Química Analítica

Química Analítica e Instrumental

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Espectrofotometría Absorción Atómica – Método de calibración por agregado patrón

Espectrofotometría de Absorción Atómica por llama

Los principios de la espectroscopia de absorción atómica fueron establecidos en la segunda

mitad del siglo XIX por Robert Wilhelm Bunsen y Gustav Robert Kirchhoff, ambos profesores
de la Universidad de Heidelberg, Alemania. La forma moderna fue desarrollada en gran parte
durante la década de 1950 por un equipo de químicos australianos, dirigidos por Sir Alan
Walsh en la Commonwealth Scientific and Industrial Research Organisation (CSIRO),
División de Química Física, en Melbourne, Australia.

Las técnicas atómicas son de gran importancia para la química analítica dada su gran
sensibilidad, su capacidad para distinguir un elemento de otro en muestras complejas, así
como la factibilidad de automatización y realización de un gran número de análisis en poco
tiempo utilizando pequeñas cantidades de muestra.
Las técnicas de absorción atómica se utilizan para la cuantificación de metales y algunos
metaloides, dependiendo del método de atomización de la muestra cambian los límites de
detección. Si el método de atomización es por llama se pueden determinar concentraciones
del orden de partes por millón (ppm) en cambio sí es atomización electrotérmica (horno de
grafito) el orden puede llegar a las partes por billón (ppb). Para la técnica de llama se utiliza
un nebulizador con el fin de generar una niebla de la muestra que será arrastrada por la
corriente del comburente para llegar al quemador donde se produce la llama.
Se utilizan lámparas de cátodo hueco (Hollow Cathode Lamp o HCL) construidas con el
analito en estudio, la cantidad de luz absorbida después de pasar a través de la llama
determina la cantidad de analito existente en la muestra. En ciertos rangos se cumple la Ley
de Beer, dependiendo principalmente del analito en estudio y las condiciones de trabajo.
Es una técnica muy dependiente de las condiciones de trabajo.

Método de Calibración por Agregado Patrón o Adición de Estándares:

El método de agregado patrón o adición de estándares consiste en añadir sobre la muestra

problema cantidades crecientes conocidas de patrón de analito. De esta manera, todas las
medidas se realizan sobre la misma matriz, a diferencia del método de calibración directa
(utilizado en esta materia, en el TP de Fotometría de Llama).

DEFINICIONES:
Una curva de calibración representa la respuesta de un equipo (señal detectada) ante
muestras patrón o estándar con concentraciones conocidas de analito.
Las soluciones que contienen todos los reactivos y solventes utilizados menos el analito que
se quiere determinar se llaman soluciones blanco o simplemente blancos. Se utilizan para
estimar la respuesta del equipo ante cualquier estímulo que no sea la presencia del analito.

El método de calibración por agregado patrón es especialmente apropiado cuando la

composición de la muestra es desconocida o compleja y afecta a la señal analítica. La matriz
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es todo lo que hay en la muestra además del analito y su señal se define como el EFECTO
MATRIZ.
Los supuestos del método del agregado patrón son:
 El agregado de la solución patrón no modifica el efecto matriz, estos son los mismos
en la solución original y en la diluida.
 La respuesta del detector es lineal.
 Todas las mediciones tienen la misma desviación estándar (sin importar el valor)

Al representar la señal experimental en función de la concentración de analito añadida

resulta una recta a partir de cuya pendiente y ordenada al origen se obtiene la concentración
de la muestra problema. El procedimiento se demuestra e ilustra en la siguiente figura:

Una vez obtenida la ecuación de la recta, se extrapola hasta señal cero y se despeja la
concentración de analito en la muestra después de diluir (tener en cuenta el factor de
dilución por el agregado patrón).
El intervalo más útil para el empleo de esta técnica de calibrado es cuando la señal analítica
aumenta entre 1,5 y 3 veces el valor original por la presencia de los agregados.

Desarrollo del Trabajo Práctico:

Siguiendo la norma APHA 3111 (METALS BY FLAME ATOMIC ABSORPTION

SPECTROMETRY*#(75)) se trabajará en la determinación de plomo y cromo en una muestra
de un efluente industrial tratado.

Se recibe de la cátedra una muestra para analizar el contenido de plomo y cromo por
Espectrometría de Absorción Atómica utilizando el metódo de calibrado por agregado patrón.
Se preparan 6 matraces aforados de 10,0 mL. A cada matraz limpio, se le agrega 1,00 mL de
la muestra en estudio y volúmenes crecientes del patrón multielemental (15 mgPb/L –

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10mgCu/L), luego se enrasa con agua destilada. Finalmente, cada matraz contiene la misma
concentración de muestra problema y diferentes concentraciones del patrón.

Volumen final Volumen de Volumen de Concentración Concentración

muestra patrón final de cobre final de plomo
multielemental (patrón) (patrón)
10,0 mL 1,00 mL 0
10,0 mL 1,00 mL 1,00 mL
10,0 mL 1,00 mL 2,00 mL
10,0 mL 1,00 mL 5,00 mL
10,0 mL 1,00 mL 7,00 mL
(2mL+5mL)

Se miden las muestras por Espectrometría de Absorción Atómica por llama, utilizando la
lámpara de cátodo hueco correspondiente y el equipo GBC-XPLORAA disponible en la
cátedra. Se obtienen los datos en formato digital de manera tal de poderlos graficar
posteriormente y también realizar su análisis mediante el empleo del software del equipo,
utilizando el modo de calibración correspondiente.
Una vez obtenidos los datos se grafican, en sendas curvas, la señal vs la concentración final
del patrón añadido (después de haber sido mezclado con la muestra, o sea, el patrón
diluido). Se extrapolan las señales a cero y, considerando el factor de dilución, se calculan
las concentraciones de níquel y de cobre en la muestra.
Se informan los resultados con los intervalos de confianza correspondientes.

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