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04/06/2018

UNIDAD 8:
CINÉTICA DE LOS
PROCESOS MICROBIANOS
Formulación de modelos matemáticos. Mecanismos
de cinética básica. Ecuación de la velocidad cinética.
Modelos de procesos de fermentación. Medida y
cuantificación de los parámetros cinéticos.

Estequimetría del crecimiento microbiano


Componentes del medio de cultivo:

• Macroelementos (del orden de los g/l)


• FCE: Fuente de carbono y energía.
• FN: Fuente de nitrógeno
• Minerales: 𝐶𝑎 , 𝑀𝑔 , 𝐻 𝑃𝑂 , 𝐾
• Buffer (citrato/fosfáto)
• Microelementos:
• Minerales: Co (II), Fe (II) (III), S (VI), Mn (II), Mo (II)
• Vitaminas.
• Factores de crecimiento

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Modelo de caja negra

𝑟
𝑟
𝑟

𝑟 𝑟

𝑟
𝑟

∆𝐻

𝑟 𝐹𝐶𝐸 + 𝑟 𝐹𝑁 + 𝑟 𝑂 → 𝑟 𝑋 + 𝑟 𝑃 + 𝑟 𝐶𝑂 + 𝑟 𝑄

Donde:
P: Producto FCE: Fuente de Carbono y energía (Sustrato)
X: Biomasa FN: Fuente de Nitrógeno

Modelo en base al sustrato


𝑟 𝐹𝐶𝐸 + 𝑟 𝐹𝑁 + 𝑟 𝑂 → 𝑟 𝑋 + 𝑟 𝑃 + 𝑟 𝐶𝑂 + 𝑟 𝑄

Tomando como base S.

𝑟 𝑟 𝑟 𝑟 𝑟
𝑎= ; 𝑏= ; 𝑌 = ; 𝑌 = ; 𝑌 =
𝑟 𝑟 𝑟 𝑟 𝑟

𝐹𝐶𝐸 + 𝑎𝐹𝑁 + 𝑏𝑂 → 𝑌 𝑋+𝑌 𝑃+𝑌 𝐶𝑂 + 𝑄

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Formula de la biomasa estándar


Organismo Formula Organismo Formula
elemental elemental
Candida utlis 𝐶𝐻 , 𝑂 , 𝑁 , Saccharomyces 𝐶𝐻 , 𝑂 , 𝑁 ,
cerevisiar
Candida utlis 𝐶𝐻 , 𝑂 , 𝑁 ,
Saccharomyces 𝐶𝐻 , 𝑂 , 𝑁 ,
Candida utlis 𝐶𝐻 , 𝑂 , 𝑁 , cerevisiar
Candida utlis 𝐶𝐻 , 𝑂 , 𝑁 , Saccharomyces 𝐶𝐻 , 𝑂 , 𝑁 ,
Klebsiella aerogenes 𝐶𝐻 𝑂 𝑁 cerevisiar
, , ,
Paracoccus 𝐶𝐻 , 𝑂 , 𝑁 ,
Klebsiella aerogenes 𝐶𝐻 , 𝑂 , 𝑁 ,
denitriticans
Klebsiella aerogenes 𝐶𝐻 , 𝑂 , 𝑁 , Paracoccus 𝐶𝐻 𝑂 𝑁
, , ,
Klebsiella aerogenes 𝐶𝐻 , 𝑂 , 𝑁 ,
denitriticans
Pseudomonas C12B 𝐶𝐻 𝑂 𝑁 Escherichia coli 𝐶𝐻 , 𝑂 , 𝑁 ,
, , ,

Aerobacter aerogenes 𝐶𝐻 , 𝑂 , 𝑁 ,

Promedio 𝐶𝐻 , 𝑂 , 𝑁 ,

Fórmula de la biomasa estándar


• Promedio: 𝐶𝐻𝟏,𝟖 𝑂 , 𝑁 ,

• C: 46,5%
• H: 6,49%
• O: 31%
• N: 10,85%
• Sales: 5-7% se toma 5%

12 + 1,8 + 0,5𝑥16 + 0,2𝑥14


𝑃𝑒𝑠𝑜 𝐶𝑚𝑜𝑙 = = 25,8
0,95

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Carbono-mol
• Cantidad de cualquier compuesto carbonado que contiene 1 mol de
carbono
Compuesto Fórmula molecular C-mol Peso 1 c-mol
Ácido oxálico 𝐶 𝐻 𝑂 𝐶𝐻𝑂 45
Ácido fórmico 𝐶𝐻 𝑂 𝐶𝐻 𝑂 46
Ácido acético 𝐶 𝐻 𝑂 𝐶𝐻 𝑂 30
Glucosa 𝐶 𝐻 𝑂 𝐶𝐻 𝑂 30
Biomasa (estándar) 𝐶𝐻 ,𝟖𝟎 𝑂 , 𝑁 , 𝐶𝐻 ,𝟖𝟎 𝑂 , 𝑁 , 25,8
Glicerol 𝐶 𝐻 𝑂 𝐶𝐻 , 𝑂 30,66
Etanol 𝐶 𝐻 𝑂 𝐶𝐻 𝑂 , 23
Metanol 𝐶𝐻 𝑂 𝐶𝐻 𝑂 32
Metano 𝐶𝐻 𝐶𝐻 16
Isoleucina 𝐶 𝐻 𝑂 𝑁 𝐶𝐻𝟐,𝟏𝟔 𝑂 ,𝟑𝟑 𝑁 ,𝟏𝟕 21,82
Alanina 𝐶 𝐻 𝑂 𝑁 𝐶𝐻𝟐,𝟑𝟑 𝑂 ,𝟑𝟑 𝑁 ,𝟏𝟕 21,99

Rendimiento en gramo y Cmol


𝑌 = ; 𝑦 = ; 𝑦 =𝑌 ;

Ejemplo:
• Sustrato: Glucosa: 𝑃𝐶𝑚𝑜𝑙 = 30 𝑔⁄𝑐𝑚𝑜𝑙
• Biomasa estándar: 𝑃𝐶𝑚𝑜𝑙 = 25,8 𝑔⁄𝑐𝑚𝑜𝑙

,
• ∆𝑋 = 12,3 𝑔⁄𝑙 𝑌 = = 0,47 𝑔 ⁄𝑔
,
,
• ∆𝑆 = 26,1 𝑔⁄𝑙 𝑦 = = 0,55
,

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Convención de nomenclatura
Todos los compuestos en Cmol con fórmula:

𝐶𝐻 𝑂 𝑁

i= 1 para biomasa
i= 2 para sustrato
i= 3 para producto
i= 4 para fuente de nitrógeno

𝐶𝐻 𝑂 𝑁 + 𝑎𝐶𝐻 𝑂 𝑁 + 𝑏𝑂 → 𝑦 𝐶𝐻 𝑂 𝑁 + 𝑦 𝐶𝐻 𝑂 𝑁 + 𝑦 𝐶𝑂 + 𝑄

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Balances de materia
𝐶𝐻 𝑂 𝑁 + 𝑎𝐶𝐻 𝑂 𝑁 + 𝑏𝑂 →

𝑦 𝐶𝐻 𝑂 𝑁 + 𝑦 𝐶𝐻 𝑂 𝑁 + 𝑦 𝐶𝑂 + 𝑤𝐻 𝑂 + 𝑄

• Carbono: 1 + 𝑎 = 𝑦 +𝑦 +𝑦
• Nitrógeno: 𝐶 + 𝑎𝐶 = 𝑦 𝐶 +𝑦 𝐶
• Hidrógeno: 𝑎 + 𝑎. 𝑎 = 𝑦 𝑎 +𝑦 𝑎 + 2𝑤
• Oxígeno: 𝑏 + 𝑎. 𝑏 + 2. 𝑏 = 𝑦 𝑏 +𝑦 𝑏 +𝑤

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Balance de combustión – N2
• ¿Qué ocurre con moléculas mas complicadas y con la
biomasa?

𝐶𝐻 𝑂 𝑁 + 𝑛𝑂 → 𝐶𝑂 + 𝑤𝐻 𝑂 + 𝑘𝑁
C: 1=1
H: a=2w
O: b+2n=2+w
N: c=2k
𝛾 = 4 + 𝑎 − 2𝑏

Donde: γ=cantidad de electrones transferidos al O2 cuando se


quema un Cmol de cualquier sustancia a CO2, H2O y alguna
forma nitrogenada
Los signos y coeficientes corresponden al estado de oxidación
del elemento

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Grado de reducción
𝐶𝐻 𝑂 𝑁 + 𝑛𝑂 → 𝐶𝑂 + 𝑤𝐻 𝑂 + 𝑘𝑁 𝑁 = 𝑁𝐻 , 𝐻𝑁𝑂 , 𝑁 , 𝑒𝑡𝑐.

• Ejemplos:

# Reacción n 𝛾 = 4 + 𝑎 − 2𝑏
1 𝐶𝐻 + 2𝑂 → 𝐶𝑂 + 2𝐻 𝑂 2 8
2 𝐶𝐻 𝑂 , + 1,5𝑂 → 𝐶𝑂 + 1,5𝐻 𝑂
3 𝐶𝐻 𝑂 + 𝑂 → 𝐶𝑂 + 𝐻 𝑂
4 𝐶𝐻 𝑂 + 0,5𝑂 → 𝐶𝑂 + 𝐻 𝑂
5 𝐶𝐻𝑂 + 0,25𝑂 → 𝐶𝑂 + 0,5𝐻 𝑂

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Balance de combustión
𝐶𝐻 𝑂 𝑁 + 𝑛𝑂 → 𝐶𝑂 + 𝑤𝐻 𝑂 + 𝑘𝑁

𝐶𝐻 + 2𝑂 → 𝐶𝑂 + 2𝐻 𝑂

C: 1=1
H: a=2w=2x2=4
O: b=2+w-2n = 2+2-2x2=0
N: c=2k=0
𝑛=2

𝛾 = 4 + 𝑎 − 2𝑏
𝛾 =4+4−0 = 8

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Grado de reducción
𝐶𝐻 𝑂 𝑁 + 𝑛𝑂 → 𝐶𝑂 + 𝑤𝐻 𝑂 + 𝑘𝑁 𝑁 = 𝑁𝐻 , 𝐻𝑁𝑂 , 𝑁 , 𝑒𝑡𝑐.

• Ejemplos:

# Reacción n 𝛾 = 4 + 𝑎 − 2𝑏
1 𝐶𝐻 + 2𝑂 → 𝐶𝑂 + 2𝐻 𝑂 2 8
2 𝐶𝐻 𝑂 , + 1,5𝑂 → 𝐶𝑂 + 1,5𝐻 𝑂 1,5 6
3 𝐶𝐻 𝑂 + 𝑂 → 𝐶𝑂 + 𝐻 𝑂 1 4
4 𝐶𝐻 𝑂 + 0,5𝑂 → 𝐶𝑂 + 𝐻 𝑂 0,5 2
5 𝐶𝐻𝑂 + 0,25𝑂 → 𝐶𝑂 + 0,5𝐻 𝑂 0,25 1

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Balance de combustión – NH3


• ¿Qué ocurre con moléculas mas complicadas y con la
biomasa?

𝐶𝐻 𝑂 𝑁 + 𝑛𝑂 → 𝐶𝑂 + 𝑤𝐻 𝑂 + 𝑘𝑁𝐻
C: 1=1
H: a=2w+3k
O: b+2n=2+w
N: c=k
𝛾 = 4 + 𝑎 − 2𝑏 − 3c

Los signos y coeficientes corresponden al estado de


oxidación del elemento

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Balance de combustión – HNO3


• ¿Qué ocurre con moléculas mas complicadas y con la
biomasa?

𝐶𝐻 𝑂 𝑁 + 𝑛𝑂 → 𝐶𝑂 + 𝑤𝐻 𝑂 + 𝑘𝐻𝑁𝑂
C: 1=1
H: a=2w+k
O: b+2n=2+w+3k
N: c=k
𝛾 = 4 + 𝑎 − 2𝑏 + 5c

Los signos y coeficientes corresponden al estado de


oxidación del elemento

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Ejemplos: Tomando como referencia H O y CO 2 2

Compuesto Fórmula C-mol Peso 1 c-mol 𝜸𝑵𝑯𝟑 𝜸𝑵𝟐


molecular
Ácido oxálico 𝐶 𝐻 𝑂 𝐶𝐻𝑂 45 1 1
Ácido fórmico 𝐶𝐻 𝑂 𝐶𝐻 𝑂 46 2 2
Ácido acético 𝐶 𝐻 𝑂 𝐶𝐻 𝑂 30 4 4
Glucosa 𝐶 𝐻 𝑂 𝐶𝐻 𝑂 30 4 4
Biomasa 𝐶𝐻 ,𝟖𝟎 𝑂 , 𝑁 , 𝐶𝐻 ,𝟖𝟎 𝑂 , 𝑁 , 25,8 4,2 4,8
(estándar)
Glicerol 𝐶 𝐻 𝑂 𝐶𝐻 , 𝑂 30,66 4,67 4,67
Etanol 𝐶 𝐻 𝑂 𝐶𝐻 𝑂 , 23 6 6
Metanol 𝐶𝐻 𝑂 𝐶𝐻 𝑂 32 6 6
Metano 𝐶𝐻 𝐶𝐻 16 8 8
Isoleucina 𝐶 𝐻 𝑂 𝑁 𝐶𝐻𝟐,𝟏𝟔 𝑂 ,𝟑𝟑 𝑁 ,𝟏𝟕 21,82 4,99 4,5
Alanina 𝐶 𝐻 𝑂 𝑁 𝐶𝐻𝟐,𝟑𝟑 𝑂 ,𝟑𝟑 𝑁 ,𝟏𝟕 21,99 5,16 5

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Resumiendo
• 𝑁 : 𝛾 = 1.4 + 𝑎. 1 + 𝑏 −2 + 𝑐 0 = 4 + 𝑎 − 2𝑏

• 𝑁𝐻 : 𝛾 = 1.4 + 𝑎. 1 + 𝑏 −2 + 𝑐 −3 = 4 + 𝑎 − 2𝑏 − 3𝑐

• 𝐻𝑁𝑂 : 𝛾 = 1.4 + 𝑎. 1 + 𝑏 −2 + 𝑐 5 = 4 + 𝑎 − 2𝑏 + 5𝑐

• 𝛾 = 4𝑛 (siendo n el coeficiente de O2)

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Balance de grado de reducción


• Los e-, disponibles del sustrato se distribuyen entre el O2,
la biomasa y el/los producto/s

𝛾 − 4𝑏 = 𝑦 𝛾 +𝑦 𝛾

Reordenando dividiendo por γs e igualando a 1

𝛾 𝛾 𝑏
𝑦 +𝑦 +4 =1
𝛾 𝛾 𝛾

Ecuación de Balance de grado de reducción

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Balances:
𝐶𝐻 𝑂 + 𝑎𝐶𝐻 𝑂 𝑁 + 𝑏𝑂 → 𝑦 𝐶𝐻 𝑂 𝑁 + 𝑦 𝐶𝐻 𝑂 𝑁 + 𝑦 𝐶𝑂 + ∆𝐻

• Balance de carbono:
• 𝑦 +𝑦 + 𝑦 = 1 + 𝑎; esta igualdad tiene un error del 5% aceptable

• Balance de grado de reducción:

• 𝑦 +𝑦 +4 = 1; esta igualdad tiene un error del 5% aceptable

• Balance de nitrógeno:
• 𝑎𝐶 = 𝑦 𝐶 +𝑦 𝐶

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Balances
• La igualdad a 1 tiene un error aceptable del 5%,
resultados por debajo de 0,95, indican errores que
pueden ser de medición o que estamos considerando mal
el metabolismo.
• Un error puede o no estar asociado al producto, en ese
caso con el 𝛾 se puede estimar e producto, de modo que
el balance de grado de reducción BGR=1.

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Estudio analítico de un proceso


Ejemplo: Cultivo aeróbico, sin formación de producto de un
m.o. estándar con glucosa y amonio con FCE y FN.
Determinaciones
experimentales:
X, S, P %O2 Y %CO2 (en
gases de salida)

𝑋 = 0,3 𝑔⁄𝑙 ; 𝑋 = 5,8 𝑔⁄𝑙


𝑆 = 10,2 𝑔⁄𝑙 ; 𝑆 = 0 𝑔⁄𝑙
𝑂 𝑡𝑜𝑡𝑎𝑙 𝑐𝑜𝑛𝑠𝑢𝑚𝑖𝑑𝑜 = 3,93 𝑔⁄𝑙
𝐶𝑂 𝑡𝑜𝑡𝑎𝑙 𝑝𝑟𝑜𝑑𝑢𝑐𝑖𝑑𝑜 = 5,46 𝑔⁄𝑙

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Modelo propuesto para el ejemplo


𝐶𝐻 𝑂 + 𝑎𝐻𝑁 + 𝑏𝑂 → 𝑦 𝐶𝐻 , 𝑂 , 𝑁 , +𝑦 𝐶𝑂 + 𝑤𝐻 𝑂 + Q

Cálculos:
∆𝑋 𝑜 𝑟 ; ∆𝑆 𝑜 𝑟 ; 𝑟𝑂 ; 𝑟𝐶𝑂 , ∆𝑃 (𝑜 𝑟 )

∆𝑋 = 5,5 𝑔⁄𝑙 ∆𝑆 = 10,2 𝑔⁄𝑙


, ,
𝐶𝑂 = = 0,124 𝑚𝑜𝑙 ⁄𝑙 𝑂 = = 0,123 𝑚𝑜𝑙 ⁄𝑙

∆𝑋 5,5 30
𝑌 = = = 0,54 𝑦 =𝑌 . = 0,62
∆𝑆 10,2 25,8

∆𝐶𝑂 0,124 ∆𝑂 0,123


𝑦 = = = 0,364 𝑏= = = 0,362
∆𝑆 10,2 ∆𝑆 10,2
30 30

24

Modelo propuesto para el ejemplo


Balance de carbono
𝑦 +𝑦 = 0,62 + 0,364 = 0,984

0,95 < 𝑦 +𝑦 < 1,05

Balance de grado de reducción


𝛾 𝑏 4,2 0,362
𝑦 + 4 = 0,62 +4 = 1,008
𝛾 𝛾 4 4

𝛾 𝑏
0,95 < 𝑦 + 4 < 1,05
𝛾 𝛾

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Estimación de rendimiento
Rendimiento máximo teórico

Del balance de carbono:


•𝑦 +𝑦 +𝑦 = 1; 𝑦 =1

Del balance de grado de reducción:

•𝑦 +𝑦 +4 = 1; 𝑦 =

26

Estimación de rendimientos
𝑦

LE: Limitado en energía


𝛾 LC: Limitado en carbono
𝛾
X1: Sustratos poco
oxidados – requieren
mucha materia
LE LC
X2 X2: Muy reducidos –
mucha energía
disponible – consumen
X1 mucho O2 y calor –
Proceso mas lento

En teoría un m.o. sigue la línea del 60% -

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Balance de entalpía
• Permite calcular el calor liberado durante un cultivo

𝐹𝐶𝐸 + 𝑎𝐹𝑁 + 𝑏𝑂 → 𝑌 𝑋+𝑌 𝑃+𝑌 𝐶𝑂 + ∆𝐻

∆𝐻 + 𝑎∆𝐻 + 𝑏∆𝐻 =𝑌 ∆𝐻 + 𝑌 ∆𝐻 + ∆𝐻

∆𝐻 = 𝑐𝑎𝑙𝑜𝑟 𝑙𝑖𝑏𝑒𝑟𝑎𝑑𝑜 𝑐𝑢𝑎𝑛𝑑𝑜 𝑠𝑒 𝑐𝑜𝑛𝑢𝑚𝑒 𝑢𝑛


𝐶𝑚𝑜𝑙 𝑑𝑒 𝐹𝐶𝐸, 𝑡𝑜𝑚𝑎𝑛𝑑𝑜 𝑐𝑜𝑚𝑜 𝑟𝑒𝑓𝑒𝑟𝑒𝑛𝑐𝑖𝑎 𝑒𝑙 𝐶𝑂

∆𝐻 = −115𝑥4𝑏

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Valores de de combustión de
diferentes compuestos
Compu Moléc C-Mol Reacción γ q q/γ
esto ula (kcal/C
mol)
Metano CH4 CH4 𝐶𝐻 + 2𝑂 → 𝐶𝑂 + 2𝐻 𝑂 8 213,4 26,7
Etanol C2H6O CH3O0,5 𝐶𝐻 𝑂 , +3 3
2 𝑂 → 𝐶𝑂 + 2 𝐻 𝑂 6 163,8 27,3
Glucosa 𝐶 𝐻 𝑂 𝐶𝐻 𝑂 𝐶𝐻 𝑂 + 𝑂 → 𝐶𝑂 + 𝐻 𝑂 4 111,9 28,0
Ac. 𝐶 𝐻 𝑂 𝐶𝐻 𝑂 + 𝑂 → 𝐶𝑂 + 𝐻 𝑂
𝐶𝐻 𝑂 4 104,8 26,2
Acético
Ac. 𝐶𝐻 𝑂 𝐶𝐻 𝑂 + 1/2𝑂 → 𝐶𝑂 + 𝐻 𝑂
𝐶𝐻 𝑂 2 61,0 30,5
Fórmico
Ac. 𝐶 𝐻 𝑂 𝐶𝐻𝑂 𝐶𝐻𝑂 + 1/4𝑂 → 𝐶𝑂 + 1/4𝐻 𝑂 1 29,4 29,4
Oxálico
Correlación empírica 27,7𝛾 𝐾𝑐𝑎𝑙
∆𝐻 = − = −115𝛾 𝑘𝐽𝑜𝑢𝑙/𝑐𝑚𝑜𝑙
𝑐𝑚𝑜𝑙

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Cinética del crecimiento biológico.


• Los m.o. se multiplican por fisión binaria, la siguiente
ecuación de velocidad de primer orden respecto de la
concentración de biomasa activa, representa este
crecimiento:

𝑟 = 𝜇𝑋 (1)

Donde:
𝑟 = 𝑣𝑒𝑙𝑜𝑐𝑖𝑑𝑎𝑑 𝑑𝑒 𝑐𝑟𝑒𝑐𝑖𝑚𝑖𝑒𝑛𝑡𝑜 𝑑𝑒 𝑙𝑜𝑠 𝑚. 𝑜. 𝑀. 𝐿 𝑇
𝜇 = 𝑣𝑒𝑙𝑜𝑐𝑖𝑑𝑎𝑑 𝑑𝑒 𝑐𝑟𝑒𝑐𝑖𝑚𝑖𝑒𝑛𝑡𝑜 𝑒𝑠𝑝𝑒𝑐í𝑓𝑖𝑐𝑜, 𝑇
𝑋 = 𝑐𝑜𝑛𝑐𝑒𝑛𝑡𝑟𝑎𝑐𝑖ó𝑛 𝑑𝑒 𝑏𝑖𝑜𝑚𝑎𝑠𝑎 𝑎𝑐𝑡𝑖𝑣𝑎, 𝑀𝐿

30

Ecuación de Monod
Describe la velocidad de crecimiento en relación a la
concentración de nutrientes.

𝑆
𝜇=𝜇
𝐾 +𝑆 (2)
Donde:
𝜇 = 𝑣𝑒𝑙𝑜𝑐𝑖𝑑𝑎𝑑 𝑚á𝑥𝑖𝑚𝑎 𝑒𝑠𝑝𝑒𝑐í𝑓𝑖𝑐𝑎 𝑑𝑒 𝑐𝑟𝑒𝑐𝑖𝑚𝑖𝑒𝑛𝑡𝑜, 𝑇
𝑆 = 𝑐𝑜𝑛𝑐𝑒𝑛𝑡𝑟𝑎𝑐𝑖ó𝑛 𝑑𝑒𝑙 𝑠𝑢𝑠𝑡𝑟𝑎𝑡𝑜 𝑙𝑖𝑚𝑖𝑡𝑎𝑛𝑡𝑒 𝑑𝑒𝑙 𝑐𝑟𝑒𝑐𝑖𝑚𝑖𝑒𝑛𝑡𝑜, 𝑀𝐿
𝐾 = 𝑐𝑡𝑒 𝑑𝑒 𝑠𝑒𝑚𝑖𝑠𝑎𝑡𝑢𝑟𝑎𝑐𝑖ó𝑛. 𝑆 𝑡𝑎𝑙 𝑞𝑢𝑒 𝜇 = , 𝑀𝐿 . Cuanto mas
bajo es su valor, mas baja es la concentración de S, para que 𝜇 → 𝜇 .
Es decir mayor afinidad de los m.o. por el sustrato

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31

Ks

32

Ks
• Depende solo del m.o. y del sustrato limitante

Sustrato (limitante) Ks (mg/l)


Glucosa 4
Lactosa 20
H2PO4- 1,6
Arginina 0,5
NH4+ 0,1-1

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Factores que afectan los parámetros del


modelo de Monod
• Los factores mas importantes que afectan a µmax son:
• Microorganismo
• pH
• Temperatura: psicrófilos, mesófilos y termófilo.
• Composición cualitativa del medio

Microorganismo µ (h-1) Tiempo de


duplicación
Bacterias 0,6-1,4 0,5-1,15
Levaduras y hongos 0,2-0,6 1,15-3,0
filamentosos
Células animales 0,01-0,04 17-70
Célula vegetal 0,007-0,03 23-100

34

Efecto del pH

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Efecto del pH

µm
Bacterias
Hongos

3 4 5 6 7 8 9 pH

36

Efecto de la temperatura

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37

Efecto de la temperatura
• La velocidad de las reacciones biológicas, es muy sensibles a la

temperatura, dado que esta no solo influye en el metabolismo de las


células, sino también en otros factores como la velocidad de
transferencia de gases, características de sedimentación, etc.

• El efecto de la temperatura sobre los parámetros cinéticos de un

proceso biológico se puede expresar:

𝐾 =𝐾 η

38

Efecto de la temperatura

𝐾 =𝐾 η

Donde:
𝐾 𝑦 𝐾 = 𝑣𝑎𝑙𝑜𝑟𝑒𝑠 𝑑𝑒𝑙 𝑝𝑎𝑟á𝑚𝑒𝑡𝑟𝑜 𝑑𝑒 𝑙𝑎𝑠 𝑡𝑒𝑚𝑝𝑒𝑟𝑎𝑡𝑢𝑟𝑎𝑠 𝑇 𝑦 20º𝐶.
η = coeficiente que depende del proceso
T= temperatura en ºC.
Variante de la ec. De Vant Hoff-Arrhenius.

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Velocidad de crecimiento

Reemplazando (1) en (2) dando la ecuación (3)

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Velocidad de utilización de sustrato


• Velocidad de utilización de sustrato (S) durante la fase de
crecimiento logarítmico.

1 (4)
𝑟 =− 𝑟
𝑌

Donde:
𝑟 = 𝑣𝑒𝑙𝑜𝑐𝑖𝑑𝑎𝑑 𝑑𝑒 𝑢𝑡𝑖𝑙𝑖𝑧𝑎𝑐𝑖ó𝑛 𝑑𝑒𝑙 𝑠𝑢𝑠𝑡𝑟𝑎𝑡𝑜, 𝑀𝐿 𝑇 .
Y= coeficiente de producción máxima, definido como la relación
entre la masa de células producidas y la masa de sustrato
consumido.

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41

Expresión de Lawrence y Mc. Carty.


Reemplazando (3) en (4) dando la ecuación (5)

−𝜇 𝑋𝑆
𝑟 =
𝑌(𝐾 + 𝑆)

Que puede reducirse a un modelo de primer orden, para


concentraciones bajas de S, y de orden cero para altas
concentraciones de S.

Primero orden: bajas concentraciones de S.


Orden cero: altas concentraciones de S.

42

Cinética de consumo de sustrato


• Dos grandes grupos dependiendo de que estén o no

relacionadas con la obtención de energía.

• No relacionadas: Sustratos distintos de la fuente de carbono y

energía (genéricamente N)

• Relacionadas: Fuentes de carbono y energía (S) y O2

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Cinética de consumo de sustrato

RL. Sustrato (FCE)

44

Cinética de consumo de sustrato

RL. FN

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45

Cinética de consumo de sustrato


• 𝑟 =

• 𝑟 = + 𝑚 . 𝑋 (Ec. De Pirt)
´

• Donde ms.X: refiere al consumo de sustrato de mantenimiento


del m.o.
• 𝑦´ Rendimiento verdadero: Cantidad de biomasa que se
obtendría si no hubiera mantenimiento.
• ms: Coeficiente de mantenimiento celular. Cantidad de sustrato
gastado en funciones no relacionadas con la duplicación
celular.

46

Cinética de consumo de sustrato

𝑟 𝑟 = + 𝑚 .𝑋
𝑟 = ´
𝑦

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Destino del sustrato usado para


mantenimiento
• Mantenimiento de gradientes de pH.
• Mantenimiento de gradientes de fuerza iónica
• Recambio de ARN
• Recambio de pared celular
• Recambio de proteínas y enzimas.
• Mantenimiento de presión osmótica
• Motilidad celular
• Transporte a través de membrana

48

Sustrato
𝐹𝐶𝐸 + 𝑎𝐹𝑁 + 𝑏𝑂 → 𝑌 𝑋+𝑌 𝐶𝑂 + 𝐻 𝑂

𝑟 𝐹𝐶𝐸 + 𝑟 𝐹𝑁 + 𝑟 𝑂 →𝑟 𝑋 +𝑟 𝐶𝑂

𝑟 𝐹𝐶𝐸 + 𝑟 𝑂 →𝑟 𝐶𝑂

𝑟 𝑟 1 𝑟 𝑟 𝑟 𝑚 .𝑋
𝑦 / = = = + = +
𝑟 𝑟 +𝑟 𝑦 / 𝑟 𝑟 𝑟 𝜇. 𝑋

𝑟 1 1 𝑚
𝑦´ / = = +
𝑟 𝑦 / 𝑦´ / 𝜇

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49

Consumo de O2
𝐹𝐶𝐸 + 𝑎𝐹𝑁 + 𝑏𝑂 → 𝑌 𝑋+𝑌 𝐶𝑂 + 𝐻 𝑂

𝑟 𝐹𝐶𝐸 + 𝑟 𝐹𝑁 + 𝑟 𝑂 →𝑟 𝑋 +𝑟 𝐶𝑂

𝑟 𝐹𝐶𝐸 + 𝑟 𝑂 →𝑟 𝐶𝑂

𝑟 𝑟 1 𝑟 𝑟 𝑟 𝑚 .𝑋
𝑦 / = = = + = +
𝑟 𝑟 +𝑟 𝑦 / 𝑟 𝑟 𝑟 𝜇. 𝑋

𝑟 1 1 𝑚
𝑦´ / = = +
𝑟 𝑦 / 𝑦´ / 𝜇

50

Cultivos anaeróbicos
𝐹𝐶𝐸 + 𝑎𝐹𝑁 → 𝑌 𝑋 + 𝑟 𝐸𝑡𝑂𝐻 + 𝑌 𝐶𝑂 + 𝐻 𝑂

𝑟 𝐹𝐶𝐸 + 𝑟 𝐹𝑁 → 𝑟 𝑋 + 𝑟 𝐶𝑂 + 𝑟 𝐸𝑡𝑂𝐻

𝑟 𝐹𝐶𝐸 → 𝑟 𝐶𝑂 + 𝑟 𝐸𝑡𝑂𝐻

𝑟 𝑟 1 𝑟 𝑟 𝑟 𝑚 .𝑋
𝑦 / = = = + = +
𝑟 𝑟 +𝑟 𝑦 / 𝑟 𝑟 𝑟 𝜇. 𝑋

𝑟 1 1 𝑚.
𝑦´ / = = +
𝑟 𝑦 / 𝑦´ / 𝜇

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51

Formación de producto
𝐹𝐶𝐸 + 𝑎𝐹𝑁 → 𝑌 𝑋 + 𝑟 𝐸𝑡𝑂𝐻 + 𝑌 𝐶𝑂 + 𝐻 𝑂

𝑟 𝐹𝐶𝐸 + 𝑟 𝐹𝑁 → 𝑟 𝑋 + 𝑟 𝐶𝑂 + 𝑟 𝐸𝑡𝑂𝐻

𝑟 𝐹𝐶𝐸 → 𝑟 𝐶𝑂 + 𝑟 𝐸𝑡𝑂𝐻

𝑟 =𝑟 +𝑟 𝑟 = 𝛼𝑟 + 𝛽𝑋

𝑟 = + 𝑟 + 𝑚 X
´ .

52

Resumiendo
𝑟 𝑟
𝑟 = + 𝑚 .𝑋 𝑟 = +𝑚 .𝑋 𝑟 = 𝛼𝑟 + 𝛽𝑋
𝑦´ 𝑦´

𝜇 𝜇
𝑞 = +𝑚 𝑞 = +𝑚 𝑞 = 𝛼𝜇 + 𝛽
𝑦´ 𝑦´

Siendo:
𝑟
𝑞 = , velocidad específica de consumo de sustrato o formación de producto
𝑋

1 1 𝑚. 1 1 𝑚
= + = +
𝑦 / 𝑦´ / 𝜇 𝑦 / 𝑦´ / 𝜇

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53

Cont
𝜇
𝑞 = +𝑚
𝑦´

𝜇 𝜇
𝑞 = +𝑚 𝑞 = +𝑚 𝑞 = 𝛼𝜇 + 𝛽
𝑦´ 𝑦´

54

Cinética de consumo de O2
• Sigue una cinética del tipo de Monod.
• Se usa el concepto de concentración crítica.
• Concentración de O2 por encima de la cual el microorganismo no
sufre cambios fisiológicos debido a este nutriente.
• Por convención se toma un 20% de la saturación.

Medimos la transferencia de O2 en base a la agitación.

1
𝑂𝑇𝑅 𝐶
𝛼

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Modelo de película
• Toda partícula, sólida o gaseosa, que se mueve dentro de

un líquido, está rodeada de una película estanca.

• Dentro de esa película solo existe transporte por difusión.

56

Modelo de película
𝐶∗ 𝑑𝐶 𝑑 𝐶
𝐽 = −𝐷 𝐷 =0
𝑑𝑧 𝑑𝑧

𝐶 Integrando entre 𝑧 = 0 y 𝑧 = 𝛿, se obtiene un perfil


lineal de C en la película y se puede derivar la
ecuación del flujo

𝑃𝑒𝑙í𝑐𝑢𝑙𝑎 𝑙𝑎𝑚𝑖𝑛𝑎𝑟 𝐷 ∗ 𝑚𝑜𝑙


𝐽= 𝐶 −𝐶 =
𝑑𝑒 espesor δ 𝐿 𝑎𝑟𝑒𝑎. 𝑡𝑖𝑒𝑚𝑝𝑜

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Cont.
𝐷 ∗
𝐽= 𝐶 −𝐶
𝐿

𝐷 𝐴 ∗
𝑂𝑇𝑅 = . 𝐶 −𝐶
𝐿 𝑉

Donde: 𝐷
𝐾 = ∶ 𝐶𝑎𝑝𝑎𝑐𝑖𝑑𝑎𝑑 𝑑𝑒 𝑡𝑟𝑎𝑛𝑠𝑓𝑒𝑟𝑒𝑛𝑐𝑖𝑎 𝑑𝑒 𝑜𝑥í𝑔𝑒𝑛𝑜
𝐿

𝐴
𝑎=
𝑉

𝑂𝑇𝑅 = 𝐾 𝑎 𝐶 ∗ − 𝐶

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KL.a
• Se mide experimentalmente y depende de:
• Diseño del reactor – Variable mas importante.
• Superficie de contacto – Aumentando la superficie de contacto
mejora la capacidad de oxidación.
• Flujo de aire – factor muy importante en reactores de mas de 100 L
• Tensioactivos – Incrementan la transferencia de O2.
• (+) Estabilizan la burbuja
• (-) Forman espuma (muy perjudicial para todo el sistema)
• Antiespumantes.
• (+) Disminuye la cantidad de espuma
• (-) Interfiere en la transferencia de O2.
• Nota: se agrega de a poco, y siempre se usa si es necesario, siempre
es preferible minimizar la espuma.

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Como aumentar la transferencia de O2


• A = KL.a menor CL (no se puede modificar, ya que la 𝑟 esta dada
por el m.o que está en cultivo y este define el CL)*1
.
*1. 𝑟 = = ;

• Donde:
• Si el sistema es batch, 𝜇 á es constante.
• X la biomasa, es modificable.
• 𝑦 Depende de la fisiología de los m.o. y no se puede modificar.

• Modificar KL.a (no se puede modificar, corresponde al sistema)


• Modificar 𝐶 ∗ según la Ley de Henry. 𝐶 ∗ . 𝐻 = 𝑃
donde 𝑃 = 𝑓(𝑃 ; 𝑋 ), se puede modificar (𝑃 ; 𝑋 )

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Como aumentar la transferencia de O2


• El sistema transfiere solo lo que los m.o. necesitan.

• Durante el cultivo:

𝑂𝑇𝑅 = 𝑟

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Fin unidad 8

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