14.

DEMANDA BIOQUIMICA DE OXIGENO

14.1. RESUMEN

Objetivo: Medir la cantidad de la materia orgánica biodegradable en aguas

residuales
 Preparar el agua de dilución
 Preparar semillas
 preparar el inóculo bacteriano del agua de dilución
 realizar diluciones de aguas residuales a ser probado
 Agregar semillas bacterianas
 Medir la cantidad de oxígeno en las diluciones
 incubar las muestras durante 5 días a 20 °C y se mide la cantidad de oxígeno
restante
 Calcular la cantidad de DBO5

14.2. TEORIA Y SIGNIFICADO

Uno de los principales objetivos de tratamiento de aguas residuales es reducir el

contenido orgánico de las aguas residuales. Con el fin de evaluar la eficacia de los
procesos de tratamiento de aguas residuales, un método para medir la cantidad de
contenido orgánico que ha sido retirado es la medición de la demanda bioquímica
de oxígeno (DBO) es uno de los métodos más importantes usados por los
reguladores y plantas de tratamiento para evaluar la eficacia de tratamiento de
aguas residuales en la reducción de contenido orgánico (Bitton, 1999).

Bioquímica (o biológico) la demanda de oxígeno es la cantidad de oxígeno disuelto

en agua que se consume por los microorganismos para la oxidación bioquímica de
materia orgánica e inorgánica. La cantidad de oxígeno que se consume puede dar
una idea aproximada de la cantidad de materia orgánica que queda en el agua. Si
la cantidad de oxígeno siendo utilizado por organismos para la oxidación de la
materia se reduce después del tratamiento de aguas residuales, se asume que el
contenido orgánico ha disminuido también. Por lo tanto, DBO es una medida útil de
la efectividad del tratamiento de aguas residuales. El tratamiento convencional
elimina hasta el 95% de la DBO en aguas residuales. Los valores de DBO también
se utilizan para evaluar el impacto que las descargas de aguas residuales tendrán
sobre las aguas receptoras. Por ejemplo, la descarga de aguas residuales con alta
carga de DBO podría agotar el oxígeno disuelto en las aguas receptoras, dañando
a los peces y otros organismos ya en las aguas receptoras.
NOTA: DBO Total es la suma de los dos tipos de DBO: nitrogenados y carbonosas. DBO Carbonasas es la
cantidad de oxígeno utilizada por una población mixta de microorganismos heterotrófica para oxidar los
compuestos orgánicos. DBO Nitrogenado es la cantidad de oxígeno utilizada por bacterias autotróficas para
oxidar NH+ 4 en nitrato. DBO nitrogenado interfiere con las mediciones de la demanda de oxigeno asociada
con el contenido orgánico. Por lo tanto, al medir la DBO carbonosa, se añade un (2-cloro-6- (triclorometil)
piridina) químico al agua para inhibir la BOD nitrogenada (Tubos y Zmuda, 1997; APHA, 1998).

Tabla 14.1 Valores de DBO típicos para diferentes tipos de aguas residuales

BOD se mide como BOD 5, la demanda de oxígeno durante un período de

incubación de 5 días. BOD en el agua residual a menudo excede el oxígeno disuelto
disponible en el agua. Por lo tanto, las muestras deben ser diluidas en una solución
de fosfato neutro. Si el agua ha sido tratada con cloro, el cloro debe ser neutralizado
para que la población microbiana sobrevivirá. El oxígeno disuelto en muestras
diluidas (cinco diluciones se recomienda) se mide con un electrodo de membrana o
por el método de Winkler, que implica la titulación. Las muestras se sellaron en
botellas y se incubaron a 20 ° C durante 5 días. En el día 5, el oxígeno disuelto se
mide de nuevo. BOD 5 a continuación, se puede calcular usando uno de dos
ecuaciones, dependiendo de si el agua requiere siembra o no.
 14.3. PROCEDIMIENTO

A. PRIMER PERIODO

Materiales
 Incubadora oscura a 20 ° C
 2L vaso de precipitados de agua destilada
 20 pipetas de 10 ml

Figura 14-1 frascos de DBO utilizados en este experimentoo ( Foto cortesía KJ, J
osephson).
 (HACH) Sobres de tampón de nutrientes (tampón que contiene fosfato
y nutrientes)
 9 botellas de DBO 60-ml
 Electrodo de membrana para medir el oxígeno disuelto
 Inoculador de semillas DBO (Polyseed)
 2-cloro-6- (triclorometil) piridina (TCMP)
 Retire la placa y retire la pastilla
 Vaso precipitado de 500ml
 kit de prueba de cloro, Libre y Total, modelo CN-80
 reactivo de cloro total DPD
 tiosulfato de sodio 0,1%

Preparación de las muestras

1. Para hacer la dilución de agua, añadir el número correcto de tampón de
nutrientes a 2L de agua destilada.
 2. Tomar 10 ml de muestra de agua y colocar en el tubo, el kit de prueba de
cloro Hach.
3. Añadir reactivo DPD al tubo. Siga las instrucciones del kit a determinar el
cloro residual en el agua.
4. Basado en el cloro residual, determinar la cantidad de tiosulfato de sodio 2
0.1N (Na2S2O3) necesaria para neutralizar el cloro en la muestra.
5. Agregar el volumen necesario de (Na2S2O3) a la muestra de agua.
6. Si el agua es agua clorada, necesita ser sembrada

Cálculo:
𝑹𝑺
𝐦𝐥 𝐝𝐞 (𝐍𝐚𝟐𝐒𝟐𝐎𝟑) 𝐧𝐞𝐜𝐞𝐬𝐚𝐫𝐢𝐨 =
(𝟑𝟓. 𝟒𝟓𝟎)(𝐍)

Donde:

R = residual de cloro en mg / L
S = volumen de muestra de agua en ml
N= normalidad del (Na2S2O3)
35.450 peso molecular en mg / L de cloro

Para agua que requiere de siembra:

1. Para hacer una solución de siembra, romper la cápsula 1 Polyseed

inóculo y añadir contenidos a 500 ml de agua de dilución. Agitar durante
60 min (Figura 14-2)
2. Colocar 10, 15, 20, y 25 ml de solución de siembra en 4 frascos de
DBO. Llevar el volumen en cada botella hasta 60 ml con agua de
dilución (Figura 14-3).
3. Preparar la dilución vacía, llenar 5 frascos de DBO con 52ml de cada
uno de dilución de agua. Asegúrese de que no hay oxígeno disuelto en
el agua agitando cada frasco vigorosamente (Figura 14-4).
4. Para hacer diluciones, añadir 6 ml de la muestra a la primera botella de
DBO. Realizar diluciones en serie mediante la transferencia de 6ml de
cada botella a la próxima botella (Figura 14-5).
5. Añada 2 ml de la solución de semillas para cada botella de muestra
(Figura 14-4).
6. Calibrar el electrodo de membrana de acuerdo con las instrucciones del
fabricante.
7. Medir el oxígeno disuelto en cada una de las semillas y la botella de
muestreo con un electrodo de membrana dentro de los 30 minutos
antes de hacer la dilución.
 8. Si es necesario, agregue más agua de dilución para rellenar las
botellas en la parte superior, eliminando cualquier tipo de espacio de
aire.
9. Envolver botellas en papel de aluminio para bloquear la luz y se incuba
a 20 ° C durante 5 días.
Para agua que no requiere de siembra.
1. Colocar 300 ml de agua de dilución en un vaso de precipitados. Agregar 3mg
de TCMP.
2. Preparar la dilución vacía, llenar 5 frascos de DBO con 54 ml de cada una de
las diluciones agua preparada en el paso 1. Asegúrese de que no hay
oxígeno disuelto en el agua agitando cada frasco vigorosamente.
3. Medir el cloro residual como se ha descrito anteriormente y neutralizar la
muestra de agua con la cantidad correcta de tiosulfato sódio.
4. Para hacer diluciones, añadir 6 ml de la muestra a la primera botella. Realizar
diluciones en serie mediante la transferencia de 6ml de cada botella a la
siguiente botella.
5. Medir el oxígeno disuelto en cada botella con una membrana electrodo según
las instrucciones del fabricante dentro de 30 min de hacer la dilución.
6. Si es necesario, agregue más agua de dilución para rellenar las botellas en
la parte superior, eliminando cualquier tipo de espacio de aire. Sellar las
botellas herméticamente.
7. Envolver botellas en papel de aluminio para bloquear la luz y se incuba a 20
° C durante 5 días.

B. SEGUNDO PERIODO
Materiales

 Electrodo de membrana
 Frascos de DBO que se incubaron durante cinco días, DBO5.

1. Abrir cada botella y medir el oxígeno disuelto con el electrodo de

membrana.

14.4. TRUCOS DEL OFICIO

HACER:
• Asegúrese de que usted no deje ninguna burbuja de aire en los frascos
de DBO cuando se coloca el tapón en la botella.
 14.5. PELIGROS POTENCIALES

• Recuerde que las aguas residuales domésticas (aguas residuales)

pueden contener microorganismos patógenos, incluso después de la
desinfección.

14.6. CÁLCULOS

Para el cálculo de la DBO 5, utilizar las botellas que tienen un valor final de
oxígeno disuelto de al menos 1 mg / L y un agotamiento del oxígeno disuelto
𝑚𝑔
de al menos 2,0 mg /L durante 5 días (𝐷1 − 𝐷2 > 2.0 ⁄𝐿).

Para agua no sembrada.

mg (D1 − D2 )
DBO5 ( ⁄L) =
P
Donde:
D1 = primer oxígeno disuelto (mg/L) en la muestra diluida
D2 = el oxígeno disuelto (mg/L) en la muestra diluida después de 5 días de
incubación
P = la fracción volumétrica decimal de muestra utilizada (Ejemplo: 10 3
dilución = 1/103, o 0.001).

Ejemplo:

La dilución 1: 100 tiene los siguientes valores:

Oxígeno disuelto inicial = 4,2 mg /L

Oxígeno disuelto después de 5 días = 1,3 mg / L.
𝑚𝑔
Por lo tanto, D1 = 4.2 𝐿 , D2 = 1.3 𝑚𝑔/𝐿, y P= 1/100, o 0.001.
DBO5 = (4.2 - 1.3) / 0.01 = 290 mg/L
Si el agua es siembra, la DBO de la siembra debe tenerse en cuenta DBO5.

El agua sembrada está dada por la ecuación:

mg (D1 − D2 ) − (𝐵1 − B2 )⨍
DBO5 ( ⁄L) =
P

Donde:
D1 = primer oxígeno disuelto (mg/L) en la muestra diluida
D2 = el oxígeno disuelto (mg/L) en la muestra diluida después de 5 días de
incubación.
P = la fracción volumétrica decimal de muestra utilizada
B1 = primer oxígeno disuelto (mg/L) en la muestra diluida
B2 = el oxígeno disuelto (mg/L) en la muestra diluida después de 5 días de
incubación
𝑓 = volumen de solución de siembra en la muestra de agua, dividido por el
volumen de la siembra en el control de siembra que tiene un valor de oxígeno
disuelto final de al menos 1mg/L y un agotamiento del oxígeno disuelto de al
𝑚𝑔
menos 2,0 mg / L durante 5 días (𝐵1 − 𝐵2 > 2.0 ⁄𝐿).

Ejemplo:

La dilución 1:10 de la muestra tiene los siguientes valores:

Oxígeno disuelto inicial = 4,2 mg/L

Oxígeno disuelto después de 5 días = 1,1 mg/L,
Por lo tanto, D1 = 4,2 mg/L, D2 = 1.1mg/l y P = 1/10, o 0.1.

El frasco que contiene 10 ml de solución de semilla tiene los siguientes

valores:

Oxígeno disuelto inicial = 2,4 mg /L

Oxígeno disuelto después de 5 días = 2,4 mg /L
Por lo tanto, B1 = 2.4mg/L, B2= 1.0 mg/L

𝑣𝑜𝑙𝑢𝑚𝑒𝑛 𝑎𝑔𝑟𝑒𝑔𝑎𝑑𝑜 𝑎 𝑙𝑎
𝑚𝑢𝑒𝑠𝑡𝑟𝑎 𝑑𝑒 𝑎𝑔𝑢𝑎 𝑑𝑒 𝑠𝑖𝑒𝑚𝑏𝑟𝑎 2𝑚𝑙
𝑓= = = 0.2𝑇
𝑣𝑜𝑙𝑢𝑚𝑒𝑛 𝑑𝑒 𝑙𝑎 𝑠𝑖𝑒𝑚𝑏𝑟𝑎 𝑒𝑛 𝑙𝑎 𝑏𝑜𝑡𝑒𝑙𝑙𝑎 𝑑𝑒 10𝑚𝑙
𝑠𝑜𝑙𝑢𝑐𝑖𝑜𝑛 𝑑𝑒 𝑠𝑖𝑒𝑚𝑏𝑟𝑎 𝑢𝑡𝑖𝑙𝑖𝑧𝑎𝑑𝑎 𝑝𝑎𝑟𝑎 𝑒𝑙 𝑐𝑎𝑙𝑐𝑢𝑙𝑜

mg (4.2 − 1.1) − (2.4 − 1.0)0.2

DBO5 ( ⁄L) = = 28.2
0.1

14.7. Preguntas y problemas

1. El principal objetivo del tratamiento es reducir la cantidad de

carbono biodegradable. ¿Por qué es esto necesario?
2. ¿Cuál es la DBO nitrogenada? ¿Lo que se añade a la muestra
de prueba para inhibir la DBO nitrogenada?
3. ¿Por qué usted necesita neutralizar el cloro antes de una
prueba de DBO?
 4. ¿Por qué es necesario diluir las muestras con altos niveles de
DBO esperado?
5. ¿Por qué es importante no dejar burbujas de aire en los frascos
de DBO durante la incubación?

14.8. REFERENCIAS
Asociación Americana de Salud Pública (1998) Métodos estándar para el examen
de agua y aguas residuales, 20 º edition.Washington, DC.

Bitton, G. (1999) Aguas residuales Microbiología, 2 Dakota del Norte edition.Wiley-

Liss, Nueva York.

Pipes, W., y Zmuda, J. (1997) Evaluación de la deficiencia de tratamiento de aguas

residuales. En: Manual de Microbiología Ambiental, 2 Dakota del Norte edición.
2002. J. Hurst, G. Knudsen, M. McInerney, L. Stetzenbach, y M. Walter, eds., Pp.
285-299. ASM Press, Washington, DC.