MOSCA MEXICANA DE LA FRUTA (Anastrepha ludens)

 Especie polífaga, aunque tiene preferencia por los cítricos, especialmente la naranja y
toronja.
 Los adultos pueden tener una vida de 11 meses y es altamente fecunda, alrededor de
1500 huevos.
 Periodos prolongados de temperaturas muy bajas o muy altas, resultaran en la mortalidad
de todas las etapas de la mosca
 Es el único miembro importante del género Anastrepha que es subtropical y no tropical.
Puede soportar la congelación bien, mientras que en as zonas calientes puede morir por el
calor del sol.

Ciclo de vida

1. Los huevos son puestos debajo de la piel de la fruta hospedera, generalmente en grupo de
10.
2. Los huevos eclosionan de 6-12 días y la larva se alimenta por otros 15- 32 días a 25°C.
Cuando prevalecen temperaturas altas el desarrollo larval es más rápido.
3. La pupación ocurre bajo el suelo de la planta hospedera y los adultos emergen después de
15-19 días (en condiciones de baja temperatura)
4. Los adultos se desarrollan durante todo el año.

Daños:

 Las larvas se alimentan de la pulpa de los frutos

 Los frutos atacados pueden mostrar signos de perforaciones debido a la oviposición,
muchos de los daños se pueden producir dentro de la fruta antes de que los síntomas
externos se vean
 Recién eclosionadas las larvas se comen y penetral la pulpa de la fruta.

Bacillus thuringiensis

 Gram positiva
 Bio-plaguicida.
 Se puede aislar de suelo, agua, cadáveres de insectos, entre otros.
 Produce una o varias inclusiones para-esporales, llamados cristales en la fase estacionaria,
en cantidades que pueden ser hasta el 30 % del peso total de la célula, son liberadas al
medio las esporas cuando la célula se lisa.
 Las inclusiones contienen varios tipos de protóginas llamadas d-endotoxinas.
 La bacteria produce otras proteínas insecticidas durante diferentes fases de desarrollo y
compuestos extracelulares como: enterotoxina, fosfolipasas, proteinasas, hemolisinas,
proteínas insecticidas vegetativas, B-exotoxinas, bacteriocinas, proteínas de superficie,
antibiótico que pueden contribuir a su patogenicidad. Y además pueden funcionar como
receptor en el caso de la proteína Cyt1Aa
Método de acción de BT

1. los insectos deben ingerirlas para que ejerza su acción

2. Se disuelve en el pH alcalino del intestino medio del insecto
3. Se activan proteolíticamente
4. Se unen a receptores específicos localizados en la superficie de las membranas epiteliales
5. Las células se destruyan
6. La larva cesa de alimentarse y muere.

Aislamiento de insectos vivos o muertos

 Colecta de insectos y colocar en tubo Eppendorf de 1.5 mL estéril, se agrega 500

microlitros de LB liquido (Luria Bertani), con una punta estéril, se macera el organismo
 Se incuba a 30°C 72 horas, tomar una azada y estriar en medio LB sólido, dar choque
térmico a 60°C por 60 minutos para eliminar microorganismos contaminantes.
 Mantenimiento y conservación en Glicerol 60%

Producción

 Se inocula en un matraz Erlenmeyer de 500 mL con 100 mL de medio LB a 29°C y 200

rpm por 12 horas y a pH 7.2-7.3 usándose el 10 porciento del inoculo en los pasos
siguientes
 Fermentador a nivel matraz de 500 mL, con un volumen de operación de 100 mL. Se
hicieron cinéticas de crecimiento, tomando muestras a diferentes intervalos de tiempo y se
midió, densidad óptica (590), pH, muestras teñidas con cristal violeta para observar células
vegetativas, esporas o cristal.
 Fermentaciones a nivel de fer- mentador de 2 l con condiciones de cultivo: temperatura de
29, agitación 800 RPM, aireación de 1 VVM, pH de 7.0 y 7.5 controlado con KOH y
H3PO4. Se se realizan cineticas del crecimiento, tomando muestras a diferentes tiempos,
midiendo: Densidad optica (590 nm), pH, Oxigeno disuelto, mL residuales de KOH y
H3P04 1 N, y observaci6n al microscopio de muestras teñidas con cristal violeta para ver la
formaci6n del cristal, conteo de esporas y células vegetativas con la cámara de Neubauer.
 Fermentaciones a nivel fermentador de 14 l. condiciones de cultivo:Temperatura 29 " C,
Agitaci6n 400 y 600 RPM, Aireación 0.8 y 1.2 VVM, pH controlado a 7.0. Se realizan
cineticas de crecimiento tomando muestras cada dos horas y se mid

Bioformulacion

Medio de cultivo en g/L

 Melaza 10
 Liquido de remojo de maíz 10
 Pasta en polvo 30
 CaCo3 1
 MgSo4 .3
 ZnSO4, FeSO4, MnSO4 .02
A pH 7, 30°C y 2% de inoculo de 8 h de edad
 Se adiciona 50 mg de ingrediente activo (espora cristal)
 150 mg de cada uno de los polímeros ( grenetina, goma de acacia, alginato de sodio y
parafina) 1100 mg de materiales flotantes (corcho, aserrín, polvo de polipropileno
 10 mg de fotoprotector (verde de malaquita)

Se realiza la agitación aireación de 300 rpm

Se realiza la recuperación de los extractos con lactosa y acetona

Se realiza la evaluación y se almacena a 30°C puede duran por un año