CURVA DE CRECIMIENTO MICROBIANO

MICROBIAL GROWTH CURVE

Angélica Hoyos – Mileth Muñoz – Fadua Ramírez

Universidad de Córdoba
Facultad de Ciencias de la Salud
Programa de Bacteriología

RESUMEN: En la siguiente investigación se establecerá una curva de crecimiento

microbiano a partir de un cultivo fresco de Saccharomyces cerevisiae, utilizando los
métodos del recuento de colonias en placa (UFC) y absorbancia; evidenciando el
crecimiento exponencial consecuencia de la división celular en el transcurso del
tiempo y con esto las diferentes fases del crecimiento microbiano.

SUMMARY: In the following investigation a microbial growth curve will be

established from a fresh culture of Saccharomyces cerevisiae, using plate count
(UFC) and absorbance methods; evidencing the exponential growth resulting from
the cell division in the course of time and with this the different phases of the
microbial growth.

INTRODUCCIÓN

Se define crecimiento como un aumento en la cantidad de constituyentes y

estructuras celulares, cuando hay crecimiento en ausencia de división celular hay
aumento en el tamaño y peso de la célula. Mientras que cuando el crecimiento es
seguido de división celular hay un aumento en el número de células

El crecimiento de una población es el aumento del número de células como

consecuencia de un crecimiento individual y posterior división. El crecimiento de una
población ocurre de una manera exponencial. El crecimiento exponencial es una
consecuencia del hecho de que cada célula se divide dando dos (2) células hijas,
las cuales al dividirse darán cada una dos células hijas, así es que en cada período
de división la población se duplica. La velocidad de crecimiento exponencial se
expresa como tiempo de generación (G) y este se define como el tiempo que tarda
una población en duplicarse. Los tiempos de generación varían ampliamente entre
los microorganismos, algunos crecen rápidamente y presentan tiempos de
generación de unos 30 minutos y otros tienen tiempos de generación de varias
horas o incluso días. (1)

La curva de crecimiento de una población se divide en 4 fases:

Latencia: Cuando una población bacteriana es inoculada en un medio fresco el

crecimiento no suele comenzar d inmediato, sino después de un tiempo llamado
latencia. La fase de latencia representa un periodo de transición para los
microorganismos cuando son transferidos a una nueva condición. En esta fase se
producen las enzimas necesarias para que ellos puedan crecer en un nuevo medio
ambiente. En esta fase no hay incremento de células, pero hay gran actividad
metabólica, aumento en el tamaño individual de las células, en el contenido proteico,
ADN y peso seco de las células.

Exponencial o logarítmica: Es el periodo de la curva del crecimiento en el cual el

microorganismo crece exponencialmente, es decir que cada vez que pasa un cierto
tiempo de generación la población se duplica. Bajo condiciones apropiadas la
velocidad de crecimiento es máxima. Las condiciones ambientales afectan la
velocidad de crecimiento exponencial.

Fase estacionaria: En cultivos en recipientes cerrados una población no puede

crecer indefinidamente de forma exponencial. Las limitaciones de crecimiento
ocurren ya sea por agotamiento de algún nutriente esencial, por acumulación de
productos tóxicos, porque se alcance un número de células elevado para el espacio
disponible o por combinación de las causas anteriores.

Fase de muerte: Si la incubación continúa después de que una población

microbiana alcanza la fase estacionaria, las células pueden continuar vivas y seguir
metabolizando, pero va a comenzar una disminución progresiva en el número de
células viables, y cuando esto ocurre se dice que la población ha entrado en fase
de muerte. (2)

MÉTODO

En la siguiente investigación se establecerá una curva de crecimiento microbiano a

partir de un cultivo fresco de Saccharomyces cerevisiae, utilizando los métodos del
recuento de colonias en placa (UFC) y absorbancia.

Del cultivo fresco de S. cerevisiae se realizaron 5 inoculaciones en tubos de caldo

nutritivo estéril, marcados como hora 0, 1, 2, 3 y 4, adicionando a cada uno 300 𝑢𝑙
del microorganismo; 4 de estos de llevaron a agitación constante en un agitador
orbital a 150 rpm y con el tubo no agitado se tomó la muestra que representa la hora
0 de la curva de crecimiento.

Para el método de absorbancia, transcurrido el tiempo estipulado, a cada uno de los

tubos se les determino la absorbancia, con la ayuda de un espectrofotómetro RA 50
y se anotaron los resultados obtenidos en cada uno de ellos que permitirán construir
la curva de crecimiento Absorbancia vs Tiempo.

En cuanto al método del recuento de colonias en placa (UFC), se realizaron

diluciones seriadas, de cada tubo en su respectivo tiempo(10-1 a 10-6), con 4,5 mL
de solución salina al 0.85% y adicionando 0.5 mL entre diluciones; luego se sembró,
de forma masiva, 0.1 mL de las dos últimas (10-5 y10-6) en cajas de Agar Nutritivo,
previamente rotuladas para tal fin, llevándolas a incubar a 37°C durante 24 horas.
Transcurridas las 24 horas se realizaron lecturas de las mismas y el recuento de las
unidades formadoras de colonias; para realizar la curva de crecimiento Número de
colonias vs Tiempo.

RESULTADOS MEDIOS DE CULTIVO.

Agar nutritivo, crecimiento de

unidades formadoras de colonias
de Saccharomyces cerevisiae
 RECUENTO DE UNIDADES FORMADORAS DE COLONIAS
DILUCIONES Hora 0 Hora 1 Hora 2 Hora 3 Hora 4
DIL 10-5 10x10-6 11,0x10-6 130,0x10-6 540,0x10-6 250,0x10-6
DIL 10-6 830,0x10-7 8,7x10-7 120,0x10-7 366,0x10-7 230,0x10-7
 RESULTADOS Y ANALISIS

CURVA DE CRECIMIENTO
ABSORBANCIAS

1,600 1,555

1,500 1,444
1,391
1,400
ABSORBANCIA

1,320

1,300
1,185
1,200

1,100

1,000
HORA 0 HORA 1 HORA 2 HORA 3 HORA 4
TIEMPO

FIGURA 1. Curva de crecimiento Saccharomyces cerevisiae, absorbancia

vs tiempo.

CURVA DE CRECIMIENTO
7.9

7.643945913
LOGARITMO DEL NUMERO DE COLOONIAS

7.7

7.5 7.62324929
7.322219295
7.3
7.105510185
7.1

6.9

6.822821645
6.7

6.5
HORA 0 HORA 1 HORA 2 HORA 3 HORA 4
TIEMPO

Figura 2. Curva de crecimiento Saccharomyces cerevisiae, logaritmo del número

de colonias vs tiempo
Como se aprecia en la figura 1 y 2 se evidencia un crecimiento exponencial saltando
la fase de adaptación por parte de las levaduras, esto se debe principalmente a que
se tomaron inóculos de cultivos pre adaptados, en la hora 2 se puede observar una
caída en el crecimiento que puede deberse por el agotamiento de nutrientes donde
hay un cese en el crecimiento lo que se traduce en una etapa estacionaria y de
muerte. Sin embargo, se observó que a la 3 y 4 hora hubo de nuevo una etapa de
crecimiento exponencial, que probablemente se deba al aprovechamiento de ciertos
nutrientes que las colonias muertas no utilizaron.

BIBLIOGRAFÍA

1. REPRODUCCIÓN Y CRECIMIENTO MICROBIANO [Internet]. REPRODUCCIÓN Y

CRECIMIENTO MICROBIANO. 2017 [cited 12 June 2017]. Available from:
http://www.ucv.ve/fileadmin/user_upload/facultad_farmacia/catedraMicro/08_Tema_6_crecimiento.
pdf

2. 5 E. Curva del Crecimiento [Internet]. Microbiologia3bequipo5.blogspot.com.co. 2017 [cited 12

June 2017]. Available from: http://microbiologia3bequipo5.blogspot.com.co/2014/10/curva-del-
crecimiento.html