UNIVERSIDAD RICARDO PALMA

FACULTAD DE MEDICINA HUMANA

FAMURP

FACTORES QUE AFECTAN LA ACTIVIDAD

ENZIMÁTICA

CURSO : BIOQUIMICA Y NUTRICION

PROFESOR : CECILIA ROJAS GUERRERO

ALUMNOS : Morán Madrid, Josué

Navarro Yparraguirre, Madelaine
Quispe Manrique, Nadia
Perez, Nataly

GRUPO : 1-5

MESA : 2

SURCO – 2018
1. Usando los valores de la actividad enzimática(D.O) obtenidos, Grafique:

EFECTO DEL PH

TUBO Nro. 1 2 3 4 5 B
PH 1.0 1.5 6.0 9.5 11.5
Lectura 0.225 0.198 0.284 1.236 1.223 1.442
Actividad enzimática 1.217 1.244 1.158 0.206 0.219 -

1.4
1.236 1.223
1.2
Actividad enzimática

0.8

0.6

0.4 0.284
0.225
0.198
0.2

0
0 2 4 6 8 10 12 14
pH

INTERPRETACIÓN

En la gráfica podemos apreciar que a un determinado Ph la actividad enzimática alcanza un pico, luego se
observa una disminución en la actividad enzimática. Con lo cual se puede concluir que la enzima actúa hasta
determinado pH luego del cual ya comienza a desnaturalizarse y por ende a perder efecto sobre el sustrato.
A pesar de haber errores, los cuales pueden haber sido debido a errores en la medición de los componentes (HCl,
albumina, etc), aún se puede apreciar el objetivo de la gráfica.

EFECTO DE LA [E]

TUBO Nro. 1 2 3 4 B
Pepsina incubada 0.5 1.0 2.0 3.0 0.0
Lectura 1.055 0.130 0.230 0.075 1.204
Actividad enzimática 0.149 0.074 0.974 1.129 -
 1.2 1.129

0.974
1

Actividad enzimática 0.8

0.6

0.4

0.149
0.2
0.074

0
0 0.5 1 1.5 2 2.5 3 3.5

[E]

INTERPRETACIÓN

En la gráfica se observa un error con respecto a los datos del tubo 2, el cual se puede atribuir a un error durante el
procedimiento, pero el objetivo de la gráfica es demostrar que la concentración dela enzima es directamente
proporcional a la actividad enzimática. A pesar de algunos errores, aún se puede concluir con la gráfica la relación
entre concentración de enzima y actividad enzimática.

EFECTO DE LA T°

TUBO Nro.(1° serie) 1a 2ª 3a 4a 5ª Blanco

Albúmina : ml 5.0 5.0 5.0 5.0 5.0 5.0
HCl 1N : ml 0.5 0.5 0.5 0.5 0.5 -
Agua dest. : ml 3.5 3.5 3.5 3.5 3.5 4.0
TUBO Nro.(2° serie) 1b 2b 3b 4b 5b
Pepsina 1% : ml 1.0 1.0 1.0 1.0 1.0
TUBO Nro. 1a-1b 2a-2b 3a-3b 4a-4b 5a 5b
 T°.C° 0°C T°amb 37° 70° 37° 100°
Absorbancia 0.223 0.104 0.106 0.143 0.120 0.563
Actividad Enzimatica 0.33 0.46 0.45 0.42 0.44

0.7
Actividad Enzimatica
0.6
0.5
0.4
0.3
0.2
0.1
0
0 20 40 60 80 100 120
Temperatura

En el grafico obtenido en el experimento el cual esta expresado por la línea azul vemos un resultado diferente al
esperado, esto nos indica algún error en el procedimiento y no nos permite apreciar bien en cambio de la actividad
enzimática con la variación de la temperatura.
La grafica de color rojo es la gráfica que se esperaba (teniendo en cuenta que se tomaron valores aleatorios para
representarla) en la cual podemos apreciar como la variación de temperatura influye en la actividad de la enzima,
en este caso la pepsina. Como vemos la pepsina aumenta su actividad enzimática con un aumento de la
temperatura, pero solo hasta cierto punto pues después el sucesivo aumento de temperatura desnaturaliza a la
enzima deteniendo su actividad.

EFECTO DE LA [S]
 La actividad enzimática es directamente proporcional al sustrato, es por esto que aumenta de manera se
incrementa el sustrato hasta el punto en el cual se saturan los sitios activos y se genera una hipérbole.

2. Determine los valores del Km y Vmax de una inhibición competitiva y no competitiva de una enzima que mostró los
siguientes datos experimentales:

⁅S⁆ V1, sin V2, con inhibidor

( mM ) inhibidor (mmol.min-1)
(mmol.min-1)

3,0 4,58 3,66

5,0 6,4 5,12
7,0 7,72 6,18
9,0 8,72 6,98
11,0 9,5 7,60
 Invertimos los valores para reconocer el comportamiento de la reacción :

1 /⁅S⁆ 1 /V1, sin 1 /V2, con

( mM ) inhibidor inhibidor
(mmol.min-1) (mmol.min-1)
0.33 0.22 0.27
0.20 0.16 0.20
0.14 0.13 0.16
0.11 0.11 0.14
0.09 0.10 0.13

Determinamos los valores de Km y Vmax

- Sin inhibidor

1 km
= 0.062 = 0.466
𝑣𝑚𝑎𝑥 vmax

𝑘𝑚
Vmax = 16.13 = 0.466
16.13

Km= 17.52

- Con inhibidor

1 km
= 0.078 = 0.584
𝑣𝑚𝑎𝑥 vmax

Vmax = 12.82
𝑘𝑚
= 0.584
12.82

Km= 7.49