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Los anticuerpos son proteínas hospedadoras que se encuentran en el plasma y en los fluidos

extracelulares que sirven como primera respuesta y constituyen uno de los principales efectores del
sistema inmunitario adaptativo. Se producen en respuesta a moléculas y organismos, que finalmente
neutralizan y/o eliminan.
Los anticuerpos son glicoproteínas secretadas por linfocitos B especializados. Conocidos como
inmunoglobulina (Ig1), ya que contienen un dominio estructural común que se encuentra en muchas
proteínas, los anticuerpos están compuestos por cuatro polipéptidos. Dos copias idénticas de una
cadena pesada (∼55 kD) y ligera (∼25 kD) se mantienen juntas mediante enlaces disulfuro y no
covalentes, y la molécula resultante a menudo está representada por una molécula esquemática en
forma de Y de ∼150 kD. En los mamíferos, hay cinco clases de Ig (IgG, IgM, IgA, IgD e IgE); y en
avianos, hay tres clases (IgY, IgM e IgA). En mamíferos seleccionados, la IgG y la IgA se subdividen
en subclases, denominadas isotipos, debido a los polimorfismos en las regiones conservadas de la
cadena pesada. La clase de Ig determina tanto el tipo como la naturaleza temporal de la respuesta
inmune.
Los anticuerpos realizan dos funciones esenciales:
1. Los anticuerpos se unen a un epítope en un antígeno con los brazos de la Y. Cada uno con un
sitio de unión.
2. El dominio Fc de la Y imparte al anticuerpo funciones biológicas efectoras, como la activación
de las células asesinas naturales, la activación de la vía clásica del complemento y la
fagocitosis.
Las cadenas ligeras consisten en una porción amino terminal variable de 110 aminoácidos y una región
constante de longitud equivalente. La cadena pesada tiene una variable y al menos tres regiones
constantes, cada una de aproximadamente 110 aminoácidos de longitud. Las regiones variables de
ambas cadenas se unen para formar el dominio de unión a antígeno. Las tres regiones hipervariables
tanto en la cadena ligera como en la pesada, cada una de cinco a 10 aminoácidos de longitud,
constituyen los sitios de unión al epítopo reales o las regiones determinantes de la complementariedad
(CDRs1).
La especificidad de la respuesta del anticuerpo está mediada por células T y/o B. Después de la unión
de un antígeno apropiado y la recepción de varias otras señales de activación, los linfocitos B se
dividen, lo que produce células B de memoria, así como una diferenciación terminal en los clones de
células plasmáticas secretoras de anticuerpos, cada uno de los cuales produce anticuerpos que
reconocen el epítope antigénico idéntico al reconocido por su antígeno receptor. Los linfocitos de la
memoria B permanecen latentes hasta que son activados posteriormente por su antígeno específico.
Los anticuerpos monoclonales (MAbs) son anticuerpos producidos por un solo clon de linfocitos B.
Debido a que los anticuerpos reconocen un componente relativamente pequeño de un antígeno,
pueden reaccionar de forma cruzada con epítopos similares en otros antígenos, pero generalmente con
menos afinidad. La reacción cruzada de anticuerpos puede servir como base para identificar antígenos
relacionados; sin embargo, este método puede ser confuso cuando se reconocen epítopos en
antígenos no relacionados. Un anticuerpo con alta especificidad resultaría en menos reactividad
cruzada.
La medida de la fuerza de unión de un anticuerpo para un epítope monovalente se denomina afinidad.
La constante de afinidad describe la cantidad de complejo antígeno-anticuerpo que se forma en el
equilibrio. La afinidad de una respuesta de anticuerpos mejora a medida que la respuesta inmune
madura debido a la mutación somática en las regiones hipervariables y la posterior selección y
proliferación de linfocitos B, que se unen al antígeno con mayor afinidad. Los anticuerpos con alta
afinidad unen cantidades mayores de antígeno con una mayor estabilidad en un tiempo más corto que
aquellos con baja afinidad y son preferibles para las técnicas inmunoquímicas.
La avidez refleja la intensidad de unión global entre los anticuerpos y un antígeno multivalente que
presenta múltiples epítopos. La avidez se determina por la afinidad del anticuerpo por el epítopo, el
número de sitios de unión del anticuerpo y la geometría de los complejos de antígeno-anticuerpo
resultantes.
Las principales ventajas de los MAb son su homogeneidad y consistencia. La monoespecificidad
proporcionada por los MAbs es útil para evaluar cambios en la conformación molecular, interacciones
proteína-proteína y estados de fosforilación, y en la identificación de miembros individuales de familias
de proteínas. También permite determinar el potencial de análisis estructural. Sin embargo, la
monoespecificidad de los MAb también puede limitar su utilidad. Pequeños cambios en la estructura de
un epítopo pueden afectar notablemente la función de un MAb. Por esa razón, los MAbs deben
generarse al estado del antígeno al que eventualmente deberá unirse. En contraste, debido a que los
PAb son heterogéneos y reconocen una gran cantidad de epítopos antigénicos, es menos probable
que el efecto del cambio en un solo o pequeño número de epítopos sea significativo. Los PAb también
son más estables en un amplio pH y concentración de sal, mientras que los MAb pueden ser altamente
susceptibles a pequeños cambios en ambos. Otra ventaja clave de los MAb es que una vez que se ha
generado el hibridoma deseado, los MAb se pueden generar como un recurso constante y renovable.
En contraste, los PAbs generados para el mismo antígeno utilizando múltiples animales diferirán entre
los animales inmunizados, y su avidez puede cambiar a medida que se cosechan con el tiempo. La
cantidad de PAbs obtenida está limitada por el tamaño del animal y su vida útil
Las inmunotransferencias y la inmunoprecipitación son dos métodos básicos mediante los cuales se
utilizan anticuerpos para establecer si un antígeno o una molécula relacionada está en una solución
preparada (es decir, lisado celular o tisular).
 Las inmunotransferencias implican transferir el (los) antígeno (s) soluble (s) a una membrana
adecuada (nitrocelulosa o nailon / polivinilideno cargado positivamente [PVDF]), bloqueando la
membrana para evitar la unión inespecífica posterior, y luego sondeando con un anticuerpo
específico para el antígeno (anticuerpo primario).
 En la inmunoprecipitación, el anticuerpo primario se une al antígeno en la solución y luego el
complejo anticuerpo-antígeno se aísla del sobrenadante por centrifugación después de la
adición de perlas inertes recubiertas con proteína bacteriana A, G y / o L, que se unen al
anticuerpo primario
 El ensayo inmunoabsorbente ligado a enzimas (ELISA1) es otra aplicación básica que se utiliza
para analizar antígenos solubles
 El ensayo immunospot ligado a enzimas ("ELISPOT") es una aplicación que determina si una
célula individual está secretando activamente una citoquina

Opinión
Una vez conocidas las diferencias entre anticuerpos monoclonales y policlonales, será mucho más
sencillo seleccionar el que mejor se ajuste a nuestro experimento, en base al tipo de antígeno y la
aplicación o ensayo que tengamos entre manos.
Por ejemplo, para aplicaciones que requieran grandes volúmenes de anticuerpos y exijan
reproducibilidad entre ensayos, o cuando pretendamos discernir entre dos isoformas de una proteína,
lo más adecuado será optar por un anticuerpo monoclonal.
Sin embargo, si trabajamos con técnicas que requieran una alta afinidad, como es el caso de la
inmunoprecipitación, o cuando contemos con un presupuesto más limitado, podríamos decantarnos por
un anticuerpo policlonal.
El hecho de que existan diferencias entre anticuerpos monoclonales y policlonales, no implica que unos
presenten mayor calidad respecto a los otros. Esto dependerá de la aplicación prevista, técnica en la
que se vayan a utilizar, presupuesto disponible (en el caso de optar por una producción a medida) y la
recurrencia de su uso.