MEDIOS DE CULTIVO

INTRODUCCIÓN:
Podemos decir que la microbiología empieza su verdadero desarrollo como ciencia en el
momento en que se descubre el microscopio y comienza la observación de los primeros
microorganismos, pero es indudable que la puesta a punto de los medios de cultivo y la
utilización del agar como solidiificante, marcan dos importantes puntos de inflexión en
su evolución.
La primera noticiade la utilización de medios de cultivo nos llega del micólogo Brefeld,
que consiguió aislar y cultivar esporas de hongos en medios sólidos realizados a base de
gelatina.
Sin embargo, éste sistema no era adecuado para las bacterias (por su menor tamaño) y no
fue hasta el año 1878 cuando Lister popularizó un método enfocado al cultivo puro basado
en diluciones seriadas en un medio líquido.
Un medio de cultivo es una mezcla de diversos nutrientes que en concentraciones
adecuadas permite el crecimiento de microorganismos, bajo determinadas condiciones
físico-químicas. La composición química de los medios de cultivo es variada, pero, de
manera general, todos ellos contienen una fuente de energía (compuesto orgánico o
inorgánico), una fuente carbonada (algunas veces un mismo compuesto puede servir de
fuente de energía y fuente carbonada), sales minerales, vitaminas y agua.
OBJETIVOS:
Se pretende demostrar que los gérmenes tiene requerimientos nutritivos variados, los ques
son tomados en cuenta al preparar un medio de cultivo, cuya composición varía de
acuerdo con las exigencias del germen. En consecuencia, los medios de cultivo son
compuestos necesarios para el desarrollo bacteriano y deben contener:
a) Sustancias nutritivas apropiadas (Proteinas, carbohidratos, sales minerales, etc.)
b) Tener un pH conveniente; generalmente de 6.8 a 7.6
c) Estar previamente esterilizados
d) Estar protegidos de contaminación

Los medios pueden tener como finalidad:

a) Aislamientos de germenes
b) Identificacion
c) Conservacion
d) Clasificacion
e) Obtencion de toxinas
f) Recoleccion o cosecha para preparación de vacunas y otros fines.

MATERIALES:
Para fines demostrativos se trabajó con medios simples:
MEDIOS LIQUIDOS:
Los elementales y básicos de este tipo son: el agua peptonada de Koch, el caldo simple y
el caldo de infusion de carne.
1. Agua peptonada de Koch:
Peptona ……………………………………………… 10 gr
NaCl …………………………………………………. 5 gr
Agua destilada ……………………………………….. 1,000 ml

2. Caldo simple (común)

Peptona ……………………………………………… 5 a 10 gr
NaCl …………………………………………………. 5 g r
Extracto de carne …………………………………….. 3 gr
Agua destilada ……………………………………….. 1,000 ml

3. Caldo de infusión de carne:

Peptona ………………………………………………. 5 gr
NaCl ………………………………………………….. 5 gr
Infusión de carne …………………………………….. 1,000 ml
MEDIOS SOLIDOS:
Los básicos y elementales son el agar simple o común y la gelatina.
El agar o gelosa simple, resulta de la adición de agar al 15 °/00. Para el medio gelatina se
agrega 120 °/00 de gelatina. El medio más usado es el agar simple, no así la gelatina que
presenta el inconveniente de licuarse a los 22°C.
MEDIOS SEMISÓLIDOS:
Éstos se consiguen agregando una menor cantidad de agar al medio base.
PROCEDIMIENTO:
1. Pesasr las sustancias indicadas en las fórmulas respectivas, calculando las
cantidades en relación con los volúmenes requeridos.
2. Disolverlas en la cantidad de agua destilada necesaria llevando a ebullición.
3. Filtrar si es necesario, enfriar moderadamente y ajustar el pH entre 6.8 y 7.4 u otro
que fuere indicado.
4. Esterilizar en autoclave por 15 minutos a 120°C
5. Repartir: Los medios liquidos se reparten en tubos en ambiente estéril y siempre
frente a una llama (Mechero de Bunsen o alcohol). En el caso de los medios
sólidos se les dará antes de que enfríen y solidifique, la inclinación que den tomar
al tiempo de ser empleados: la finalidad de esta inclinación es la de conseguir una
mayor superficie de siembra.
6. Comprobar esterilidad en estufa a 37°C durante 24 horas.

Al final, el medio quedará listo para su empleo y se almacenará de preferencia en

nevera. También pueden almacenarse al ambiente. Es deseable guardar los medios
preparados en bolsas de nylon herméticamente cernidas para evitar un deterioro
muy rápido, por desecación.
RESULTADOS:
COMENTARIOS:
Hay que ser minuciosos en la composición de los caldos nutritivos porque el incorrecto
uso de ellos puede llevar al fracaso de nuestra experiencia de manipular microorganismos.
Hemos aprendido a reconocer un caldo a diferencia de un agar. El caldo es para muestras
liquidas y el agar para muestras sólidas.
Los medios químicamente definidos se preparan añadiendo al agua destilada cantidades
precisas de compuestos orgánicos o inorgánicos altamente purificados.
Los diferentes medios y técnicas de cultivo son esenciales en el laboratorio de
microbiología pues sirven para identificar las bacterias causantes de las enfermedades
infecciosas y los antibióticos a los que son sensibles esas bacterias.
La mayoría de las bacterias se desarrolla en un medio de cultivo básico que contiene agua
extracto de carne y pepsina.
Un método fundamental para estudiar las bacterias es cultivarlas en un medio líquido o
en la superficie de un medio sólido de agar.
Hemos aprendido a reconocer y clasificar medios de cultivo por su origen animal, vegetal
y mineral.

REFERENCIAS BIBLIOGRÁFICAS:

CUESTIONARIO:
¿Considera usted necesario tomar alguna precaución en caso de tener que adicionar
sangre al medio?