El fundamento de la prueba de esterilidad consiste en establecer un procedimiento para valorar la

presencia o ausencia de microorganismos aerobios y/o anaerobios facultativos viables (bacterias,

hongos y levaduras) en cada producto final. Para realizar la prueba, se necesita más de un medio de
cultivo que demuestre tener propiedades nutritivas para favorecer el crecimiento (Caro y Cruz, 2006). Es
por esta razón que órganos reguladores como la USP y la International Pharmacopeia reportan los
siguientes medios para ejecutar estos ensayos: medio fluido de tioglicolato y soya tripticasa.

El medio soya tripticaseína (Tryptic Soy Broth, TSB) es un medio líquido para enriquecimiento de
uso general utilizado en procedimientos cualitativos para la prueba de esterilidad y para el
enriquecimiento y cultivo de microorganismos aerobios no exigentes en exceso. Debido a su capacidad
para favorecer el crecimiento, ésta fórmula fue adoptada por la Farmacopea de los Estados Unidos (USP)
y la Farmacopea Europea (EP) como medio de prueba de esterilidad.

En BD Tryptic Soy Broth, los digeridos enzimáticos de caseína y harina de soja proporcionan
aminoácidos y otras sustancias nitrogenadas complejas. La glucosa (dextrosa) es una fuente de
energía. El cloruro sódico mantiene el equilibrio osmótico. El fosfato potásico dibásico actúa
como tampón para controlar el pH..
Para verificar las propiedades nutritivas de cada medio de cultivo se utilizan cepas de microorganismos
muy exigentes visto desde el punto de vista de las necesidades nutritivas y de las condiciones de
aerobiosis-anaerobiosi

Según la Farmacopea Europea los recipientes inoculados debían ser incubados a 30-35ºC durante un
período máximo de 3 días. Para la práctica incubamos a 37ºC por un período de 7 días monitoreando
cada 24 horas los tubos. De cualquier forma la Farmacopea Europea indica que se debían airear los
recipientes ya sea aflojando ligeramente la tapa o introduciendo una aguja de jeringa estéril tapada con
algodón estéril. En nuestro caso, no aireamos los recipientes.