Академический Документы
Профессиональный Документы
Культура Документы
I . Tujuan :
II. Prinsip :
III. Teori :
Kromatografi gas merupakan metode yang tepat dan cepat untuk memisahkan
campuran yang sangatrumit. Waktu yang dibutuhkan beragam, mulai dari beberapa
detik untuk campuran sederhana sampaiberjam-jam untuk campuran yang
mengandung 500-1000 komponen didalamnya. Komponencampuran dapat
diidentifikasi dengan menggunakan waktu tambat (waktu retensi) yang khas
padakondisi yang tepat. Waktu retensi (waktu tambat) adalah waktu yang
menunjukkan berapa lama suatusenyawa tertahan di dalam kolom. Waktu retensi
diukur dari jejak pencatat pada kromatogram danserupa dengan volume tambat
dalam KCKT dan Rf dalam KLT. Dengan kalibrasi yang patut,banyaknya
(kuantitas) komponen dapat pula diukur secara teliti. Kekurangan utama
Kromatografi Gastidak dapat digunakan untuk memisahkan campuran dalam jumlah
yang besar. Pemisahan pada tingkatmg mudah dilakukan, pemisahan campuran pada
tingkat gr mungkin dilakukan, akan tetapi pemisahan pada tingkat pon atau ton
sukar untuk dilakukan.
3.KolomFungsi
A. Kolom Partisi, berisi bahan padat inert menyangga lapisan tipis cairan, disebut
Chromatography Gas Cair (GLC)
Fase diam yang dipakai pada kolom kapiler dapat bersifat non polar, polar, atau
semi polar. Fase diam non polar yang paling banyak digunakan adalah metil
polisiloksan (HP-1; DB-1; SE-30; CPSIL-5) dan fenil 5%-metilpolisiloksan 95%
(HP-5; DB-5; SE-52; CPSIL-8). Fase diam semi polar adalah seperti fenil 50%-
metilpolisiloksan 50% (HP-17; DB-17; CPSIL-19), sementara itu fase diam yang
polar adalah seperti polietilen glikol (HP-20M; DB-WAX; CP-WAX; Carbowax-
20M)
4.Detektor
g. Detektor foto-ionisasi
5. Pencatat (Recorder)
c. Klinik
Berikut ini kan diuraikan beberapa cara derivatisasi yang dilakukan pada kromaografi
gas, serta gugus-gugus fungsional yang bereaksi.Misalnya esterifikasi Esterifikasi
digunakan untuk membuat derivate gugus karboksil. Contoh obat yang mengandung
gugus ini adalah olongan obat analgesic, prostaglandin, asamamino, dan obat anti
inflamasi. Pengubahan gugus karboksil menjadi esternya akan meningkatkan
volatilitas karena akan menurunkan ikatan hydrogen .
1. Metode mudah
2. tidak mudah jika komponen yang lain mungkin memiliki waktu retensi yang sama.
Volume retensi suatu komponen adalah karakteristik sampel dan fase cair. Ini
dapatdigunakan untuk identifikasi komponen-komponen dalam sampel. Data retensi
yang belumterkoreksi biasanya tidak digunakan mengingat volume retensi tergantung
pada :
1. Kolom
2. Fase cair
3. Temperatur kolom
4. Kecepatan aliran
Akan tetapi hal itu dapat digunakan pada sampel yang sudah diketahui
informasinya dantersedia standarisasinya. Kemampuan instrumen dalam
menghasilkan data di perlukan dalamoperasional isotermal maupun terprogram. Jika
semua parameter operasional dapat konstanberulang-ulang maka perbandingan data
retensi sampel dapat dibuat terhadap standar. Perbandingan kromatogram larutan
standar (B) dengan larutan sampel (A)Retensi Relatif a sebagai Data Retensi yang
direkomendasikan untuk Indentifikasi sampelyang tidak diketahui. Retensi relatif
a adalah yang direkomendasikan untuk indentifikasipuncak sebagai sesuatu yang
relatif terhadap standar dan juga diperoleh dari data retensi yangdisesuaikan. Ini
lebih mudah diperoleh dan hanya bergantung pada jenis fase cair
dantemperatur kolom.
Mengambarkan grafik dari data retensi relatif atau yang disesuaikan terhadap
berbagaiparameter fisik senyawa atau serangakaian homologi dapat memberikan
petunjuk dariidentitas sampel yang belum diketahui.
Perbandingan rasio respon dari senyawa yang dianalisa oleh dua detektor
yang berbedadibawah kondisi yang telah ditetapkan bersifat karakteristik pada
senyawa tersebut.Sampel biasanya dikromatografikan pada satu kolom dan kolom
dibagi untuk dua detektoryang berbeda dengan yang masing-masing di rekam ke
kromatogram secara bersamaan. Kedua detektor tersebut spesifik seperti detektor
“flame photometric detector (FPD)” akanmemberi respon pada senyawa-senyawa
sulfur dan phosporus, detektor “electron captivedetector (ECD)” akan memberi
respon pada senyawa-senyawa halogen, sementara thermionicspesific detector
(TSD) akan memberi respon pada senyawa-senyawa nitrogen danphosphorus.
Detektor-detektor tersebut diterapkan secara luas dalam analisa obat-obatan
danpestisida.
2. Infra red spectrometry – langsung ke dalam cell sampel gas atau cair
4. Coulometry
5. Polarography
6. UV Visible Spectroscopy
7. Atomic absorption
9. Flamephotometryf.
Uji Kimia
Effluen gas dapat bergelembung pada saat meewati tabung yang berisi reagen-
reagen danrekasi dapat teramati untuk memberikan petunjuk untuk mengidentifikasi
senyawa sepertiyang ditunjukkan pada tabel di bawah ini. Metode ini mahal dan
diterapkan dengan cepat.
a.Hubungan Dasar
Oleh karena itu kalibrasi dapat dicapai dengan menjalankan satu rangkaian standar
yangdiketahui konsentrasinya dan membandingkan respon area yang dihasilkan
antara standar dansampel.Sejumlah metode lainnya digunakan oleh para peneliti
dalam menghitung kuantitaskomponen dalam sampel. Hal ini termasuk
c. Normalisasi Internal
Area dari setiiap puncak sesuai dengan komponen spesifik dalam sampel telah
terbentukkemudian ditambahkan untuk memberi suatu total area yang ditetapkan
pada 100%. Masing-masing area komponen kemudian dinyatakan sebagai persen dari
nilai ini. Akan tetapi senyawa-senyawa yang berbeda akan memberikan respon
berbeda terehadapdetektor, oleh karena itu perlu ditentukan faktor koreksi. Karena
detektor yang berbeda akanberoperasi pada prinsip yang berbeda maka perlu dihitung
faktor yang berbeda untuk tiapdetektor yang berbeda.Faktor dapat ditentukan
berdasarkan berat atau molar.
Aplikasi
a.Polusi udara
Kromatografi gas merupakan alat yang penting karena daya pemisahan yang
digabungkan dengan dayasensitivitas dan pemilihan detektor GLC menjadi alat
yang ideal untuk menentukan banyak senyawa yangterdapat dalam udara yang
kotor, KGCdipakai untuk menetukan Alkil-Alkil Timbal, Hidrokarbon, aldehid,
ketonSO , HS, dan beberapa oksida dari nitrogen dan lain-lain.
b. Klinik
e. Bahan makanan
f. Sisa-sisa pestisida
KGC dengan detektor yang sensitive dapat menentukan atau pengontrolan sisa-sisa
peptisida yang diantaranyasenyawa yang mengandung halogen, belerang, nitrogen,
dan fosfor
g. Perminyakan
Kondisi
V. Prosedur :
1. Mencuci jarum suntik dengan aseton dengan mengisi jarum suntik mendepak
sepenuhnya dan aseton limbah ke kertas handuk. Cuci 2-3 kali.
2. Tarik beberapa sampel Anda ke dalam jarum suntik. Anda mungkin perlu untuk
menghilangkan gelembung udara di dalam tabung suntik oleh plunyer bergerak cepat
ke atas dan ke bawah sementara jarum dalam sampel. Biasanya 1-2 mL sampel
disuntikkan ke dalam GC. Boleh saja memiliki gelembung udara kecil dalam jarum
suntik. Namun, Anda tidak ingin menyuntikkan sebagian besar udara atau puncak
Anda akan terlalu kecil pada tabel perekam.
3. Pastikan tabel perekam dan diatur ke kecepatan grafik yang sesuai (Arrow A).
Mengatur baseline menggunakan nol pada tabel perekam (Arrow B). Dengan pena di
tempat, menyalakan bagan (Arrow D), pastikan pena ke bawah (yang menandai
kertas) dan kertas bergerak.
injeksi Catatan : injector sangat panas, jadi berhati-hatilah untuk tidak menyentuh
perak disk. Jarum akan melewati septum karet, sehingga Anda akan merasa beberapa
perlawanan. Untuk beberapa GC kita itu, kolom tidak menyelaraskan benar dalam
injector, sehingga jarum hits bagian depan kolom logam. Jika Anda merasa bahwa
Anda mendorong terhadap logam, menarik jarum keluar dari injector dan coba lagi,
mungkin di sudut yang sedikit berbeda. Jarum harus benar-benar menghilang ke
dalam injeksi untuk injeksi yang tepat sampel ke kolom GC.Suntikkan dengan cepat
untuk hasil terbaik. Jangan ragu untuk menyuntikkan jarum setelah benar diposisikan
di pelabuhan injeksi.Lepaskan jarum suntik segera setelah injeksi.
5. Menandai waktu injeksi Anda pada tabel perekam. Ini dapat dilakukan dengan
menyesuaikan nol tepat setelah sampel disuntikkan. Hal ini sering nyaman bagi satu
orang untuk menyuntikkan sampel sementara pasangan laboratorium menandai waktu
injeksi di bagan perekam.
6. Bersihkan jarum suntik Anda segera setelah injeksi. Jarum suntik sering
tersumbat dengan cepat dan harus diganti jika mereka tidak dibersihkan setelah setiap
penggunaan.