INSTITUTO POLITÉCNICO NACIONAL

ESCUELA NACIONAL DE CIENCIAS

BIOLÓGICAS
DEPARTAMENTO DE BIOQUÍMICA
“DR. GUILLERMO CARBAJAL”

MÉTODOS DE ANÁLISIS

Reporte de práctica: Análisis espectrofotométrico de un sistema múltiple

Profesor: Macías Martínez Víctor Manuel Luis
Fecha de entrega: Fecha de entrega:
Alumno: Diego Osvaldo Cruz González Grupo: 5QV1 Sección: 3
12/09/18 19/09/18

INTRODUCCIÓN

La ley de Bouger y Beer puede emplearse longitud de onda es la suma de las

para calcular la absortividad molar si se
conoce la concentración de una solución.
Así mismo, puede calcularse la
concentración si se conoce el valor
medido de absorbancia de luz si se
conoce la absortividad molar y la
longitud de trayecto. Sin embargo, la
absortividad es en función de variables
como el disolvente, la composición de la
solución y la longitud de onda que ese
emplee para medir la absorbancia.
Entonces se utiliza una solución patrón o
curvas de estandarización o curvas tipo
para poder obtener la absortividad, de
acuerdo con la ecuación de Bouger y
Beer:
absorbancias de todos ellos,:
𝐴𝑇𝑜𝑡𝑎𝑙 = 𝐴1 + 𝐴2 … 𝐴𝑛 ∴
𝐴𝑇 = 𝑎𝑚1 𝑏𝐶𝑚1 + 𝑎𝑚2 𝑏𝐶𝑚2 …
Un espectro de absorción es una gráfica
donde se muestra la relación de la
absorbancia de una sustancia con
respecto a un intervalo de longitudes de
onda. En esta se encentra la longitud de
onda que un compuesto presenta su
máxima absorción (λmax), pero los puntos
máximo y medio caracterizan al espectro
de una única sustancia.

𝐴 = 𝑎𝑚 𝐶𝑚 ≡ 𝑦 = 𝑚𝑥 ; 𝑑𝑜𝑛𝑑𝑒 𝑏 ≈ 0

La ley de Bouger y Beer se aplica a

soluciones que tienen más de dos tipos
de sustancias absorbentes siempre y
cuando no haya interacción de las
diversas especies químicas. La
absorbancia total de un sistema de Fig. 1: Espectro de absorción del permanganato
componentes múltiples a una sola de potasio. Fuente: Fundamentos de química
analítica (Skoog).
 OBJETIVO Longitud Abs Abs
de onda K2Cr2O7 KMnO4
340 2.367 0.482
 Comprobar la ley de la aditividad
350 2.386 0.45
de absorbancias en un sistema 360 3.353 0.378
múltiple. 370 2.254 0.276
380 1.95 0.177
390 1.368 0.098
RESULTADOS 400 0.871 0.047
410 0.617 0.023
420 0.61 0.022
1.- DETERMINACIÓN DE LAS LONGITUDES 430 0.602 0.024
440 0.623 0.042
DE ONDA DE TRABAJO 450 0.604 0.073
Longitud de onda de 460 0.548 0.117
470 0.462 0.201
500 trabajo para KMnO4 y 480 0.363 0.29
mínima para K2Cr2O7 490 0.266 0.42
500 0.183 0.571
510 0.11 0.675
520 0.068 0.817
Longitud de onda de 530 0.036 0.835
360 540 0.017 0.812
trabajo para K2Cr2O7 y 550 0.007 0.786
mínima para KMnO4 560 0.002 0.51
570 0 0.475
Tabla 1. Absorbancias de cada compuesto 580 0 0.243
para la determinación del espectro de 590 0 0.113
600 0 0.097
absorción y λ de trabajo.

λ1

λ2

Gráfica 1. Espectros de absorción del K2Cr2O7 y KMnO4. Se señalan las longitudes de onda de trabajo.
2.- OBTENCIÓN DE LAS ABSORTIVIDADES 1
𝐶𝑚 = 𝑀 ∗ 𝐹𝐷 ; 𝐶𝑚 = 0.0016 ∗
MOLARES DE CADA COMPONENTE A LAS 2
= 0.0008
DOS LONGITUDES DE ONDA
SELECCIONADAS (λ1 Y λ2) M: Molaridad de la solución

2.1.- OBTENCIÓN DE LAS CURVAS TIPO FD: Factor de la dilución

La concentración molar de las diluciones se

calculó de la siguiente forma, tomando como
ejemplo la dilución 1:2 de la solución de
K2Cr2O7 0.0016 M:

Tabla 2. Concentraciones molares y absorbancias a las longitudes de onda (λ) 1 y 2

respectivamente de las soluciones utilizadas. Con estos datos se construyen las curvas tipo para
calcular la absortividad molar.
Concentración
Compuesto Dilución A 360 A500
molar
01:07 0.000228 0.515 0.028
01:06 0.00026 0.599 0.038
01:05 0.00032 0.707 0.035
K2Cr 2O7
01:04 0.0004 0.872 0.052
01:03 0.00053 1.142 0.083
01:02 0.0008 1.542 0.106
01:07 0.000057 0.051 0.074
01:06 0.000066 0.055 0.092
KMnO4 01:04 0.0001 0.086 0.139
01:03 0.00013 0.118 0.186
01:02 0.0002 0.181 0.278

Gráfica 2. Curva tipo de la Concentración de K2Cr2O7 (M) medida a dos

longitudes de onda: 360 nm (λ1) y 500 nm (λ2).
 Gráfica 2. Curva tipo de la Concentración de KMnO4 (M) medida a dos
longitudes de onda: 360 nm (λ1) y 500 nm (λ2).

2.2.- CÁLCULOS DE LA ABSORTIVIDAD 3.- COMPROBACIÓN DE LA LEY DE LA

MOLAR ADITIVIDAD EN UN SISTEMA MÚLTIPLE

La ecuación de Bouger y Beer es análoga Tabla 4. Preparación de las mezclas para

a la ecuación de la recta, donde l la comprobación de la ley de aditividad.
absortividad es el valor constante; la
Mezcla K2Cr2O7 KMnO4 H2SO4 H2O
pendiente de la recta: 0.0016 M 0.0004 M 0.5 M (mL)
(mL) (mL) (mL)
𝐴 = 𝑎𝑚 𝐶𝑚 ≡ 𝑦 = 𝑚𝑥 ; 𝑑𝑜𝑛𝑑𝑒 𝑏 ≈ 0
1 5.0 1.0 0.2 3.8
Así, se han seleccionado los valores de la 2 2.5 2.5 0.2 4.8
pendiente de la recta más altos (𝑎𝑚 ) para 3 1.0 5.0 0.2 3.8
cada compuesto para el cálculo de Prob. ¿? ¿? - -
concentraciones posteriores:

Tabla 3. Valores de 𝑎𝑚 para K2Cr2O7 y

KMnO4 a λ1 y λ2.

Compuesto Absortividad molar

λ1
K2Cr2O7 1799.3 L mol-1
KMnO4 230.22 L mol-1
λ2
K2Cr2O7 142.03 L mol-1
KMnO4 1417.8 L mol-1