TRABAJO PRÁCTICO 2

MICROSCOPÍA

1-Introducción:
El objeto de la guía es orientar al alumno para el estudio de los diferentes tipos de microscopio,
haciendo hincapié en el microscopio óptico, que es el utilizado de rutina, éste solo un resumen de
los contenidos que deberán ser ampliados con la bibliografía recomendada por la cátedra.
Los objetivos de la unidad son:
-diferenciar los diferentes tipos de microscopios
-conocer la características de los diferentes tipos de microscopía
-adquirir habilidades para el manejo del microscopio óptico
-desempeñarse en el aula con respeto hacia docentes y pares
-usar adecuadamente y con cuidado los elementos de trabajo del aula.
La realización de la guía es obligatoria y es evaluable.

2-Contenidos: Microscopía, Límite de Resolución, Magnificación. Componentes de un microscopio:

oculares, objetivos, fuente de iluminación. Apertura numérica. Tipos de Microscopía: Óptica, Fase,
Interferencia, Fluorescencia, Confocal y Electrónica. Video-Microscopia. Microscopia en 3D y 4D.
Microscopía de Superresolución.

3- Actividades:

A. Completar los enunciados con la información faltante

El Microscopio es un instrumento que ……………………... el tamaño de una imagen permitiendo ver más
detalles que a simple vista.

Límite de resolución: ……………………. mínima entre 2 puntos para que éstos se puedan distinguir como 2
puntos.
Poder de resolución: …………………... de una lente o sistema óptico de distinguir 2 puntos separados como
tales. Va a depender de: el sistema óptico, la longitud de onda de la luz, el espesor de la muestra, la
fijación, la intensidad de tinción.

1 TP2: Microscopía. Cátedra de Histología, IUCBC. 2017.

Partes del microscopio óptico de campo claro:
 ÓPTICA
……………………...: sistema de lentes biconvexas que proporciona una imagen real, aumentada e
invertida del preparado. Pueden ser secos (si sólo hay interpuesto aire entre éste y el preparado) o
de inmersión (si hay otro medio distinto al aire por ejemplo aceite), su aumento puede ser de 4 o 5
X, 10X, 40X y 100X.
………………………….: están ubicados en el extremo superior del microscopio y proporcionan una
imagen virtual, aumentada y derecha del preparado. Su aumento suele ser de 10X.

Sistema de iluminación: los microscopios más antiguos (monoculares) presentan un espejo que es
necesario moverlo para hacer incidir la luz de la lámpara de luz de la mesada de trabajo con el fin
de poder iluminar la totalidad del campo. En los más modernos (binoculares) la fuente luminosa
está incorporada a la base del mismo.
a) Condensador: enfoca la luz sobre el preparado proporcionando un cono de luz.
b) ……………………...: limita el haz de luz, eliminando los rayos más desviados.
c) Filtros: seleccionan las longitudes de onda de los rayos que van a incidir sobre el preparado.

 MECÁNICA
Pie
Columna
Platina
Ocular
Tubo
Revólver (objetivo)
Tornillo macrométrico
Tornillo micrométrico
El microscopio óptico provee una imagen bidimensional, a partir de ella se puede reconstruir la
tridimensionalidad de la muestra. El poder de resolución es de…………….. (1000µm = 1mm)

2 TP2: Microscopía. Cátedra de Histología, IUCBC. 2017.

B. Identificar cada una de las partes del microscopio óptico

Recuerda: limpiar siempre los oculares del microscopio antes de comenzar a

trabajar y al finalizar.

Otros sistemas ópticos:

 Microscopio de contraste de fase: permite observar células y tejidos no teñidos, así como células
vivas.
 De campo oscuro: en el objetivo solo penetran la luz refractada por las estructuras de la muestra, se
utiliza por ejemplo para ver cristales en orina.
 De fluorescencia: aprovecha la capacidad de fluorescer de de ciertas moléculas bajo los rayos
ultravioletas.
 Confocal: visión tridimensional

3 TP2: Microscopía. Cátedra de Histología, IUCBC. 2017.

Microscopia electrónica:

 Microscopio electrónico de transmisión:

haz de electrones placa

fotográfica
ÁNODO CÁTODO

muestra

El haz de electrones atraviesa la muestra. Posee un poder de resolución teórico de …………... y el práctico de
……………. (1000nm = 1µm)
Los tejidos para microscopía electrónica se fijan en glutaraldehído y tetróxido de osmio. Los cortes que se usan
son de 50nm, y se realizan con un micrótomo especial con cuchillas de diamante.

 Microscopio electrónico de barrido:

El haz de electrones “barre” la superficie. Provee una imagen tridimensional.

Microscopia de fuerza atómica:

Utiliza una sonda muy fina que explora la muestra, y un haz láser, la información obtenida es enviada a un
ordenador que forma una imagen de la superficie del tejido explorado.
Anexo:
Incidencia de corte.

4 TP2: Microscopía. Cátedra de Histología, IUCBC. 2017.

5 TP2: Microscopía. Cátedra de Histología, IUCBC. 2017.