Alcaloides: una modalidad antibacteriana emergente contra Staphylococcus aureus

resistente a la meticilina.

Resumen:
Staphylococcus aureus resistente a la meticilina (MRSA) es una bacteria Gram-positiva que causa
infecciones adquiridas en la comunidad y en el hospital. El tratamiento con medicamentos
sintéticos / antibióticos para las infecciones relacionadas con MRSA es cada vez menos efectivo
y los productos naturales pueden ser una nueva alternativa emergente para el futuro desarrollo
de fármacos antibacterianos. Los alcaloides son una clase de compuestos naturales que son
conocidos por su fitoquímica y farmacología.
Esta revisión se enfoca en 32 alcaloides aislados de varias plantas que mostraron una marcada
actividad antibacteriana contra MRSA al actuar a través de diferentes mecanismos como la
inhibición de la piruvato quinasa, el efecto de extinción del quórum, la alteración de la bomba
de eflujo en MRSA y la intercalación del ADN bacteriano, por nombrar solo algunos . Además,
también se ha discutido el uso de alcaloides de plantas recientes contra aislados clínicos de
SARM.
Palabras clave: alcaloides, MRSA, diferentes mecanismos de susceptibilidad.

1. INTRODUCTION
Staphylococcus aureus resistente a la meticilina (SARM) es una de las bacterias resistentes a los
medicamentos más prevalentes. El desarrollo de resistencia a antibióticos en microorganismos patógenos
es una amenaza constante para la salud pública. En 2012, Staphylococcus aureus fue la causa principal de
infecciones adquiridas en el hospital en los Estados Unidos y MRSA solo causó 80,461 infecciones que
condujeron a 11,285 muertes [1]. Se observó un marcado aumento en la resistencia microbiana contra los
antibióticos en los últimos cuarenta años tanto en el sector médico como en el ganadero [2]. La bacteria
MRSA se descubrió por primera vez en los Estados Unidos en 1968. Las investigaciones realizadas en 9
países en 1974 mostraron que el 2% de los casos de infección por S. aureus en general son el resultado
de MRSA. Esta cifra aumentó al 22% en 1995 y al 85% en 2008, y ha continuado aumentando
vertiginosamente desde [3]. Después de 1975, solo se informaron casos esporádicos en los siguientes 25
años. El informe de Malasia sugiere que la prevalencia del SARM adquirido en la comunidad es una gran
amenaza para las personas sanas también [4]. El aumento del 3% en la identificación de aislamientos de
CAMRSA se observó en sus cuatro hospitales del Ministerio de Salud [5]. Los esfuerzos para hacer frente
a las infecciones por MRSA habían atraído consistentemente a los países en desarrollo hacia la gran carga
económica de millones de dólares en su búsqueda de un tratamiento nuevo, sensible y seguro. Hoy en día,
se ha informado que incluso el antibiótico más exitoso, la vancomicina, pierde su susceptibilidad frente al
SARM [6]. Desde 2005 en adelante, se prestó una atención significativa a MRSA perteneciente al tipo de
secuencia (ST) [7]. S. aureus es un patógeno importante tanto en los hospitales como en la comunidad, y
es responsable de una amplia gama de infecciones, desde la piel no complicada y las infecciones de tejidos
blandos hasta enfermedades más graves como la neumonía, la endocarditis y la sepsis. Particularmente
son preocupantes las cepas resistentes a múltiples fármacos, como el MRSA, que han creado una
necesidad urgente de mejora en las terapias de MRSA.
La resistencia puede surgir a través de mutaciones espontáneas o mediante la adquisición de genes de
resistencia mediante transferencia horizontal [8]. En S. aureus, se ha demostrado que los mecanismos de
eflujo pueden conferir resistencia a varios agentes antimicrobianos, incluidos ciprofloxacina, eritromicina,
tetraciclina y biocidas, lo que confiere resistencia a múltiples fármacos a este organismo [9]. Se suponía
que el desarrollo de la biopelícula era uno de los mecanismos de defensa ya que las bacterias incrustadas
en las biopelículas son más difíciles de erradicar que las células planctónicas [10]. El SARM fue aislado
inicialmente hace 50 años, solo dos años después de la introducción de la meticilina en la práctica clínica.
Una de las preocupaciones con S. aureus es la extensión actual de la prevalencia de MRSA debido a que
se ha convertido en un importante problema de salud mundial debido a su potencial patogénico para causar
infecciones del torrente sanguíneo, neumonía e infecciones del sitio quirúrgico. La resistencia a los
antibióticos debido a la enzima bacteriana 􀀁-lactamasa también es un problema de salud mundial en
crecimiento. Debido al uso excesivo desenfrenado de antibióticos, la enzima está desarrollando nuevas
actividades de resistencia a un ritmo alarmante. La lactamasa confiere resistencia a la penicilina y a los
antibióticos relacionados al hidrolizar su resto conservado de 4 átomos de 􀀁-lactama, destruyendo así su
actividad antibiótica [11]. Las bacterias de todas las especies dependen de una capa de peptidoglicano
reticulado, que preserva la forma y la rigidez de la célula. Esta capa de peptidoglicano está compuesta
principalmente por alternantes mon (1, 4) monosacáridos unidos, específicamente N acetilglucosamina y
ácido N-acetilmurámico. Este último es modificado por un pentapéptido que siempre termina con dos
residuos de D-alanina. La reticulación de unidades de peptidoglicano se cataliza fuera de la membrana
citoplásmica mediante enzimas transpeptidasas de la pared celular. En este proceso de reticulación, se
forma un enlace peptídico entre el penúltimo Dalanine en una cadena y el ácido pimélico (en Gram-negativo)
o el residuo Llysine (en Gram-positivo) en la otra cadena. La D-alanina terminal se escinde después de que
se forma el enlace con el penúltimo residuo. Los antibióticos betalactámicos inhiben eficazmente las
bacterias transpeptidasas, y por lo tanto a menudo se llaman proteínas de unión a penicilina (PBP). Al inhibir
la síntesis de la pared celular, las bacterias se vuelven altamente susceptibles a la lisis celular. La Beta-
lactamasa, de hecho, ha evolucionado desde el dominio funcional de PBP a través de la adquisición de la
nueva actividad hidrolasa para protegerse del antibiótico beta-lactámico, dejándolas así ineficaces. La
familia de la enzima beta-lactamasa es amplia y se caracteriza por diversos grados de actividad de
resistencia a los antibióticos [12].
La resistencia de S. aureus a antibióticos 􀀁-lactámicos es adquirida por el gen mecA exógeno, que codifica
una forma modificada de Penicillin Binding Protein 2A (PBP2A), que no permite una unión adecuada debido
a su integración profunda dentro de la estructura de la pared celular y su baja afinidad hacia la penicilina y
compuestos relacionados, lo que impide la inhibición de la síntesis de la pared celular que esta clase de
antibióticos causa [13]. En esta situación alarmante de resistencia a MRSA a la mayoría de los antibióticos
disponibles, los productos naturales pueden ser una alternativa útil [14]. Los alcaloides son la clase más
ampliamente explorada de compuestos naturales [15] en términos de fitoquímica y farmacología. En esta
revisión, encontramos varios alcaloides que mostraron sensibilidad contra MRSA y podrían ser los
compuestos principales de utilidad clínica, por lo que requieren una exploración adecuada.

2. ALCALOIDES COMO AGENTES ANTIBACTERIANOS EN CONTRA MRSA

La mayor prevalencia de bacterias resistentes a los antibióticos debido al uso extensivo de antibióticos
puede hacer que los actuales agentes antimicrobianos sean ineficaces para controlar algunas infecciones
bacterianas complicadas.
Esto llevó la atención de los investigadores a explorar las propiedades terapéuticas de las plantas y sus
componentes químicos, debido a su creciente popularidad como un remedio alternativo beneficioso y
económico en muchas enfermedades e infecciones en todo el mundo. Por lo tanto, la investigación para el
descubrimiento de nuevas sustancias que son activas contra los patógenos humanos es una necesidad
urgente [16]. De los alcaloides informados, varios mostraron actividad contra MRSA (Tabla 1). El alcaloide
de quinolona evocarpina se obtuvo de Fructus euodiae que poseía una actividad marcada contra MRSA
[17]. Tomatidina, un alcaloide esteroidal, se extrajo de la planta de tomate. Los resultados revelaron que
exhibía muy buena susceptibilidad frente a MRSA [18]. Cholidonium majus (papaveraceae) condujo al
aislamiento de los alcaloides tipo benzol [c] fenantridina, que incluyen 8-hidroxidihidrosanguinarina y 8-
hidroxidihidrqueleritrina. Estos alcaloides poseen actividad contra MRSA [19]. Clausenamallines G-K,
alcaloides de carbazol se obtuvieron de Clausena wallichii. Estos alcaloides fueron muy eficaces contra
MRSA PK1 [20]. Otro alcaloide de quinolona, 4-metoxi-N-metil-2-2quinolona, fue aislado de Zanthoxylum
monophyllum y también demostró una fuerte inhibición contra la actividad de MRSA [21].
Harmandianamines A-C son alcaloides de carbazol aislados de Clausena harmandiana. Harmandianaminas
poseía actividad efectiva contra MRSA PK1 [22].
Glycosmis cochinchinensis contenía diversas Glycosmis alcaloides de indol, que comprende de 1-hidroxi-
3,4-dimetoxi-10-metilacridina-9-ona, gama-fagarine, skimmianine, kokusaginine y intergriqinolone. Cuando
se probaron, estos alcaloides también mostraron una marcada actividad contra el SARM [23]. Berberine,
hydrastine y canadine se aislaron de Hydrastis Canadensis. La hidrastina y la canadina parecen inactivas
contra el SARM, pero con la adición de berberina producen efectos de extinción del quórum contra el SARM
[24]. Stephania tetrandra contiene alcaloides bisbencilisoquinolona, tetrandrina y demetiltetrandina. Estos
alcaloides mostraron una actividad potente contra las cepas de MRSA. Cuando estos alcaloides se usaron
en combinación con antibióticos como levofloxina, cefazolina, ampicilina, vancomicina y azitromicina,
produjeron efectos terapéuticos sinérgicos similares contra la actividad de MRSA [25]. Cienfuegosia digitata
posee alcaloides altamente activos contra MRSA porque tienen la capacidad de intercalar ADN y destruir
􀀁-lactamasa [26]. Los alcaloides del tipo canthine-6-one (canthine-6-one, 8-hydroxy-canthine-6-one y 5-
hydroxy-octadeca-6- (E) -8 (Z) - dienioc ácido) se han aislado de las plantas de Allium y demostrado una
gran susceptibilidad a la actividad de MRSA [27]. Se han notificado alcaloides de 􀀁-pineno, 1,8-cineol y 􀀁-
terpineol de Callistemon rigidus con potente actividad contra MRSA [28]. Hylomecon hylomeconoides
contiene 6-methoxydihydrosanguinarine, 6-acetonylhydrosanguarine y dihydrosanguinarine. Estos
compuestos fueron muy activos contra las cepas de SARM, mientras que 6-metoxidihidrosanguinarina
causó la actividad más dominante contra el SARM [29]. El análisis fitoquímico de Pterogyne nitens condujo
al aislamiento de dos alcaloides de guanidina. Estos alcaloides de guanidina fueron galegina y pteroginidina
que poseían una fuerte actividad anti-MRSA. La actividad antibacteriana se atribuyó a la presencia de
cadenas laterales encontradas en los alcaloides de la guanidina [30]. 20-􀀁-dimetilamino-3-􀀁-
senecioilamina-16􀀁-hidro-pregn-5-5ene fue el alcaloide pregnano que se obtuvo de la planta Pachysandra
terminalis. Mostró una actividad anti-MRSA significativa por la contracción del citoplasma de una célula
bacteriana que causó la fuga de contenido intracelular, lo que finalmente condujo a la muerte celular [31].
Schinus terebinthifolius pertenece a las especies de hongos y géneros Alternaria, Colletotrichum, Diaporthe,
Penicillium y Xylaria. Tras el cribado, se informó que el 64,7% de los metabolitos secundarios producían
compuestos antimicrobianos. (E) -2-Hexylcinnamaldehyde y pyrrolopyrazine alcaloides aislados produjeron
compuestos que inhibieron el crecimiento de MRSA (CIM de 18.52 μg / mL) [32] La colchicina se deriva de
la planta Colchicum autumnale L. y ha sido explorada por su actividad antimicrobiana contra aislados
clínicos de MRSA. La actividad inhibidora del derivado de colchicina 2h con el sustituyente bis (2-metoxietil)
amina se obtuvo como máximo con la modificación en la posición C (10) -OCH3 del anillo C [33].
Los alcaloides de pirrol imidazol citrinaminas A-D y Nmethylagelongine se han extraído de Agelas citrine y
se han explorado por su susceptibilidad frente a MRSA. Se encuentra que este tipo de alcaloides revierten
la resistencia representada sinérgicamente con oxacilina al inhibir y dispersar la formación de biopelículas
en S. aureus. Esto reduce marcadamente la CIM a 4 veces [34]. Se ha informado que el alcaloide
sanguinarina posee actividad antibacteriana, pero se encontró que posee susceptibilidad sinérgica contra
los aislados clínicos de SARM cuando se combina con EDTA y estreptomicina. La combinación de un
antibiótico y el alcaloide puede volver a sensibilizar al SARM atacando muchos mecanismos de resistencia
[35]. Las extracciones etonólicas de Hylomecon hylomeconoides por los investigadores condujeron al
aislamiento de compuestos muy activos 6 methoxydihydrosanguinarine (6-MS), 6-
acetonylhydrosanguinarine, y dihydrosanguinarine. Cuando se exploró su actividad inhibitoria contra el
SARM, redujeron notablemente las concentraciones inhibitorias mínimas (CMI) que oscilaban entre 1,95 y
250 μg / ml de SARM, lo que las convirtió en posibles alternativas naturales para defender la alarmante
aparición de infecciones por SARM [29]. Para enfatizar aún más el importante papel de las plantas
convencionales, los extractos etanólicos de Ocimum sanctum mostraron actividad contra las cepas de
MRSA de la CIM variando de 1.3 a 8.2 mg / ml contra las bacterias MRSA. Los estudios de cromatografía
en capas finas confirmaron la presencia de alcaloides en el extracto, lo que sugiere su potencia aparente
frente a las bacterias resistentes [36].
Los alcaloides de bisindol, es decir, Deoxytopsentin y dibromodeoxtopsentina, son metabolitos de esponjas
naturales que se ha demostrado que son activos contra MRSA. Los estudios sugieren que la actividad
antibacteriana de esos alcaloides de bisindol se debe a su capacidad selectiva inherente para atacar e
inhibir la enzima Protein quinasa [37]. Las medicinas tradicionales populares como Vermonia blumeoides
ya están en uso en Nigeria para tratar infecciones. En busca de la droga naturalmente efectiva contra la
resistencia emergente de MRSA, Vermonia blumeoides ha sido investigada por su potencia contra MRSA.
Su extracto de cloroformo reveló la presencia de un alcaloide, lo que demuestra la actividad antibacteriana
(20 mm) contra MRSA que exhibe MIC de 1,25 2,5 mg / ml rango [38]. Para la fuerte implicación y necesidad
de la terapia convencional después de la falla de los antibióticos contra MRSA, hubo un gran avance para
encontrar nuevas moléculas que tiendan a reducir la progresión de las infecciones bacterianas y mejorar la
calidad de vida del paciente. Con este impulso, el aislamiento de 6-methoxydihydrosanguinarine (6-MS), 6-
acetonylhydrosanguinarine, y dihydrosanguinarine de Hylomecon hylomeconoides pavimentado el camino
para recuperar la sensibilidad del medicamento contra MRSA. Estos alcaloides se esfuerzan para
contrarrestar con éxito la desensibilización de las cepas de MRSA con MICs que van desde 1,95 a 250 ug
/ ml [29]. La planta de Rutaceae ha sido la fuente de alcaloides fluroquinolona y piranoquinolona,
skimmianina, kokusaginina y haplopina. Estos componentes químicos habían sido probados por su
sensibilidad contra cepas aisladas de SARM. Se descubrió que inhiben estas cepas al unirse a su ADN en
una secuencia específica y alterarlas y podría ser el límite de la pluma en la utilización como anti-SARM
[39].
3. AISLADOS CLINICOS DE MRSA Y ALCALOIDES VEGETALES RECIENTES UTILIZADOS PARA SU
TRATAMIENTO:
El primer aislado clínico de SARM se descubrió en 1961, solo un año después de la introducción de la
meticilina en los hospitales [40]. Hoy en día, las plantas se han convertido en una fuente útil e importante
de agentes antibacterianos, especialmente contra las cepas resistentes de varias especies. Estos esfuerzos
están siendo considerados por Guo-Ying Zuo, et al. [19]. Este grupo de investigadores ha trabajado en
aislamientos clínicos de MRSA de muestras de esputo de pacientes de neumonía, que ingresaron en las
unidades de cuidados intensivos de los hospitales, y estos investigadores pudieron demostrar que los
alcaloides de Berberis y Mahonia spp. (Berberidaceae), es decir, Berberina, fueron muy eficaces para
controlar el crecimiento in vitro de al menos diez cepas de SARM cuando ciertos productos vegetales se
utilizaron sinérgicamente junto con otros compuestos antibacterianos sintéticos. Hou-po es una medicina
tradicional china que contiene varios productos químicos, como alcaloides y fenoles, que se evaluó por su
actividad antibacteriana contra aislados clínicos de Staphylococcus aureus resistente a la meticilina (SARM)
por Wei-Dong Pan, et al. [41]. Los resultados de este estudio sugieren que los compuestos encontrados en
esta planta pueden trabajar in vitro contra el MRSA al alterar parcialmente la penetración de la membrana
celular bacteriana. De la misma manera, Wei-Dong Pan junto con sus colaboradores pudieron establecer
los efectos antibacterianos de los alcaloides Bisbenzylisoquinoline contra al menos diez aislados clínicos
de SARM [42] cuando se usaron de forma sinérgica con los fármacos antibacterianos convencionales. Los
extractos obtenidos de Lenzites quercina que contienen alcaloides de 14,4 a 20,7 mg / g se analizaron para
determinar MRSA obtenido del Laboratorio de Microbiología Médica, University College Hospital (UCH),
Ibadan, Oyo State y Ondo State Specialist Hospital, Akure, estado de Ondo. Estos alcaloides demostraron
propiedades antibacterianas en seis cepas de SARM [43]. Once cepas de S. aureus que eran resistentes a
la meticilina fueron analizadas Actividad antimicrobiana de MRSA de extracto acuoso bruto de T.
alternifolia. Esta planta contiene los alcaloides junto con otros fitoquímicos. El quid de esta investigación
indica que el extracto acuoso de esta planta posee muy buenas propiedades antibacterianas en
comparación con otros materiales solventes. Por otra parte, el extracto acuoso no mostró ningún efecto
citotóxico y estaba controlando el crecimiento de MRSA y VRSA [44]. El ácido fusídico (FA) y el cloruro de
berberina (BBR) se probaron para efectos sinérgicos in vitro en aislados clínicos de Staphylococcus aureus
resistente a la meticilina (SARM). Se descubrió que estos dos compuestos son muy efectivos para controlar
el crecimiento de siete cepas de una treintena de aislamientos, con marcada reducción en la formación de
biopelículas y destrucción de la biopelícula madura en MRSA [45]. Las propiedades antimicrobianas de R.
y U. californica contra MRSA han sido demostradas por Carranza, et al. Su investigación estableció que los
productos químicos de los grupos alcaloides, a saber, doméstico y nordomesticina, poseen buenas
actividades anti-MRSA [46]. Del mismo modo, Razmavar, et al. han aislado nuevas sustancias químicas de
la familia de los alcaloides a partir de extractos de hojas de Baeckea frutescens que están mostrando
resultados prometedores contra las cepas clínicas de MRSA [47].

4. MECANISMO (S) ANTIBACTERIANO (S) DE ALCALOIDES VEGETALES CONTRA MRSA

El tipo de alcaloides bis-indol tiene la capacidad de provocar un efecto antibacteriano a través de la
inhibición de la piruvato quinasa. Se requiere piruvato cinasa para producir piruvato para el ciclo de Krebs
y se espera que la inhibición de la enzima comprometa los niveles de ATP, lo que da como resultado la
alteración del metabolismo bacteriano y, en última instancia, conduce a la muerte celular bacteriana [48].
La berberina, la hidrastina y la candina son alcaloides obtenidos de Hydrastis candensis y actúan mediante
el efecto de extinción del quórum. El efecto de extinción de quórum se usa para controlar la enfermedad a
través del sistema de detección de quórum desencadenando el fenotipo patógeno. Se cree que el efecto
no fue matar a las bacterias sino apagar la expresión de los genes de los patógenos [49]. La reserpina (un
fitoalkaloide) exhibe su potencial antibacteriano al inhibir la bomba de eflujo en MRSA [50].
La inhibición de la actividad de MRSA de los alcaloides de las plantas podría atribuirse a su capacidad para
intercalar el ADN. También se ha sugerido que los componentes de los alcaloides inhiben o destruyen la
acción de la 􀀁-lactamasa [48]. El análisis de microscopía electrónica de barrido y transmisión ha indicado
que la contracción del citoplasma de las células bacterianas provocó lagunas notables entre la membrana
celular y el citoplasma de la célula, y la membrana celular severamente dañada produjo una fuga de
contenido intracelular que finalmente causó el efecto letal del alcaloide pregnano en bacterias [31]. También
se cree que los alcaloides de las quinolonas provocaron la inhibición de la ADN girasa y la topoisomerasa
IV, y podría ser el posible mecanismo, aunque todavía necesita pruebas experimentales.
5. CONCLUSIÓN
La literatura anterior revela que los alcaloides son abundantes en plantas medicinales y una amplia gama
de ellos posee una fuerte sensibilidad contra MRSA. De estos alcaloides, los más efectivos son los
alcaloides Canthine 6-one, pregnano, guanidina, bis-bencilisoquinolina, indol glucósmico, quinolona,
carbazol, esteroides y benzol [c] fenantridina. En el escenario actual de resistencia a MRSA a la mayoría
de los antibióticos disponibles, se requieren más estudios detallados sobre la eficacia, la potencia y la
seguridad de estos alcaloides, que podrían conducir al desarrollo de agentes terapéuticos más eficaces
contra el SARM.

LISTA DE ABREVIACIONES
MRSA = Staphylococcus aureus resistente a la meticilina
S. aureus = Staphylococcus aureus
MIC = Concentración Inhibitoria Mínima
CONFLICTO DE INTERESES
Los autores confirman que el contenido de este artículo no tiene conflicto de
interesar.
EXPRESIONES DE GRATITUD
Declarado ninguno.