UNIVERSIDAD AUTÓNOMA DE NUEVO LEÓN

FACULTAD DE CIENCIAS BIOLÓGICAS

CURSO DE INGENIERÍA GENÉTICA
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EJERCICIOS, PROBLEMAS Y CASOS

FASE 2-CONTENIDO DE TEMA 6-8
SÍNTESIS DE ÁCIDOS NUCLEICOS

Nombre _________________________Matricula_________ Fecha ________

Realizar los ejercicios siguientes y enviarlos a través de la plataforma Nexus.
Traer el día de la clase (cuando se los indique el maestro) para su co-evaluación.

1) (30 puntos) Describir las etapas experimentales (diagrama del diseño experimental y
protocolos) para clonar en el vector pGEM-T, la secuencia codificante de la fitasa C de
Bacillus subtilis (GenBank No. AF029053) obtenida mediante PCR con los oligonucleótidos:

CAGCTCGAGAAAAGACTGTCCGATCCTTATCAT
TTTCCTAGGTTATTTTCCGCTTCTGTC

Además:
• Calcular el tamaño de la secuencia a clonar (6 puntos)
• Proponer una estrategia de caracterización del producto amplificado (7 puntos)
• Proponer una estrategia para la caracterización del plásmido (7 puntos)

1|2 © Ingeniería Genética, FCB, UANL, 2015

DRA. MARTHA GUERRERO OLAZARÁN DR. JOSÉ M. VIADER SALVADÓ MC EDDY LUZ CAB BARRERA Agosto 2015
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2) Para la clonación en el vector pGEM4Z de un fragmento de DNA digerido con la enzima

SalI se decidió desfosforilar el vector con la fosfatasa alcalina de Promega para evitar la
religación del mismo. Al realizar la ligación y transformación se obtuvieron 100 colonias
azules y no se obtuvieron colonias blancas.
• Reflexionar respecto al resultado obtenido y describir cuál(es) podría(n) ser la(s)
explicación(es) del resultado obtenido (10 pts).
• Diseñar una estrategia experimental que permita determinar dónde estuvo el problema
(40 pts).

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DRA. MARTHA GUERRERO OLAZARÁN DR. JOSÉ M. VIADER SALVADÓ MC EDDY LUZ CAB BARRERA Agosto 2015