UNIVERSIDAD DE LAS FUERZAS ARMADAS – ESPE

CÓDIGO: SGC.DI.505
VERSIÓN: 1.0
DEPARTAMENTO DE CIENCIAS DE LA VIDA Y LA AGRICULTURA FECHA ULTIMA
REVISIÓN: 26/10/16

CARRERA:

GUÍA PARA LAS PRÁCTICAS DE LABORATORIO, TALLER O CAMPO

PERIODO 5to
ASIGNATURA: Genética Abril -Agosto 2018 NIVEL:
LECTIVO: Semestre
DOCENTE: Dra. Thelvia Ramos NRC: 4321 PRÁCTICA N°: 1
LABORATORIO DONDE SE DESARROLLARÁ LA
Laboratorio de Docencia
PRÁCTICA:

TEMA DE LA ESTUDIO DE LOS CROMOSMAS HUMANOS EN CÉLULAS EN

PRÁCTICA: INTERFASE: CROMATINA SEXUAL

INTRODUCCIÓN:

En el año 1949, dos investigadores Barr y Bertran, observaron diferencias entre losnúcleos de las células de tejido
nervioso de los animales sobre los que realizaban sus experimentos. A partir de esta observación, se vio la presencia de
uno de los cromosomas X en el sexo femenino.
La muestra se obtiene de raspado de la mucosa bucal, la coloración puede realizarse con colorantes habituales y la
observación bajo microscopio común.
En el núcleo se observa una pequeña masa heterocromática, en forma convexa con uno de sus lados como fijado a la
envoltura nuclear que se tiñe más intensamente.

Cuerpo Barr

OBJETIVOS:

 Desarrollar una de las formas de identificación de los cromosmas humanos en células en interfase: cromatina sexual
 Identificar los Corpúsculo o cuerpo Barr: Cromosomas X, que completa su replicación más tarde que su homólogo,
 Aplicar la fórmula para # cuerpos Barr = # cromosomas X – 1 y realizar el conteo en 100 células aproximadamente.

MATERIALES:

REACTIVOS:
INSUMOS:
- alcohol etílico
-Depresor lingual.
- ácido acético al 45%. - cubreobjetos y portaobjetos.
- ácido clorhídrico - papel de aluminio
- acetorceina - papel de filtro de filtración rápida
- agua destilada - erlenmeyer Pairet
-

EQUIPOS:
 UNIVERSIDAD DE LAS FUERZAS ARMADAS – ESPE
CÓDIGO: SGC.DI.505
VERSIÓN: 1.0
DEPARTAMENTO DE CIENCIAS DE LA VIDA Y LA AGRICULTURA FECHA ULTIMA
REVISIÓN: 26/10/16

CARRERA:

- baño de Maria.
- Microscopio óptico.

MUESTRA:
Raspado de la mucosa bucal humana.

INSTRUCCIONES:

- Utilice ropa de protección: mandil, guantes, cabello recogido, zapato cerrado.

ACTIVIDADES POR DESARROLLAR:

1. SOLUCIÓN DE ACETORCEINA
1.- Pesar 1g de orceina y lo disuelves en 45 ml de ácido ascético glacial se tapa con papel de aluminio doble y se le
introduce un agitador de vidrio por un orificio q abres en la tapa

2.- Verter en un erlenmeyer Pairet y lo pones al baño de María dentro de un recipiente colocado sobre un
mechero durante 45 minutos.

3.- Cada cierto tiempo se mueve el agitador para ayudar a disolver el colorante. Cuando pasa los 45 min lo bajas lo
dejas enfriar y lo filtras con un papel de filtro de filtración rápida esto es importante si los poros del papel son muy
pequeños no resulta y se obtiene la solución madre,
Nota: Cada vez q vas a trabajar vuelves a filtrar ; 1 ml de solución madre con 1ml de agua
2. Practica de laboratorio:
- Se obtienen células epiteliales del interior de la mucosa oral, raspando suavemente la parte interna de la mejilla con un
depresor de metal (con una espátula).
- Lavar perfectamente el cubreobjetos y portaobjetos con una mezcla de alcohol etílico y ácido acético al 45%.
- Depositar el material en el portaobjetos y hacer un frotis. Colocar la muestra obtenida en un portaobjetos limpio y
seco, haciendo un frotis o extendido sobre el mismo portaobjetos (la muestra que tienes en la espátula y se extiende en
el porta objeto), deja secar la muestra por unos minutos.
- Después de este tiempo saca la muestra y déjala secar al aire.
- Etiquetar el portaobjetos según sea el origen de la muestra (hombre o mujer).
- Agregar una gota de ácido clorhídrico y dejar reposar por 20 minutos.
- Absorber el ácido con una toalla de papel.
- Una vez seca la preparación, agrega una o dos gotas de acetorceina (Ver preparación del reactivo).
- Lavar con ácido acético y dejándolo gotear sobre el portaobjeto inclinado. Enjuagar con agua destilada.
- Cubre con el cubreobjetos y espera aproximadamente 15 minutos (secas el exceso con papel de filtro.
- Observe con el objetivo de 40X localizando las células epiteliales y posteriormente con el objetivo de 100X, procura que
se coloque una gota de aceite de inmersión entre la preparación y el objetivo de 100X.
- Localiza los núcleos de las células y observa cuidadosamente. Los cuerpos de Barr son corpúsculos pequeños que miden
de 1 a 1.5 micras, son de forma convexa y plana que se localizan muy próximos a la cara interna de la membrana
nuclear.

RESULTADOS OBTENIDOS:

Se indicará los resultados que debe obtener o presentar el estudiante, por ejemplo:
- Conteo de los corpúsculos de Barr en 100 células y establecer según la formula la cantidad de los mismos que fueron
leídos por cada estudiante.
- Evidenciar con foto.
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CÓDIGO: SGC.DI.505
VERSIÓN: 1.0
DEPARTAMENTO DE CIENCIAS DE LA VIDA Y LA AGRICULTURA FECHA ULTIMA
REVISIÓN: 26/10/16

CARRERA:

- Elabore un informe de la práctica realizada

-
CONCLUSIONES:

Esta práctica de laboratorio permite que los estudiantes identifiquen uno de los cromosmas humanos en células en
interfase: cromatina sexual. Es una técnica rápida y sencilla, Puede realizarse en núcleos interfásicos. No requiere de cultivo de
células. Da el estado de los cromosomas sexuales de forma inmediata.
Pueden integrar los conocimientos básicos con respecto a la identificación y caracterización de los cromosomas y entender
procesos como la Inactivación del Cromosoma X.
.

RECOMENDACIONES:

FIRMAS

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Nombre: Dra. Thelvia Ramos Nombre: Valeria Ochoa Nombre: Patricia Jimenez
COORDINADOR DE ÁREA DE COORDINADOR DE LABORATORIOS
DOCENTE CONOCIMIENTO