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PRÁCTICA 2
Reducción del contenido de ácidos nucleicos en proteína unicelular
Practica 2
1.Introducción
2. Resultados
a) Tabular los resultados de concentración de proteínas y RNA en las células antes y después del
tratamiento térmico y alcalino, así como la concentración celular con la que se trabajó.
a) Para la proteína
Para calcular la concentración de proteína en cada una de las muestras se parte de la absorbancia
del estándar (albumina) utilizado de 5 mg/mL, se consideró la función inversa de la pendiente de
la gráfica que se obtendría al graficar los resultados, para evitar graficar los datos se tomó en
cuenta lo siguiente:
𝐴𝑏𝑠𝑜𝑟𝑏𝑎𝑛𝑐𝑖𝑎 𝑑𝑒 𝑙𝑎 𝑚𝑢𝑒𝑠𝑡𝑟𝑎 𝑉𝑜𝑙𝑢𝑚𝑒𝑛 𝑑𝑒𝑙 𝑒𝑠𝑡á𝑛𝑑𝑎𝑟
[Proteína] = * Concentración del estándar*
𝐴𝑏𝑠𝑜𝑟𝑏𝑎𝑛𝑐𝑖𝑎 𝑑𝑒𝑙 𝑒𝑠𝑡á𝑛𝑑𝑎𝑟 𝑉𝑜𝑙𝑢𝑚𝑒𝑛 𝑑𝑒 𝑚𝑢𝑒𝑠𝑡𝑟𝑎
Por otro lado, para calcular el porcentaje de proteína respecto a la concentración celular inicial de
79.8 g/L se tiene:
Y para obtener el porcentaje de pérdida de proteína con respecto al tratamiento térmico alcalino
se obtiene a partir del siguiente cálculo.
En este caso para el cálculo de la concentración de RNA se toma en cuenta la dilución que se hizo
para medir la absorbancia, la concentración de RNA estándar de 0.5 mg/mL y el volumen que fue
el mismo para ambos.
𝐴𝑏𝑠𝑜𝑟𝑏𝑎𝑛𝑐𝑖𝑎 𝑑𝑒 𝑙𝑎 𝑚𝑢𝑒𝑠𝑡𝑟𝑎
[RNA] = * Concentración del estándar* Dilución
𝐴𝑏𝑠𝑜𝑟𝑏𝑎𝑛𝑐𝑖𝑎 𝑑𝑒𝑙 𝑒𝑠𝑡á𝑛𝑑𝑎𝑟
Y para calcular el porcentaje de RNA respecto a la concentración celular inicial de 79.8 g/L y el
porcentaje de pérdida de RNA se tiene:
Proteína RNA
80
70
60
% de reducción y pérdida
50
40
30
20
10
0
0 1 2 3 4 5 6
Concentración de NaOH (%)
Gramos de levadura de panificación para preparar 500 mL de una suspensión de 70g/L, considerando que la levadura tiene el 70% de humedad
70 g Levadura ----------- 1000 mL L a levadura tiene 70% de humedad, esto es que: Se tomó 1 mL de la suspensión y se diluyó 1:250
35 g levadura < --------- 500 mL 100 g de Levadura ---------- 30 g Levadura se leyó la absorbancia a 600 nm obteniendo A= 0.380
116.6 g de levadura <-------- 35 g de Levadura Sabiendo que 1 Ab ------ 0.84 g/L 0.380 Abs = 0.3192
a) Resultados del contenido de proteína en la levadura tratada y sin tratar con NaOH
b) Resultados del contenido de RNA en la levadura tratada y sin tratar con NaOH
En esta
4. Conclusiones
5. Bibliografía
[2] Jagnow, H y Dawid, W. Biotecnología. Introducción con experimentos modelo. Acribia, S.A.
Zaragoza, 1991.