salud a la cual se está expuesto.

Objetivo general

Poder identificar en el agar base sangre S. B Hemolíticos que están presentes en lácteos sin
pasteurizar.

Objetivos específicos

 Hacer las pruebas bioquímicas de identificación para S. Hemolítico

 Observar el microscopio si son gran negativos o positivos
 Observar su resistencia a la bacitracina

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METODOLOGÍA

1. Lavado del material a utilizar. Pesar el agar

sangre, prepararlo con 100ml agua
destilada, esterilizarlo y posteriormente
agregar 10 ml de sangre después de que se
enfríe.

2. Medir 10ml de muestra (crema sin

pasteurizar) en 90ml de solución salina.
Licuar durante 30 segundos.

3. Se hacen disoluciones de 10-1

hasta 10-6

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4. Agregar 1mil de cada disolución en

la cada caja correspondiente.

5. Vaciar el Agar sangre en las cajas con

disolución, cuando se solidificó el agar se
agregó una capa más a cada caja, se
hicieron partiduras con el asa (cuando
estaba solidificado completamente) y
posteriormente se incubó por 24hrs.

6. Después de 24hrs de incubación, se hace el

conteo de colonias.

8. Se realizó prueba
Catalasa. Resultado:
negativa.
Posteriormente se
realizó la preparación
de agar y caldo
nutritivo para el cultivo
de Streptococcus B
Hemolítico.

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9. Se realizó el frotis, posteriormente se observó en el microscopio la

muestra.

10. Se realizó prueba de

inhibición a la Bacitracina.

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HIPÓTESIS

• HIPÓTESIS ALTERNATIVA

Obtener Streptococcus b hemolítico en la muestra (crema sin pasteurizar) mediante

el método de vaciado en placa, Al no obtener un mínimo de 10 colonias
sospechosas.

HIPÓTESIS NULA

Obtener Streptococcus b hemolítico en la muestra (crema sin pasteurizar) mediante

el método de vaciado en placa obteniendo 10 o más colonias sospechosas.

JUSTIFICACIÓN

La crema sin pasteurizar está compuesta por leche cruda la cual está sometida a
un gran número de riesgo que hacen peligrar su calidad, esto se debe a la
contaminación y multiplicación de microorganismos patógenos, alteraciones
fisicoquímicas de sus componentes, olores y sabores extraños o la contaminación
por sustancias químicas como los insecticidas, antibióticos detergentes etc. Por ello
se debe poner en manifiesto el problema, analizar los fundamentos y establecer
soluciones para estos problemas.

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MATERIAL, EQUIPO Y SUSTANCIAS

 1 matraz Erlenmeyer (250ml).

 1 pipeta de 1ml.
 1 pipeta de 5ml.
 1 Puente de tinción.
 1 mechero.
 1 embudo de 60°.
 1 gradilla.
 1 vaso de precipitado de 250ml.
 1 vaso de precipitado de 150ml.
 10 tubos de ensayo (13x100).
 6 tubos de ensayo (15x100).
 1 probeta de 100ml.
 3 portaobjetos.

REACTIVO

 Agar Sangre.
 Agar nutritivo.
 Caldo nutritivo.
 Agar antibiótico.
 Agua destilada.
 Solución Salina.
 Muestra: Crema sin pasteurizar.

CÁLCULOS

Para determinar el número de Estreptococos beta hemolítico presentes en 1 ml de

alimento se deben de considerar: a) el número total de colonias sospechosas y
caracterizadas en el agar y b) el número de colonias que resultaron positivas en
las pruebas bioquímicas efectuadas.

Y Se efectúa la siguiente formula

𝐶𝑜𝑙𝑜𝑛𝑖𝑎𝑠 𝑠𝑜𝑠𝑝𝑒𝑐ℎ𝑜𝑧𝑎𝑠 ×501𝐷𝑖𝑙𝑢𝑐𝑖ó𝑛 =𝑈𝐹𝐶

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RESULTADOS

Se determino que en la caja 1, la dilución 10 -1 tuvo una

inhibición que se puede observar un halo alrededor de
la bacitracina

Se determino que en la caja 2, la dilución 10 -2 tuvo una

inhibición más evidente que se puede observar un halo
alrededor de la bacitracina más notorio.

En la caja 3, la dilución 10-3 no hubo ninguna inhibición de

la bacteria.

La tinción que se realizo fue Gram (-)

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CONCLUSIONES
La determinación de Streptococcus b hemolítico en la crema (sin pasteurizar) es un
patógeno dañino para la salud debido a que puede provocar enfermedades como
dolor de garganta y de cabeza, llegamos a la conclusión de que es muy importante
consumir alimentos que tengan un protocolo y normas de preparado para su mejor
calidad y de tal manera el alimento que en este caso fue la crema no sean alimentos
dañinos para la salud humana.
Es muy importante tener en claro saber de dónde proviene un alimento que sea se
descomponga en un corto tiempo, de esa manera se evitarían demasiadas
enfermedades que podrían provocar hasta la muerte.

BIBLIOGRAFÍA
Clavell, L.; Pedrique de Aulacio, M. 1992. Microbiología. Manual de Métodos
Generales (2da edición). Facultad de Farmacia. Universidad Central de Venezuela
Food and Drug Administration “Bacteriological Analytical Manual”. 9 th ed. Arlington,
VA: AOAC. 2003
Murray P, Baron E.J, Pfaller M, Tenover F, Yolken R., Manual of Clinical
Microbiology. 7th edition. ASM Press, Washington. 1999.
Brogden KA et al., Virulence Mechanisms of Bacterial Pathogens. 3rd ed. ASM
Press. Washington. 2000
Mims, Playfair, Roitt, Wakelin and Williams., Microbiología Médica, 2ª edición.
Mosby, Harcourt Brace, España, 1999.

LINKOGRAFÍA
http://www.uamenlinea.uam.mx/materiales/licenciatura/diversos/AQUIAHUA
TL_RAMOS_MARIA_DE_LOS_ANGELES_Manual_de_practicas_de.pdf
https://es.slideshare.net/guest5e31b0e1/medios-de-cultiv

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ANEXO

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