Formulasi Natrium Ascorbyl Phosphate dalam Mikroemulsi A/M VCO

*Tri Suciati dan Lisa Patricia

Kelompok Keilmuan Farmasetika, Sekolah Farmasi, Institut Teknologi Bandung,
Jalan Ganesha 10 Bandung 40132

Abstrak
Dilakukan pengembangan formulasi mikroemulsi A/M untuk menghasikan permeasi tertinggi dari Natrium Ascorbyl
Phosphate (NAP) sebagai turunan vitamin C yang stabil. Mikroemulsi dibuat dengan menggunakan VCO sebagai basis
minyak, gliserin sebagai kosurfaktan, dan kombinasi Tween 80 – Span 80 sebagai surfaktan. Hasil mikroemulsi diperoleh pada
konsentrasi surfaktan 27,5% dengan rasio Tween 80-Span 80 3:1, konsentrasi kosurfaktan gliserin 30%, dan fasa dalam 15%.
Pada pengamatan organoleptik, sediaan mikroemulsi memiliki penampilan jernih kuning tanpa pemisahan fasa setelah
dilakukan uji sentrifuga, freeze-thaw, danpenyimpanan 28 hari di suhu ruang dan 40°C. Sediaan memiliki viskositas rata-rata
375 cps dan pH rata-rata 6,80±0,21dengan jumlah rata-rata NAP terdifusi 850,56 µg/cm2 atau sebanyak 75,75% selama 8 jam
penentuan in vitro dengan membran kulit ular. Mikroemulsi A/M berpotensi untuk dikembangkan sebagai pembawa NAP
dalam kosmetik antikerut.

Kata kunci: mikroemulsi, NAP, vitamin C, VCO.

Abstract
Optimization of formulation was done to develop a W/O microemulsion formulation to yield highest diffusion of Natrium
Ascorbyl Phosphate (NAP) as the stable form of vitamin C. Microemulsions were made using using VCO as the oil phase,
options of ethanol or glycerin as cosurfactant, and combination of Tween 80 and Span 80 as surfactants. Microemulsion was
obtained at surfactant concentration of 27.5% with a 3:1 ratio of Tween80-Span80, 30% of glycerin as cosurfactant, and 15%
of the inner phase. The organoleptic of preparations had a clear, transparent yellowish appearance without phase separation
after centrifugation test, freeze-thaw test, and 28 days of storage at room temperature and 40°C. Preparations had 375 cps of
average viscosity and 6.80±0.2 pH with 850.56µg/cm2 or 75.75% of NAP diffused after 8 hoursin vitro testing using snake’s
skin as the membrane. Microemulsion W/O is potential to be developed as a carrier for NAP in anti-wrinkle cosmetics.

Keywords: microemulsion, NAP, vitamin C, VCO.

Pendahuluan itu, dipilih sediaan mikroemulsi air dalam minyak

Vitamin C dipakai dalam produk topikal karena dapat
meningkatkan produksi kolagen. Di dalam dermis,
vitamin C berperan sebagai katalis dalam reaksi
enzimatik yang mengkonversi asam amino prolin
menjadi kolagen (Pauling 1986). Namun, vitamin C
mudah teroksidasi udara dan terdegradasi oleh
cahaya sehingga produk kosmetik telah banyak
menggunakan turunan vitamin C yang bersifat lebih
stabil. Pada penelitian ini, dipilih NAP (Natrium
Ascorbyl Phosphate) yang merupakan turunan
vitamin C sebagai zat aktif, karena NAP memiliki
beberapa kelebihan seperti lebih stabil, lebih tidak
iritatif, dan memiliki potensi sama seperti vitamin C.
NAP akan diubah dalam kulit menjadi vitamin C
melalui reaksi enzimatik. Namun, sama seperti
vitamin C, NAP juga bersifat larut air sehingga
diperlukan sediaan yang mampu menembus lapisan
lipid pada kulit. Sediaan juga harus mampu
melindungi zat aktif dari lingkungan karena biarpun
NAP bersifat lebih stabil, NAP tetap terdegradasi
oleh faktor lingkungan (udara dan cahaya). Karena
untuk memenuhi kriteria tersebut.
Mikroemulsi merupakan campuran air, minyak,
surfaktan dan kosurfaktan yang bersifat jernih, stabil
secara termodinamik dan isotropik dengan ukuran
globul 10-200 nm sehingga diperlukan surfaktan
dengan konsentrasi tinggi. Sistem mikroemulsi lebih
baik sebagai penghantar obat dibandingkan makro-
emulsi biasa karena meningkatnya kapasitas dalam
melarutkan obat, transparansi, difusi tinggi, dan
penyerapan yang lebih baik.
Tujuan dari penelitian ini untuk menghasilkan
formulasi mikroemulsi turunan vitamin C dengan
basis VCO. NAP larut di fasa air, kemudian
didispersikan dalam ukuran nano di dalam basis
minyak. Basis ini mudah menembus lapisan lipid
kulit, membawa globul-globul mengandung zat aktif.
Penetrasi menuju dermis ditingkatkan karena ukuran
globul yang kecil, sehingga lebih mudah berdifusi
pasif. Zat aktif juga terlindungi dari lingkungan

*Penulis korespondensi. E-mail: tri.suciati@fa.itb.ac.id

90 - Acta Pharmaceutica Indonesia, Vol. XXXVII, No. 3, 2012


karena adanya basis minyak yang melindungi zat aktif
di fasa dalam.
Percobaan
Bahan
NAP (Otto), VCO (SITH ITB), Tween 80, Span 80
(Tritunggal), gliserin, etanol, aquadest.
Alat
Alat pengaduk listrik (Eurostar), viskometer
Brookfield®, timbangan gram(Sastorius), timbangan
milligram (AG204), Delsa Nano C particle size
analyzer, pH meter (Beckman), alat sentrifuga, gelas
piala, gelas ukur, pipet, labu takar, cawan,tabung
sentrifuga, vial, dan sel difusi.
Prosedur
Pengembangan formula basis mikroemulsi
Dilakukan optimisasi dengan variasi perbandingan
surfaktan Tween 80- Span 80 (Smix), variasi
kosurfaktan, dan fasa dalam. Variasi Smix dimulai
dari 1:1 sampai 3:1.Kemudian sediaan dibuat sesuai
dengan cara pembuatan mikroemulsi untuk masing-
masing rasio Smix. Setelah diperoleh rasio Smix
paling optimum, dilakukan variasi konsentrasi Smix –
air untuk memperoleh konsentrasi Smix paling sedikit
yang diperlukan untuk memperoleh mikroemulsi yang
stabil. Pemilihan kosurfaktan antara gliserin dan
etanol juga berdasarkan konsentrasi kosurfaktan
paling sedikit untuk mikroemulsi yang stabil. Setelah
diperoleh kadar surfaktan dan kosurfaktan, optimasi
fasa dalam dilakukan dengan variasi air – minyak
dimana konsentrasi air terhadap minyak ditingkatkan
bertahap. Mikroemulsi dibuat dengan memanaskan
fase minyak (VCO, Span 80) dan fasa air (aquades,
Tween 80, gliserin) pada dua cawan penguap terpisah
sampai suhu 40° C. Kemudian kedua fasa dicampur
dalam gelas kimia, diaduk dengan stirrer pada
kecepatan 220 rpm selama 15 menit. Pada optimisasi
dengan etanol, penambahan etanol dilakukan saat
pengadukan.
Pembuatan mikroemulsi dengan NAP
NAP dilarutkan dalam fasa air. Kemudian fase
minyak dan fasa air diperlakukan dengan cara
pembuatan mikroemulsi.
Evaluasi
a) Efek tyndall
Sediaan dilewatkan dengan sinar laser (dari pointer)
untuk mengamati efek tyndall.
b) Penentuan ukuran globul
Penentuan ukuran globul dilakukan dengan alat Delsa
Nano C particle size analyzer. Sediaan dimasukkan
Acta Pharmaceutica Indonesia, Vol. XXXVII, No. 3, 2012 - 91
Suciati et al.
dalam kuvet, kemudian dianalisis dengan alat Delsa
tersebut.
c) Uji stabilita
Stabilita sediaan ditentukan dengan uji sentrifuga,
freeze-thaw, pengukuran pH dan viskositas. Sediaan
disimpan selama 28 hari pada suhu 40°C dan
kelembapan 75%. Dibuat 3 batchlalu dimasukkan ke
dalam climatic chamber. Pengukuran pHdan
viskositasdilakukan pada hari ke-0, hari ke-7, hari ke-
14, hari ke-21, dan hari ke-28.
d) Uji sentrifuga
Sediaan dimasukkan ke dalam tabung sentrifuga,
disentrifugasi dengan kecepatan 3750 rpmselama 5
jam. Setiap 1 jam diamati ada tidaknya pemisahan
fasa.
e) Uji freeze-thaw
Disiapkan 7 vial, sediaan dimasukkan ke dalam setiap
vial sebanyak 2 g. Satu vial dipakai sebagai control,
disimpan pada suhu 25°C. Enam vial lain digunakan
untuk siklus freeze-thaw, sediaan disimpan pada suhu
4°C selama 48 jam, dipindahkan pada suhu 40°C
selama 48 jam, selama 6 siklus. Setiap selesai 1
siklus, diamati terjadinya pemisahan fasa.
f) Uji difusi
Uji difusi dilakukan untuk menentukan banyaknya zat
aktif yang dapat berdifusi dari sediaan masuk ke
dalam cairan penerima. Proses ini mewakilkan difusi
zat aktif dari permukaan kulit masuk ke dalam darah.1
gram mikroemulsi diratakan pada sel difusi. Membran
kulit ular diletakkan di atasnya, sel dijepit lalu
ditutup.Thermostat dinyalakan sampai suhu mencapai
32°C, pH cairan penerima diatur pada pH 7.4 dengan
dapar Na2HPO4 KH2PO4. Sampel diambil selama 8
jam setiap interval 30 menit, sebanyak 5 ml. setiap
pengambilan sampel diganti dengan penambahan
cairan donor 5 ml. Kadar pada setiap sampel diukur
dengan spektrofotometer UV-VIS pada panjang
gelombang 261 nm.
Hasil dan Pembahasan
Sediaan mikromulsi dibuat untuk menghasilkan
penetrasi dan permeasi terbaik untuk NAP ke dalam
dermis. Penampilan jernih menjadi indikasi dalam
optimisasi mikroemulsi. Optimisasi pertama di-
lakukan terhadap perbandingan Tween 80 dan Span
80.
Dari data, terlihat bahwa ada beberapa pilihan rasio
yang dapat menghasilkan kejernihan. Penambahan
kosurfaktan etanol bervariasi, tergantung jumlah yang
diperlukan untuk menghasilkan kejernihan. Rasio 3:1
membutuhkan paling sedikit etanol yaitu sebanyak
Suciati et al.

6%. Untuk menentukan rasio, percobaan diulang Dengan kadar minyak masih tetap, dibuat variasi
dengan diikuti penambahan air. Diamati jumlah air konsentrasi antara surfaktan - air. Data menunjukkan
yang dapat ditambah ke dalam sistem sebelum terjadi diperlukan surfaktan diatas 30% untuk menghasilkan
kekeruhan. kejernihan. Pada optimasi fasa dalam, variasi
dilakukan dengan kadar surfaktan tetap, yaitu 31%
Tabel 1. Optimasi Rasio Tween 80 – Span 80 dan rasio minyak-air yang berubah. Diperoleh kadar
Rasio Tween Konsentrasi air terbesar yang dapat terkorporasi sebanyak 16%.
Hasil Namun setelah dilarutkan zat aktif ke dalam air,
80 –Span 80 etanol(%)
sediaan menjadi keruh. Konsentrasi surfaktan yang
2:1 8 keruh
dinaikkan sampai 36% tetap menghasilkan kekeruhan.
1:1 8 jernih
2:3 10 keruh
3:2 8 jernih
3:1 6 jernih
4:1 10 keruh

Tabel 2. Konsentrasi Maksimum Air

yang Dapat Dikorporasikan
dalam Mikroemulsi
Rasio Tween 80-Span 80 % air a)
2:1 10
1:1 13
2:3 9
3:2 7,4 Gambar 1. Diagram tiga fasa mikroemulsi.
3:1 14,2
4:1 12,5
Keterangan: a) total penambahan air hingga
diperoleh mikroemulsi yang keruh.

Rasio Tween 80 – Span 80 3:1 adalah yang paling

baik dalam me-loading air ke dalam sistem emulsi.
Pada optimasi dengan variasi konsentrasi surfaktan
sampai 31% juga diperoleh bahwa rasio 3:1 yang
membutuhkan paling sedikit etanol untuk mencapai
kejernihan. Dipilih rasio Smix 3:1 untuk optimasi
berikutnya. Gambar 2. Pengamatan efek tyndall sinar laser
yang dilewatkan pada (A) mikro-
emulsi dan (B) air.

Tabel 3. Optimasi Konsentrasi Surfaktan – Air – Minyak

Persentase komponen
Formula Tween 80 – Pengamatan
Gliserin VCO Air
Span 20
A 30 30 30 10 jernih
B 30 25 30 15 keruh
C 30 30 25 15 jernih
D 27,5 27,5 32,5 12,5 jernih
E 25 30 32,5 12,5 keruh
F 27,5 27,5 35 10* keruh
G 27,5 27,5 32,5 12,5* keruh
H 30 30 25 15* keruh
I 27,5 30 27,5 15* jernih
J 30 27,5 27,5 15* jernih
*ditambahkan NAP

92 - Acta Pharmaceutica Indonesia, Vol. XXXVII, No. 3, 2012

 Suciati et al.

Tabel 4. Hasil Evaluasi pH Selama 28 Hari Optimasi dilanjutkan dengan penggunaan gliserin
Suhu 40 °C Suhu 25 °C tanpa etanol. Konsentrasi gliserin ditingkatkan
Minggu menjadi 30%. Hasil optimasi dipaparkan dalam Tabel
Rataan±SD pH kontrol
3.
0 6,69±0,13 7,02
7 6,92±0,04 6,69
14 6,58±0,11 6,5
21 6,75±0,028 6,75

terdifusi
%NAP
28 6,76±0,091 6,7

pH
Gambar 5. Kurva difusi NAP dari sediaan (n= 3).
Keteranan: ♦ n = 1; ■ n = 2; ▲n = 3.

Tabel 6. Difusi Sediaan Selama 8 Jam

hari ke-
Gambar 3. Variasi pH dari mikroemulsi yang Rataan±SD
disimpan pada suhu 40 °C dan waktu NAP terdifusi
Cµg/cm2
20°C. Keterangan: ♦batch 1; (%)
■batch 2; ▲ kontrol. 15 menit 234,91±41,21 24,01±6,73

Tabel 5. Viskositas Mikroemulsi yang Disimpan 30 menit 269,48±24,13 25,63±5,89

pada Suhu 40°C
45 menit 288,58±23,75 28,01±5,14
Minggu Rataan±SD
0 375
60 menit 305,193±38,13 30,24±6,53
7 362,5±17,67
14 350
21 262,5±17,67 90 menit 389,14±21,69 35,85±5,35
28 250
2 jam 409,25±21,93 39,68±5,42

3 jam 505,39±45,46 44,67±2,83

viskositas (cps)

4 jam 578,51±52,7 51,90±3,02

5 jam 699,61±55,26 64,93±2,6

6 jam 727,71±50,87 68,76±6,3

7 jam 788,33±53,41 71,50±6,41

hari ke- 8 jam 850,56±27,15 75,75±3,78

Gambar 4. Viskositas mikroemulsi pada

penyimpa-nan suhu 40 °C.
Keterangan: ♦batch 1; ■batch 2.
Dengan penggunaan etanol sebagai kosurfaktan
tunggal tanpa gliserin, dapat dihasilkan sediaan yang
jernih dengan konsentrasi surfaktan minimal 28%,
namun muncul endapan setelah dibiarkan sehari pada
semua rasio minyak - air di sediaan.
Formula D dipilih karena mengandung konsentrasi
surfaktan terkecil. Namun setelah terkorporasi zat
aktif, hasilnya keruh (formula G). Dilakukan optimasi
lagi untuk dengan meningkatkan konsentrasi
surfaktan dan fasa air. Setelah terkorporasi zat aktif,
terlihat bahwa diperlukan total surfaktan –
kosurfaktan sebanyak 57,5% dari sediaan untuk
menghasilkan kejernihan sementara 55% surfaktan –
kosurfaktan akan cukup jika zat aktif belum

Acta Pharmaceutica Indonesia, Vol. XXXVII, No. 3, 2012 - 93

Suciati et al.
dilarutkan ke dalam fasa air. Dipilih formula I karena
surfaktan lebih iritan dibandingkan gliserin sehingga
konsentrasi surfaktan rendah lebih dipilih daripada
konsentrasi gliserin yang rendah.
Diagram 3 fasa diperoleh dengan STATISTICA 7.
Daerah mikroemulsi dapat dilihat pada area dengan
lingkaran putih. Pada karakterisasi mikroemulsi,
sediaan memiliki efek tyndall saat dilewati sinar laser.
Penentuan ukuran globul tidak dapat dilakukan karena
sediaan sangat kental untuk dibaca dengan
menggunakan Delsa Nano. Hasil uji pH menghasilkan
pH 8, terlalu basa untuk pemakaian kulit sehingga
ditambah dapar fosfat pH 6,4 dengan prosedur
pembuatan berdasarkan FI. Dilakukan pengukuran pH
selama 4 minggu pada suhu 40 °C dan suhu 25 °C
sebagai pembanding. Hasil evaluasi pH dalam 4
minggu pada 2 batch.
Hasil uji sentrifuga dan freeze-thaw menunjukkan
sediaan tetap stabil. Sentrifuga dilakukan selama 5
jam, pengamatan dilakukan setiap setengah jam.
Sediaan stabil selama pengamatan. Uji freeze-thaw
dilakukan dengan menaruh sediaan dalam climatic
chamber pada suhu suhu 40 °C selama 2 hari
kemudian dalam kulkas suhu 4 °C selama 2 hari.
Prosedur diulang sebanyak 6 siklus. Hasil pengamatan
menunjukkan sediaan tetap stabil selama 6 siklus.
Tidak terjadi pemisahan fasa.
Uji difusi sediaan dilakukan dengan membran kulit
ular tiga kali (triplo) pada satu batch. Ketiga hasil
ditampilkan dalam Tabel 6.
Kesimpulan
Sediaan mikroemulsi memiliki formula optimum pada
konsentrasi surfaktan 27,5% pada rasio Tween 80-
Span 80 3:1, konsentrasi kosurfaktan gliserin 30%,
dan fasa dalam 15%. Sediaan bersifat jernih,
transparan, dan stabil selama evaluasi dengan
viskositas rata-rata 375 cps, pH rata-rata 6,80±0,21,
dan jumlah NAP rata-rata terdifusi 850,56 µg/cm2
atau sebanyak 75,75% selama 8 jam.
Daftar Pustaka
Pauling L, 1986, How to Live Longer and Feel Better,
Harper Collins Publishers, Oregon.
Schulman HTP, 1943, J. H. Transparent water in oil
dispersions: the oleopathic hydromicelle. Nature 152:
102 – 103.
94 - Acta Pharmaceutica Indonesia, Vol. XXXVII, No. 3, 2012
Barry BW, 1983, Dermatological Formulations:
Percutaneous Absorption. Marcel Dekker, Inc.: New
York
Mason, 2006, Microemulsions: formation, structure,
and physical properties. Department of Chemistry and
Biochemistry, University of California—Los Angeles.
Partridge DA, Davies MB, Austin J, 1991, Vitamin C:
Its Chemistry and Biochemistry. The Royal Society of
Chemistry: Cambridge, Manchester.
Charro D, 1996, Delivery of a hydrophilic solute
through the skin from novel microemulsion systems.
School of’ Pharmacy, University of California-San
Franciso, San Francisco.
Kawakami K, 2002, Microemulsion formulation for
enhanced absorption of poorlysoluble drugs.
Developmental Research Laboratories, Shionogi and
Co. Ltd., 12-4 Sagisu 5-chome, Fukushima-ku, Osaka
553-0002, Japan.
Hathout RM, 2010, Microemulsion formulations for
the transdermal delivery of testosterone. Faculty of
Pharmacy, Ain Shams University, Cairo, Egypt.
Peng LC, 2010, Optimization of water-in-oil
mikroemulsions by mixed surfactants. Department of
Applied Chemistry, Providence University, Taichung,
Taiwan.
Weiner ND, 2001, Topical transport of hydrophilic
compounds usingwater-in-oil microemulsions.
Department of Pharmaceutics, College of Pharmacy,
University of Michigan, Ann Arbor, MI 48109, USA.
Torchilin VP, 2006, Nanoparticulates as drug carriers.
Imperial College Pres, Fulsland offset printing,
Singapore, hal.126-128.
Departemen Kesehatan Republik Indonesia, 1979,
Farmakope Indonesia Edisi III. Jakarta: Departemen
Kesehatan Republik Indonesia.
Departemen Kesehatan Republik Indonesia. 1995.
Farmakope Indonesia Edisi IV. Jakarta: Departemen
Kesehatan Republik Indonesia.
Rowe RC, 2009, Handbook of Pharmaceutical
Excipients 6th. London: Pharmaceutical Press.