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de
Análisis de Agua
Nota: Se recomienda que estos procedimientos sean actualizados con el Standard Methods for the
Examination of Water and Wastewater, 21st Edition (APHA/AWWA)
Preparado y Revisado por: Ing. Germán Enrique Padilla Díaz, Ing. Azucena Espinales Martínez
& Téc. José Rivera
Managua, Nicaragua
Tabla de Contenido
PAG 1.2
3.1 PH 3.36
9. BIBLIOGRAFIA 9.57
PAG 1.3
1. METODOS DE ANALISIS VOLUMETRICOS
1.1 ALCALINIDAD
Indicador mixto (ph = 4.6): Pesar 0.02 g de rojo de metilo y 0.1 g de Verde bromocresol y llevar a
100 ml con alcohol etílico o isopropílico al 95%. Este indicador dá sucesivamente las coloraciones
siguientes:
Añadir de 2 a 3 gotas de indicador mixto y seguir titulando con H2SO4 0.02 N hasta tono entre
rosa gris y rosa claro (anotar el volumen gastado como V tot).
PAG 1.4
1.1.4 Cálculos:
A partir de las relaciones de alcalinidad se pueden determinar las especies presentes considerando
lo siguiente:
Determinación de V TABLA
TITULACION OH- CO32- HCO3-
F=0 0 0 T
F<1/2 T 0 2F T - 2F
F= ½ T 0 2F 0
F> ½ T 2F - T 2(T- F) 0
F=T T 0 0
F: volumen de ácido sulfúrico 0.02 N gastado en neutralizar la coloración roja que se produce al
agregar indicador de fenolftaleína a la muestra cuando ésta presenta pH mayor a
aproximadamente 8.3. F es solamente el volumen de ácido sulfúrico que se gastó en neutralizar el
color rojo y volver transparente la muestra T: volumen de acido sulfúrico total gastado hasta el
viraje a un pH aproximado de 4.5, incluye el volumen de acido sulfúrico gastado en la
neutralización de la coloración rojo a la fenolftaleína, en caso que hubiera.
PAG 1.5
1.2 CLORUROS [Método argentométrico]
1.2.1 REACTIVOS
1.2.2 PROCEDIMIENTO
1.2.3 Cálculos:
1) mg Cl-/L = (A - B) *N*35450 / Volumen de muestra, ml
2 ) mg Cl-/L = (A - B) * 9.9969
En caso de utilizarse 50 ml de muestra y la normalidad del Nitrato de plata sea 0.0141 N emplear
la ecuación 2).
PAG 1.6
1.3 DUREZA TOTAL
1.3.2 PROCEDIMIENTO
Titular poco a poco con soln. de EDTA 0.02 N, hasta un viraje de color azul.
Nota: En caso de que se conozca que el agua tiene valores bajos de dureza, se recomienda usar
volúmenes mayores.
1.3.3 CALCULO
PAG 1.7
A= volumen gastado de EDTA
N= NEDTA-Na2
Pesar 2.467 g de MgSO4 7H2O y diluir a 1 litro exactamente, esto producirá una solución 0.02 N
de la cual se toman 10 mls para valorar la solución de EDTA cuyo valor teórico es 0.02 N.
El cálculo a realizarse es el siguiente:
V1N1 = V2 N2
PAG 1.8
1.4 CALCIO
1.4.2 PROCEDIMIENTO
1.4.3 CALCULOS
PAG 1.9
1.5 MAGNESIO (Determinación por diferencia)
El magnesio puede calcularse como diferencia entre la dureza y el calcio como CaCO3, si los
metales que interfieren están presentes en concentraciones mínimas en la titulación del calcio.
Cómo efectuar cálculos
PAG 1.10
1.6 SULFUROS (METODO YODOMETRICO)
Acido clorhídrico 6 N : Diluir en relación 1:1 ácido clorhídrico conc. en agua destilada.
Solución estandar de yodo, 0.025 N: disuelva 20 a 25 g KI en un poco de agua y agregue
3.2 g de yodo. Después que el yodo se ha disuelto, diluir a 1000 ml y estandarizar contra
0.025 N de Na2S2O3 , usando solución de almidón como indicador.
Solución Standar de tiosulfato de sodio, 0.025 N : disolver 6.205 g de Na2S2O35H2O en
agua destilada. Agregar 1.5 ml 6N de NaOH o 0.4 g de NaOH sólido y diluya a 1000 ml.
Estandarizar con solución de biyodato.
Solución estandar de biyodato de potasio, 0.0021 M: disolver 812.4 mg KH(IO 3)2 en agua
destilada y diluir a 1000 ml.
Medir desde una bureta en un balón de 500 ml una cantidad de solución de yodo estimada
a exceder la cantidad de sulfuro presente.
Agregar agua destilada, si es necesario, para completar el volumen a 20 ml y agregar 2
ml de Hcl 6N.
Pipetear 200 ml de muestra en un balón descargando la muestra bajo la superficie de la
solución. Si el color del yodo desaparece, agregue más yodo hasta que el color se
mantenga.
Valore por retroceso con solución de Na2S2O35H2O agregando pocas gotas de solución de
almidón a medida que se aproxima el punto de vire, y continúe hasta que desaparezca el
color azul.
1.6.4 CALCULO
Se debe tomar en cuenta la siguiente relación: 1 mililitro de solución de yodo 0.025N reacciona
con 0.4 mg S2-, donde:
mg S2-/L = [(A * B) - (C * D) ] * 16 000 / ML MUESTRA
PAG 1.11
B : normalidad de la solución de yodo
C : volumen de solución Na2S2O3, y
D : normalidad de solución de Na2S2O3
PAG 1.12
1.7 DETERMINACION DE CLORO
METODO YODOMETRICO (Para Análisis de Calidad de Hipoclorito de sodio comercial y
Demanda de Cloro)
1.7.2 Cristalería
Bureta de 25 ml
Balón aforado de 150 ml (1), de 100 ml (2), de 500 ml (1)
Beakers de 100 ml (4), de 400 ml (2)
Erlenmeyers de 125 ml (5)
1.7.3 PROCEDIMIENTO
1.7.4 CALCULO
PAG 1.13
1.8 OXIGENO DISUELTO (METODO DE MODIFICACION DE AZIDA)
Solución de sulfato manganoso: Disolver 480 g de MnSO4 4H2O, 400 g de MnSO4 2H2O o
364 g de MnSO4 monohidrato en agua destilada, filtrar y diluir a 1 litro. La solución de
MnSO4 no debe dar color con almidón cuando se agregue a una sol. acidificada de yoduro
potásico (KI).
Para muestras sobresaturadas: disolver 10 g NaN3 en 500 ml de agua destilada. Agregar 480 g de
hidróxido de sodio y 750 g de yoduro de sodio (NaI) y agitar hasta disolución.
1.8.2 Procedimiento
1.8.3 Cálculo
Para titular 200 ml de muestra: 1 ml Na 2S2O3 5H2O 0.025 M = 1 mg OD/L
PAG 1.14
2. METODOS DE ANALISIS COLORIMETRICOS
Al diluir una solución de Aluminio con R Cianuro Eriocromo tamponada a un pH de 6.0, produce
un complejo de color rojo a rosado, que presenta una máxima absorción a 535 nm. La intensidad
del desarrollo del color está influenciada por la concentración de aluminio, tiempo de reacción,
temperatura, pH, alcalinidad y concentración de otros iones en la muestra. Para compensar el color
y la turbidez del aluminio, una porción de muestra se mezcla con EDTA para proporcionar un
blanco. Las interferencias de Fe y Mn, dos elementos comúnmente encontrados en el agua, se
elimina por la adición de ácido ascórbico. El rango óptimo de lectura del Aluminio, está entre 20 y
300 g/L, pero puede ser extendido hacia arriba por simple dilución
2.1.2 Interferencias:
Pueden causar errores negativos, los iones Fluoruros y Polifosfatos, cuando la concentración de
fluoruro es constante, el % de error disminuye con el aumento de la concentración de Al, ya que la
concentración de F- frecuentemente es conocida ò puede ser determinada directamente,
ajustándose a resultados que pueden ser obtenidos por la adición de una cantidad conocida de
fluoruro a un grupo de estándares.
Una simple corrección puede ser determinada desde la familia de curva en la figura 3500-Al:1.
Para la eliminación de la interferencia de los complejos de polifosfato está dado el siguiente
procedimiento. Los ortofosfatos en concentraciones menores de 10 mg/L no causan interferencias.
Las interferencias ocasionadas por un nivel de pequeñas cantidades de alcalinidad es eliminada
precisamente por la acidificación de la muestra, después del punto de neutralización del
metilnaranja. Los sulfatos no interfieren hasta una concentración de 2000 mg/L.
Las muestras son colectadas en limpio en frascos lavados con ácidos, preferiblemente plásticos, los
cuales son examinados tanto como sea posible, antes de la colección. Si se va a determinar
únicamente el aluminio soluble, filtrar una porción de la muestra a través de un filtro de membrana
de 0.45 um, desechar los primeros 50 ml de filtrado y utilizar el filtrado sucesivo para la
PAG 2.15
determinación. No se debe utilizar filtros de papel, algodón absorbente ó vasos de vidrio para
filtrar cualquier solución que puede estar contaminada con aluminio, porque ellos removerán parte
de el aluminio soluble:
2.1.4 APARATOS
Espectofotómetro, para ser utilizado a 535 nm, con un haz de luz de 1 cm de longitud.
Filtro fotométrico, que proporciona un haz de luz de 1 cm de largo y equipado con un filtro verde
con una máxima trasmitancia entre 525 y 535 nm.
Cristalería: Tratar toda la cristalería calentando con 1 + 1 HCL y enjuagando con agua destilada
libre de aluminio para evitar errores debido al material absorbido en el vidrio. Enjuague
suficientemente para remover todo el ácido.
2.1.5 REACTIVOS
Utilizar cualquiera de los dos, el metal (1) ó la sal (2), para preparar una solución stock: 1.00 ml =
500 ug Al.
Diluir 10 ml de solución stock de aluminio a 1000 ml con agua destilada: 1.00 ml = 5.00
ug/Al. Preparar diariamente.
Reactivo Buffer:
Cianuro Solocromo R-200* ó Cianuro Eriocromo. Disolver 100 mg en agua y diluir a 100 ml en
un frasco volumétrico. Esta solución debe tener un pH cerca de 2.9.
Esta solución stock tiene una estabilidad excelente y puede ser almacenada hasta por un año.
PAG 2.17
2.1.6 PROCEDIMIENTO
Leer transmitancia o absorvancia utilizando una longitud de onda de 535 nm. Ajustar el
instrumento a cero absorvancia con un standard que no contiene aluminio. (Plotear la
concentración de Al (microgramos Al en 50 ml de volumen final) Vs. absorvancia
obtenida.
Medir 25.0 ml de muestra, ó diluir una porción a 25 ml, en una cápsula ó frasco de
porcelana, añadir unas cuantas gotas de indicador metilnaranja y titular con H2SO4 0.02N
hasta un ligero color rosado.
A una muestra, agregar 1 ml de solución EDTA. Esta servirá como un blanco para
cualquier complejo de aluminio presente y compensar la turbidez y el color. Para ambas
muestras agregar 1 ml de ácido ascórbico, 10 ml de reactivo buffer y 5.00 ml de reactivo
colorante de trabajo, como se describió anteriormente.
PAG 2.18
Agregar 1.7 ml de H2SO4 6N para 100 ml de muestras en un erlenmeyer de 200 ml.
Calentar en un plato caliente por un período de 90 minutos cuidando que la temperatura
de la solución esté justamente por debajo del punto de ebullición. Al finalizar el período
de calentamiento el volumen de la solución debe estar cerca de 25 ml. Agregar agua si es
necesario para completar el volumen.
Correr un blanco en la misma forma, empleando 100 ml de agua destilada y 1.7 ml H2SO4
6N. Restar la lectura del blanco de la lectura de la muestra ó utilizar el mismo para poner
en cero el equipo antes de leer la muestra.
Agregar la misma cantidad de fluoruro como en la muestra para cada standar de aluminio,
ó
2.1.10 CALCULOS
Una muestra sintética que contiene 520 g Al/L y sin interferencia en agua destilada fue
analizada por el método de Cianuro Eriocromo, en 27 laboratorios. La desviación relativa de los
estandares fue de 34.4 % y el error relativo 1.7 %.
PAG 2.19
Una segunda muestra sintética que contiene 50 g Al/L, 500 g Ba/L y 5 g Be/L en
agua destilada fue analizada en 35 laboratorios. La desviación relativa del estandard fue de 38.5 %
y el error relativo 22.0 %.
Una tercer muestra sintética que contiene 500 g Al/L, 50 g Cd/L, 110 g G/L, 1000
g Cu/L, 300 g Fe/L, 70 g Pb/L, 50 g Mn/L, 150 g Ag/L y 650 g Zn/L en agua destilada
fue analizada en 26 laboratorios. La desviación relativa del estandard fue de 28.8 % y el error
relativo de 6.2 %.
Una cuarta muestra sintética que contiene 540 g Al/L y 2.5 mg polifosfato/L en agua
destilada fue analizada en 16 laboratorios. La muestra se hidrolizó de la forma descrita. La
desviación relativa del estandard fue de 44.3 % y el error relativo de 1.3 %. En 12 laboratorios
donde no fueron aplicadas las medidas correctivas, la desviación relativa del estandard fue de 49.2
% y el error relativo de 8.9 %.
Una quinta muestra sintética que contiene 480 g Al/L y 750 g F/L en agua destilada
fue analizada en 16 laboratorios en las que se realizó la corrección del contenido de fluoruro en las
curvas. la desviación relativa del estandar fue de 25.5 % y el error relativo de 2.3 %.
Los 17 laboratorios que agregaron fluoruro a los estandares de aluminio presentaron una
desviación relativa del estandar de 22.5 % y el error relativo de 7.1 %.
PAG 2.20
2.2 SULFATOS (M. TURBIDIMETRICO)
METODO #1: Turbidimetrico - Rango 10 - 40 Mg/L So4
Un agitador magnético - Usarlo a velocidad constante, asimismo los magnetos deben ser
de igual tamaño y forma.
Espectrofotómetro - para usarlo a 420 nm.
Un cronómetro.
Una cuchara con capacidad de 0.2 a 0.3 ml.
Solución bufer rango alto (para concentraciones mayores a 10 mg/l y menores a 40 mg/l):
Disolver 30 g de cloruro de magnesio MgCl 6 H20, 5 g de acetato de sodio CH3COONa
3H20 , 1 g nitrato de potacio KNO3 y 20 ml de ácido acético, CH3COOH (99 %) en 500
ml de agua destilado y aforar a 1000 ml.
Solución bufer rango bajo (< 10 mg/l): Disuélvase 30 g MgCl 2 6 hidrato; 5 g acetato de
sodio 3 hidrato; 1 g de KNO3 ; 0.111 g de sulfato de sodio Na2SO4 y 20 ml de ácido
acético (99 por 100), en 500 ml de agua destilada completando a 1000 ml.
Cloruro de Bario, cristales 20 a 30 mesh.
Solución standard: diluir 10.4 ml de H2SO4 100 ml de agua destilada, o bien disolver
0.1479 g de Na2SO4 anhidro en agua destilada y diluir a 1000 ml, (1 ml = 100 g SO42-).
2.2.3 Procedimiento
Calcular el contenido de sulfatos por regresión lineal de standares utilizando dos curvas:
Rango Bajo (2, 4 6 8 y 10 mg/l) y Rango Alto (10, 15, 20, 25, 30, 35, 40 mg/l).
PAG 2.21
Para las muestras que excedan el límite de absorbancia del Rango alto, se procederá a
diluir la muestra de tal manera que permita obtener una absorbancia dentro del Rango
establecido en el Método.
PAG 2.22
2.3 SULFATOS (M. TURBIDIMETRICO)
METODO #2: Turbidimetrico - Rango 10 - 40 Mg/L SO4
Solución de cloruro de bario - Se debe preparar una solución de tal forma que por mililitro
de solución sean equivalentes a 1 g. de cloruro de bario. Disuelva 100 g de cloruro de
bario adicionando pequeños volúmenes de agua destilada y agitando para saturar la
solución. Luego afore a 250 ml. ( 2.5 ml = 1 g).
2.3.2 Procedimiento
Coloque 100 ml de muestra (o una alícuota aforando a 100 ml) en un erlenmeyer de 250
ml, introduzca un magneto y agite, colocando el erlenmeyer en un agitador magnético.
Adicione 5 ml de solución Bufer para sulfatos.
Adicione 2.5 ml de cloruro de bario y agite durante dos minutos.
Lea la concentración de sulfatos a 420 nm y exprese los resultados como mg/l SO 42-.
PAG 2.23
2.4 HIERRO TOTAL (O - FENANTROLINA)
2.4.2 REACTIVOS
Acido clorhídrico HCl concentrado que contenga menos de 0.000 05% de hierro.
Solución de hidroxilamina: Disolver 10 g NH2OH HCl en 100 ml de agua.
Solución bufer de acetato de amonio: disolver 250 g de NH4C2H302 en 150 ml de agua.
Agregar 700 ml de ácido acético glacial concentrado.
Solución de fenantrolina: Disolver 0.10 gramos de 1,10-fenantrolina monohidrato
(C12H8N2H2O), en aproximadamente 70 ml de agua con agitación y calentamiento a
80°C; luego aforar a 100 ml de agua destilada. El calentamiento es innecesario si se
agregan 2 gotas de ácido clorhídrico concentrado.
2.4.3 PROCEDIMIENTO
PAG 2.24
2.5 FLUOR (SPADNS)
METODO DEL SPADNS
Espectrofotómetro, para uso a 570 nm, con paso de luz de al menos 1 cm.
Solucion estandar de flúor: disolver 221 mg de fluoruro de sodio anhidro NaF, en agua
destilada y diluir a 1000 ml, 1 ml = 100 g F-.
Solucion de SPADNS: Disolver 0.985 gramos de SPADNS en agua destilada y diluir a
500 ml. Esta solución es estable por al menos 1 año si es protegida de la luz solar.
Reactivo acido de zirconilo: disolver 0.133 gramos de cloruro de zirconilo 8 hidrato, en
cerca de 25 ml de agua destilada, agregar 350 ml de Hcl concentrado y diluir a 500 ml
con agua destilada.
Reactivo combinado: mezclar igual volúmenes de solución de SPADNS y cloruro de
circonilo ácido. El reactivo combinado es estable por al menos 2 años.
Solución de Referencia: Añadir 20 ml de la solución SPADNS - Hcl zirconilo (solución
combinada) a 200 ml de agua destilada. Agregar 14 ml de ácido clorhídrico previamente
diluido a 20 ml con agua destilada.
2.5.3 Procedimiento
Correr un blanco con solución de Referencia antes de leer los estandares y las muestras,
así se fija el valor de absorbancia a 0 mg/l de Flúor.
Correr una curva de calibración usando estandares en el rango de 0 a 1.4 mg F -/L por
dilución adecuada de la solución madre de fluroruro en 50 ml de agua destilada.
Mida 50 ml de estandar usando una pipeta volumétrica, agregar luego 10 ml del reactivo
combinado y agitar suavemente. Leer después de 5 minutos en el Método 190 del HACH
DR/2000 a una longitud de onda de 570 nm.
Las muestras deben tratarse de igual forma que los estandares. Se debe tener especial
cuidado en la temperatura de las muestras y los estandares, la cual debe ser igual.
2.5.4 CALCULO
PAG 2.25
X : absorbancia
Y: concentración de flúor en mg/litro Nota: La pendiente de esta curva es negativa.
2.6.1 APARATOS
2.6.2 REACTIVOS
2.6.3 Procedimiento
Mídase la absorbancia a 543 nm, entre 10 minutos y 2 horas después de añadir el reactivo
a las muestras y patrones. Preferiblemente ½ hora.
Calcule el contenido de nitritos de las muestras por regresión lineal a partir de estandares
de 0.01 a 0.44 mg/l.
PAG 2.26
2.7 NITRATOS ( METODO DE LA BRUCINA)
METODO: BRUCINA
Solución Acido Sulfúrico 28.82 N - Disolver 500 ml de Acido Sulfúrico concentrado en 125 ml de
agua destilada (625 ml de VT).
NOTA: Tener cuidado de adicionar poco a poco el ácido al agua y nunca en sentido contrario.
Colocar el recipiente en un baño de agua para lograr un enfriamiento homogéneo, ya que esta
reacción es altamente exotérmica.
Adicionar el contenido del beaker (A1) al del beaker (A2) y transfiera el contenido de un
beaker a otro unas cinco veces.
Tomar 10 ml de muestra
PAG 2.27
Adicionar 2.0 ml de NaCl
Adicionar 10 ml de H2SO4
Adicionar 1 ml de Brucina
PAG 2.28
2.8 NITRATOS ( M. Ultravioleta)
2.8.1 Principio
Se utiliza esta técnica para el monitoreo de muestreas que tienen bajo contenido de materia
orgánica, por ejemplo, aguas naturales no contaminadas y suministros de agua potable. La curva
de calibración cumple la ley de Beer hasta 11 mg/L de N.
2.8.2 Interferencias
Materia orgánica disuelta, surfactantes, nitritos cromo hexavalente (Cr 6+) interfieren. Varios iones
inorgánicos no encontrados normalmente en aguas naturales como cloritos y cloratos pueden
interferir. Sustancias inorgánicas pueden compensarse por análisis independiente de sus
concentraciones y la preparación de curvas individuales de corrección.
2.8.3 Equipos
Espectrofotómetro para uso en rango ultravioleta a 220 nm y 275 nm con celdas pareadas de silica
o cuarzo de 1 cm de paso de luz.
2.8.4 Reactivos
Agua libre de nitratos: utilice agua desionizada, redistalada o destilada, de la más alta
pureza para preparar todas las soluciones y diluciones.
Solución stock de nitratos: Secar Nitrato de potasio (KNO3) en un horno a 105°C por 24
horas. Disuelva 0.7218 g en agua y diluya a 1000 mL; 1.00 mL = 100 g NO3- - N.
Preserve con 2 mL de cloroformo por litro. Esta solución es estable por al menos 6 meses.
Solución intermedia de nitratos: Diluya 100 mL de solución stock de nitratos a 1000 mL
con agua; 1.00 mL = 10 g NO3- - N.
Solución de ácido clorhídrico 1 N HCl.
PAG 2.29
2.8.5 Procedimiento
1. Tratamiento de la muestra: a 50 mL de muestra clara, filtrada si es necesario, agregue 1 mL de
solución de HCl y mezcle completamente.
2. Preparación de la curva estándar: Prepare estándares de calibración en el rango de 0 a 7 mg
NO3- - N/L por dilución a 50 mL de los siguientes volúmenes de solución intermedia de
nitratos: 0 – 1.00 – 2.00 – 4.00 – 7.00 - ..... – 35.0 mL. Trate los estándares de nitratos en la
misma manera como las muestras.
3. Medida espectrofotométrica: Lea absorbancia o transmitancia contra agua redistilada fijada a
cero absorbancia o 100% transmitancia. Use una longitud de onda de 220 nm para obtener
lecturas de nitratos y un longitud de onda de 275 nm para determinar la interferencia debida a
materia orgánica disuelta.
2.8.6 Cálculos
Para muestras y estándares, sustraiga 2 veces la lectura de absorbancia a 275 nm de la lectura de
220 nm para obtener la absorbancia debida a nitratos. Construya una curva estándar graficando
absorbancia debida a nitratos contra la concentración de nitratos del estándar. Usando las
absorbancia corregidas de muestra, obtenga las concentraciones de muestra directamente de la
curva estándar. Nota: Si el valor de corrección es más del 10% de la lectura a 220 nm, no use este
método.
Standard Methods for the Examination of Water and Wastewater. 20 th Edition: Lenore Clesceri, Arnold
Greenberg, Andrew Eaton. pag. 4-115. Método 4500 - NO3- B. ¨Ultraviolet Spectrophotometric Screening
Method¨.
PAG 2.30
PAG 2.31
2.9 FOSFATO Soluble ( A. VANADOMOLIBDOFOSFORICO)
METODO: ACIDO VANADOMOLIBDOFOSFORICO
2.9.1 EQUIPO
Material de vidrio lavado al ácido: Para determinar concentraciones bajas de fósforo úsese material
de vidrio lavado con ácido. Evitese el uso de detergentes que contengan fosfato. Lávese todo el
material de vidrio con Hcl diluido caliente y aclárese bien con agua destilada.
2.9.2 REACTIVOS
Pretratamiento: Se debe filtrar la muestra previamente usando filtros de membrana de 0.45 m.
Acido clorhídrico 1 + 1: Se recomienda una concentración final en muestra 0.5N.
Reactivo vanadato-molibdato: Disuélvanse 25 g de molibdato amónico, (NH4)6Mo7O24 4H2O en
300 ml de agua destilada.
Disuélvanse 1.25 g de metavanadato de amonio NH4VO3 calentando hasta ebullición en 300 ml de
agua destilada. Enfríese y agréguese 330 ml de Hcl concentrado. Enfríese la solución B a
temperatura ambiente, viértase la solución A sobre la B y dilúyase a 1 litro.
Sol patrón de fosfato: disolver 219.5 mg de KH2PO4 anhidro en agua destilada y diluir a 1000 ml;
1 ml = 50 g de PO4-3 - P.
2.9.3 PROCEDIMIENTO
3- Correr una curva de calibración efectuando una regresión lineal sobre los datos de
absorbancia vs concentración de estandares.
PAG 2.32
2.10 COMPUESTOS FENOLICOS (4-AMINOANTIPIRINA)
METODO: 4-AMINOANTIPIRINA
2.10.2 REACTIVOS
Solución BUFER (pH = 9.5): Disolver 5.14 g de cloruro de amonio (NH4cl) en 280 ml de
agua, adicionar con agitación 20 ml de amoníaco (30 %) y aforar a 300 ml. Estable lo
más por tres meses, botella plástica.
CLOROFORMO CCl3H
HIDROXIDO DE SODIO AL 50 %.
2.10.3 MUESTREO
PAG 2.33
Tomar muestra en botella de vidrio ambar. Preservar con 2 ml de ácido sulfúrico conc. (H 2SO4)
por cada litro de muestra. Almacenar máximo por 28 días a 4oC.
PAG 2.34
2.10.4 PROCEDIMIENTO
Adicionar:
Extraer con:
Leer las muestras en el espectrofotómetro a 460 nm, utilizando como blanco cloroformo.
PAG 3.35
3. METODOS DE ANALISIS POTENCIOMETRICOS
3.1 PH
3.1.1 EQUIPOS
pH metro: Se sugiere el modelo 320 CORNING, el cual provee lectura digital de pH, mV
y oC. Posee una resolución de 0.01 pH.
Electrodo 3 en 1 (pH/referencia/temperatura): Este electrodo se suministra con el equipo
detallado anteriormente.
Agitador Corning PC 320
Magnetos
Varilla para recuperar magnetos
3.1.2 REACTIVOS
Solución bufer pH 4.01: Se prepara pesando 10.12 g de biftalato de potasio (KHC 8H4O4),
se disuelve en 300 ml de agua destilada, se transfiere la solución a un frasco volumétrico
de 1000 ml y se diluye a la marca.
Solución bufer pH 9.18 a 25oC: Se pesan 3.8 g de borato de sodio decahidratado (llamado
también borax) (Na2B4O7 10H2O) , disolver en 300 ml de agua destilada, transferir a un
frasco volumétrico de 1000 ml y diluir a la marca.
Para calibrar un medidor de pH se siguen las instrucciones dadas por el fabricante para cada tipo
de equipo en particular.
PAG 3.36
En general, se sigue el siguiente procedimiento:
Antes de usar un electrodo, retirarlo de la solución en la que estaba almacenado, lavarlo y secarlo
con un papel suave.
Seleccionar dos soluciones buffer de referencia, una de pH 7 y la otra para el ajuste de la pendiente,
de preferencia dentro de 2 unidades de ph reprecto al pH, con relación al pH de la muestra
problema.
Colocar sobre el agitador el primer vaso con el buffer 7. Sumergir el o los electrodos. Seguir
instrucciones del fabricante, ajustar al valor de la solución buffer.
Repetir la medición con la solución buffer hasta obtener 2 lecturas sucesivas que no deben diferir
en másde 0.02 unidades de pH del valor del buffer correspondiente.
Retirar los electrodos del primer buffer , lavar 3 veces cn agua destilada, secar y sumergir en el
segundo buffer en agitación. Registrar la temfperatura a la cual se realiza la medición. Ajustar con
el dispositivo de compensación de temperatura hasta que el medidor indique el valor de pH del
buffer a la temperatura de la medición (esto es ajuste de pendiente).
3.1.4 OBSERVACIONES
PAG 3.37
3.2 CONDUCTIVIDAD ELECTRICA
Conductivímetro digital: Se recomienda el modelo 1054 VWR. Este equipo posee 6 rangos.
También es factible el conductivímetro portátil modelo 2052 VWR.
Celdas de conductivímetro
REACTIVOS
Solución estandar de Kcl 0.0100 M: Disolver 745.6 mg de cloruro de potasio anhidroen agua grado
reactivo y diluir a 1000 ml en un balón aforado clase A a 25oC. Esta solución tiene una
conductividad de 1412 umhos/cm. Es satisfactoria para la mayoría de muestras cuando la celda
tiene una constante entre 1 y 2 cm-1.
Enjuague la celda con al menos tres porciones de solucion de KCl 0.0100 M. Ajustar la
temperatura de la cuarta porción a 25 +/- 0.1 oC.
Los conductivímetros generalmente dan el valor directamente. Verifique la lectura del
equipo y ajuste mediante el botón de estandarización el valor de la conductividad de la
solución la cual es 1412 umhos/cm.
PAG 3.38
3.3 NITRATOS (METODO DEL ELECTRODO ION SELECTIVO)
3.3.1 EQUIPOS
Magnetos
3.3.2 REACTIVOS
Sol madre de nitratos: Secar KNO3 en un horno a 105°C por 24 horas. Disolver 0.7218 g
en agua y diluir a 1000 ml; 1 ml = 100 g NO3- - N. Preserve con 2 ml de CHCl3/ L. Esta
solución es estable por al menos 6 meses.
Sol de relleno del electrodo de referencia (NH4)2SO4 1 M. Disuelva 13.215 g de
(NH4)2SO4 en agua y diluya a 100 ml.
Solución bufer: Prepare una solución 2 M de (NH4)2SO4 mezclando 264.3 g de Sulfato de
Amonio, (NH4)2SO4, en 1 litro de Agua dest.
Solución Bufer que elimina interferencias: Disolver 17.32 gramos de Sulfato de Aluminio
18 hidrato, 3.43 gramos de Sulfato de plata, 1.28 gramos de Acido Bórico y 2.52 de ácido
sulfámico en 800 ml de Agua destilada. Ajustar a pH 3 adicionando hidróxido de sodio
entre 0.1 y 1 N. Aforar hasta 1000 ml.
Solución de NaOH 1 N: Disolver 40 gramos de perlas de NaOH en 1 litro de agua
destilada.
3.3.3 PROCEDIMIENTO:
Se deben preparar tres standares con concentraciones de 6.2, 62 y 620 mg/l de NO 3-.
Tanto el volumen de las muestras como de los estandares deben ser los mismos, midiendo
en cada caso 100 ml utilizando una pipeta volumétrica. En caso de utilizar un pHmetro
de escala expandida con lectura de mV se debe efectuar una curva de calibración,
PAG 3.39
colocando los estandares en un beaker sobre el agitador, introduciendo los magnetos y
colocando la celda de nitratos (electrodo de nitratos y el de referencia) bajo la superficie
de los estandares. Si el equipo no posee compensación automática de temperatura,
debe leerse la temperatura de los estandares y compensarse manualmente.
Debe iniciarse el proceso de calibración con el standard más bajo, la agitación debe ser
constante y no muy violenta. Después de asegurarse que el medidor está en el modo de
mV ( o modo Concentración si utiliza el Analizador de iones Corning Modelo 355 o 455),
baje las puntas de los electrodos en la solución. Después que la lectura se ha estabilizado,
registre la lectura en mV.
Continuar luego con el standard intermedio, para lo cual enjuáguense los electrodos con
agua destilada, séquense suavemente con un paño y sumérjanse en la solución. Cuando la
lectura se ha estabilizado, registrar los mV.
Proceder de igual manera con el estandar más alto, registrando el valor de mV.
Las muestras se ejecutan de igual forma que los standares, cuidando que la temperatura de
éstos últimos sea la misma que aquéllas.
PAG 3.40
3.4 POTASIO (METODO ELECTRODO ION SELECTIVO)
3.4.1 EQUIPOS
3.4.2 REACTIVOS
Medir 100 ml de estandar más bajo con una pipeta volumétrica, verterlo en un beaker,
aplicar agitación constante y a baja revolución, agregar 2 ml de bufer de cloruro de sodio
2 M, registrar la lectura en mV. De igual forma proceder con el standar más alto y luego
con el intermedio.
Antes de cada lectura las puntas de los electrodos deben enjuagarse con agua destilada y
secarse con un paño. Las muestras deben ser tratadas de la misma forma que los
estandares.
Para construir la curva de calibración, debe usarse un papel semilog de 4 ciclos, con la
concentración en mg/l ploteados en el eje log y los mV en el eje lineal.
PAG 3.41
PAG 3.42
3.5 SODIO (METODO DEL ELECTRODO ION SELECTIVO)
3.5.1 EQUIPOS
3.5.2 REACTIVOS
Medir 100 ml de estandar más bajo con una pipeta volumétrica, verterlo en un beaker,
aplicar agitación constante y a baja revolución, agregar 2 ml de bufer TEA+NH4OH,
registrar la lectura en mV. De igual forma proceder con el standar más alto y luego con el
intermedio.
Antes de cada lectura las puntas de los electrodos deben enjuagarse con agua destilada
solamente. Las muestras deben ser tratadas de la misma forma que los estandares.
Para construir la curva de calibración, debe usarse un papel semilog de 4 ciclos, con la
concentración en mg/l ploteados en el eje X -log y los mV en el eje lineal.
El electrodo de combinación debe ser almacenado en una solución del estandar más bajo,
por ejemplo 1 mg/l de Na+.
El electrodo debe rellenarse en caso necesario con solución de Kcl saturado. Para su
mantenimiento deben seguirse los consejos que da el fabricante, principalmente en lo que
PAG 3.43
respecta a no dejar secar la punta del electrodo, la cual siempre debe estar húmeda. Para
ponerlo a punto de análisis, el electrodo debe sumerjirse por 18 horas en solución bufer y
solución standard de 100 mg/l de Na+ 1:1 antes de usarse.
3.6.1 EQUIPO
3.6.2 PROCEDIMIENTO:
Calibración del equipo: se deben seguir las instrucciones que da el fabricante. Asegúrese que el
turbidímetro da lecturas estables en todos los rangos de sensibilidad usados. Altas turbideces
determinadas por medición directa son probables a diferir apreciablemente de aquellas
determinadas por la técnica de dilución.
Medidas de turbidez menores a 40 NTU: Agite completamente la muestra, espere hasta que las
burbujas de aire desaparezcan y vierta la muestra en el tubo del turbidímetro. Lea la turbidez
directamente en la escala del instrumento.
Medidas de turbidez mayores a 40 NTU: Diluya la muestra con uno o más volúmenes de agua libre
de turbidez hasta que este valor caiga entre 30 y 40 NTU. Compute la turbidez de la muestra
original a partir de la muestra diluida y el factor de dilución. Por ejemplo si 5 volúmenes de agua
libre de turbidez fueron agregados a un volumen de muestra y la muestra diluida mostró un
turbidad de 30 NTU, entonces la turbidez de la muestra original es 180 NTU.
PAG 3.44
4. METODOS DE ANALISIS PARA DEMANDAS
4.1.1 EQUIPOS
Botellas de incubación: capacidad de 300 ml, deben limpiarse con detergente, enjuagarse
completamente y drenarse ante de usarse.
Incubadora o Baño María: debe estar controlada termostáticamente a 20 +/- 1oC. Se debe
excluir toda luz solar para prevenir la posibilidad de producción fotosintética de oxígeno
disuelto.
4.1.2 REACTIVOS
4.1.3 PROCEDIMIENTO
Preparación del agua de dilución: Coloque el volumen deseado de agua en una botella y agregue 1
ml de solución bufer de fosfato, sulfato de magnesio, cloruro de calcio y cloruro férrico por cada
litro utilizado. Antes de usarse el agua de dilución, llévele a 20oC y satúrela con oxígeno por
aeración con aire libre de compuestos orgánicos.
TECNICA DE DILUCION
PAG 4.45
Prepare diluciones en cilindros graduados y transfiéralos a botellas de DBO o prepárelas
directamente en las botellas.
Usar pipeta volumétrica de pico ancho, agregar el volumen deseado a las botellas de DBO
individuales de capacidad conocida, agregar cantidades apropiadas de material semilla a las
botellas de DBO individuales o al agua de dilución (se inocula con semilla en caso de que el agua
esté altamente contaminada con material tóxico).
Llene las botellas con suficiente agua de dilución, inocúlelas con semilla en caso necesario, de tal
forma que la inserción del tapón desplace todo el aire, no dejando burbujas.
Para diluciones mayores que 1:100 haga la dilución primaria en un cilindro graduado ante de hacer
la dilución final en la botella. Si usa el método iodométrico para medir el OD , prepare dos
botellas en cada dilución. Determine el OD inicial en una botella. Tape la segunda botella
fuertemente, selle con agua, e incube por 5 días a 20oC. Si se usa el método del electrodo de
membrana para medir el OD, prepare solamente una botella de OD para cada dilución. Determine
el OD inicial en esta botella y reemplace cualquier contenido desplazado con agua de dilución
hasta llenar la botella. Tape firmemente, selle con agua, e incube a 20oC por 5 días. Enjuague el
electrodo OD entre determinaciones para prevenir contaminación cruzada de las muestras.
DETERMINACION INICIAL DE OD
Si la muestra contiene materiales que reaccionan rápidamente con OD, determine el OD inicial
inmediatamente después de llenar fla botella de DBO con muestra diluida. Si el cambio inicial de
OD es insignificante, el período entre preparar dilución y medir el OD inicial no es crítico.
Use la modificación azida del método iodométrico o el método del electrodo de membrana para
determinar el OD inicial en todas las diluciones de muestras, blancos de agua de dilución y control
inoculados con semilla cuando sea apropiado.
Use el blanco de agua de dilución como un chequeo aproximado de la calidad del agua de dilución
no inocoluda con semilla y del limpieza de las botellas de incubación. Junto a cada tanda de
muestras incube una botella de agua de dilución on inoculada. Determine el OD inicial y final tal
como se explicó en el apartado anterior. El cambio de OD no debe ser mayor que 0.2 mg/l y
preferiblemente no más de 0.1 mg/L.
INCUBACION
Incube a 20o +/- 1 oC en botellas de DBO que contengan diluciones deseadas, controles con
siembra (inoculadas), blancos de agua de dilución y chequeos con glucosa -ácido glutámico. Selle
con agua las botellas.
DETERMINACION DEL OD FINAL
PAG 4.46
Cuando el agua de dilución no ha sido sembrada o inoculada.
DBO5 , MG/L = (D1 - D2)/P
DONDE
D1 : OD de la muestra diluida inmediatamente después de la preparación, mg/L
D2 : OD de la muestra diluida después de 5 días de incubación a 20 C , mg/L
P : Fracción volumétrica decimal de la muestra usada
Si más de una muestra diluida cumple con los criterios de un residual de OD de al menos 1 mg/L y
un decremento de OD de al menos 2 mg/l y no hay evidencia de toxicidad en la concentración de
muestra más alta o la existencia de una anomalía obvia, promedie los resultados en un rango
aceptable.
PAG 4.47
4.2 DEMANDA QUIMICA DE OXIGENO
METODO DEL REFLUJO ABIERTO
EQUIPOS
REACTIVOS
PAG 4.48
PROCEDIMIENTO:
Cubra la parte abierta del condensador en el extremo superior con un pequeño beaker para prevenir
que material foráneo entre a la mezcla en reflujo y reflujar por 2 horas. Enfríe y lave el
condensador con agua destilada. Desconecte el condensador de reflujo y diluya la mezcla
alrededor 2 veces su volumen con agua destilada. Enfríe a temperatura ambiente y titule el exceso
de K2Cr2O7 con FAS, usando 0.1 a 0.15 ml de indicador ferroín. Aunque la cantidad de ferroín no
es crítico, use el mismo volumen para todas las titulaciones. Tome como punto final de vire el
primer cambio de color de azul verdoso a cafe rojizo. El verde zul puede reaparecer. En la misma
forma, refluje un blanco que contenga los reactivos y un volumen de agua destilada igual al de la
muestra.
Evalúe la técnica y la calidad de los reactivos por medio de una prueba de un standard de ftalato de
hidrógeno potásico.
CALCULO
COD como mg O2/L = (A - B) x M x 8000/ mL muestra
PAG 4.49
5. METODOS DE ANALISIS BACTERIOLOGICOS
PREPARACION DE REACTIVOS
a- AGUA DE DILUCION:
PATRONES
1. Disuelva 34 gr. de potasio dihidrogeno fosfato, en 500 ml. de agua destilada, ajuste el
pH a 7.2 con hidróxido de sodio 1 N. y diluya a un litro con agua destilada.
SOLUCION STOCK
Adicione 1.25 ml. de Stock buffer fosfato y 5.0 ml. de sulfato de magnesio a un litro de
agua destilada. De esta solución stock se toman 9.5 ml y se vierten en frascos con tapón de vidrio
y se esterilizan en autoclave (15 psi, 15 min, 121oC).
b- CALDO LACTOSADO:
Disuelva 40 gr. en un litro de agua destilada, coloque 10 ml. en tubos de ensayo e inserte tubos
DURHAM invertidos, tape los tubos de ensayo con algodón.
SIEMBRA DE MUESTRAS
PAG 5.50
agregar 1 ml a cada tubo de ensayo de la 1er serie de 5 y 1 ml al siguiente frasquito hasta llegar al
último, del cual se toman 5 ml.
c) Agitar cada uno de los tubos por 25 veces, e incubarlos durante 24 horas a 37 oC.
d) Tomar nota de los tubos positivos al cabo de 24 horas y sólo los tubos positivos se les
somete a la prueba confirmativa.
Si al cabo de 24 horas no hay tubos positivos, entonces se dejan los tubos en incubación otras 24
horas.
Esterilizar en la llama del mechero de BUNSEN la lupa de inocular (al rojo vivo).
Introducir ligeramente la lupa de inocular dentro del medio de cultivo que resultó positivo.
Introducirla totalmente en el medio y hacer rotar el tubo suavemente para atrapar las especies
microbiológicas.
Retirar la lupa con la película e introducirla en el medio de verde brillante y hacer rotar el tubo
lentamente.
Agitar los tubos unas 25 veces.
Incubar por 24 horas y al cabo de los cuales anotar aquellas que resultaran positivas.
Si ninguna resulta positiva, incubar otras 24 horas y luego leer.
Repetir el mismo procedimiento para E.C.
PAG 5.51
5.2 COLIFORMES FECALES - FILTRO DE MEMBRANA
Mezclar en un balón aforando a 1 litro con agua destilada, esterilice en autoclave por 15 minutos a
121oC. Enfriar a 45oC y verter en las placas petri aproximadamente 3 ml del medio de cultivo.
PROCEDIMIENTO:
Si se usa el sistema Gelman de plástico, esterilice en Baño María a 100oC por 5 minutos, previoa
cada análisis.
Se coloca el filtro de membrana sobre la pflaca filtrante y se procede a filtrar 100 ml de muestra
Con la pinza se toma la membrana y se coloca sobre la plaquita petri con medio de cultivo y se
incuba a 44oC por 24 horas.
Se cuentan los puntos amarillos y se reportan como # de colonias colifecales /100 ml.
Este método es únicamente para agua con baja contaminación, de fuentes superficiales o
subterráneas, con turbidez menor a 5 UNT. En caso de muestras con turbidez entre 5 y 30 UNT se
filtran 50 ml y el número de colonias detectadas se multiplica por 2.
PAG 5.52
6. BALANCE DE ANIONES Y CATIONES
ANIONES CATIONES
BICARBONATOS SODIO
CARBONATOS CALCIO
CLORUROS MAGNESIO
SULFATOS POTASIO
NITRATOS
% Balance Ionico
(Cationes, meq/l) - (aniones, meq/l) * 100%
(Cationes,meq / l) (aniones, meq/l)
Este porcentaje de balance ionico no debe exceder de 10 %, se pueden aceptar valores mayores en
caso que exista sospecha de factores que interfieren en la neutralidad eléctrica del agua que está
siendo examinada.
Por ejemplo, aguas muy aireadas pueden sufrir este tipo de perturbaciones originando que el
porcentaje no encaje dentro de los límites que se han definido.
Para realizar el procedimiento de balance iónico, las concentraciones de los principales parámetros
descritos anteriormente deben ser convertidos a miliequivalentes por litro, para lo cual deben
multiplicarse las concentraciones halladas por los factores de conversión que se presentan en la
tabla de abajo.
Luego se procede a sumar los miliequivalentes por litro de los aniones y de los cationes
procediéndose a aplicar la fórmula del % de balance iónico.
PAG 6.53
A continuación detallamos los factores de conversión de los iones principales:
Este procedimiento es muy conveniente efectuarlo porque provee de una buena herramienta de
análisis para detectar errores analíticos y evaluar la confiabilidad de los análisis.
Las cartas de control son de mucha utilidad para determinar si los análisis caen dentro de ciertos
límites fuera de los cuales se puede afirmar que el proceso está fuera de control estadístico. El
objetivo es identificar la influencia de los dos principales tipos de errores: el sistemático y
aleatorio. Se puede afirmar que esta labor es una de las primeras a ser realizadas para instalar un
control de calidad analítico interno (CCA interno).
El primer paso en la confección de este tipo de cartas es asumir los criterios de errores tolerables
del Programa GEMS/AGUA, para el cual si se fija un +/- 20% de error total, se está aceptando un
máximo de error permisible de 5% para cada tipo de error, tanto el alaeatorio como el sistemático.
Las desviación standard para el promedio de análisis duplicados resulta ser 3.6%.
En un primer momento el promedio de los análisis duplicados debe asumirse igual al valor de las
soluciones standard que se escojan para cada parámetro. Dicho sea de paso, estos standares deben
ser valores promedios a los analizados rutinariamente en el laboratorio.
PAG 7.54
Existen dos tipos fundamentales de cartas de control : la carta X (léase X barra) y la D. Para los
fines del presente manual, se considera suficiente con la implementación de la carta X por lo cual
se procederá a identificar los pasos principales para efectuar esta carta:
Escoger un valor de solución patrón ( por ejemplo 10 mg/l de cloruros)
Con este valor ya definido se procede a calcular los limites de advertencia y los límites de control,
tanto superiores como inferiores. La fórmula es la siguiente:
EJEMPLO
Si se escogió 10 mg/l de cloruros como el valor del standard a ser analizado rutinariamente para
fines de control, el 100 % equivaldrá a 10 mg/l, de igual manera se calcula el 3.6% del valor del
standard. Los límites de advertencia y/o control serán:
Límite Advertencia=10 +/- 2* 0.036*10
Límite Control = 10 +/- 3* 0.036*10
Por lo tanto,
el límite superior de advertencia será : 10 + (2*0.036*10) = 10.72 mg/l
el límite inferior de advertencia será : 10 - (2*0.036*10) = 9.28 mg/l
De manera rutinaria, es decir cada vez que se efectúe una tanda de muestras, se deben correr
patrones por duplicado y el promedio de estos resultados deben plotearse en la carta de control. Si
se encuentra fuera del límite de control, se procede a detectar la fuente de error y a corregirlo. Un
gráfico de ejemplo se presenta en la página siguiente.
PAG 7.55
8. METODOS DE ANALISIS DE PUREZA DE PRODUCTOS QUIMICOS
A - REACTIVOS
B- Cristalería
Bureta de 25 ml (1)
Erlenmeyers de 125 ml (6)
Beakears de 100 ml (3), de 400 ml (3)
Balón aforado de 1 Lt (1), de 500 ml (1), de 100 ml (2)
B- PROCEDIMIENTO
CALCULO
PAG 8.56
9. BIBLIOGRAFIA
1) Standard Methods for the Examination of Water and Wastewater, 18 th Edition, 1992, APHA,
AWWA,WEF.
2) Curso sobre Captación y Análisis de Muestras de Agua, preparado por Luis Tapia Berríos, junio
de 1984.
3) Catálago HACH 95.
4) Catálogo VWR 94/95.
10. RECONOCIMIENTOS
Lic. Juan Quintana T., Ing. Katia Montenegro R., Ing. Azucena Espinales, Lic. Haydée Selva V.,
Lic. Narciso Romero P., Ing. Germán Padilla D.
PAG 10.57