Considere un sistema donde una lámina plana de polímero recubierto con enzima se coloca en un

recipiente de un cubilete aguitado. La velocidad de reacción máxima intrínseca (Vm’) de la enzima

es de 6x10-6 mol / s-mg de enzima.Se ha determinado que la cantidad de enzima unida a la
superficie es de 1x10-4 mg enzima / cm2 de soporte. En solución, se ha determinado que el valor
de Km es 2x10-3. El coeficiente de transferencia de masa puede estimarse a partir de
correlaciones estándar para agitado de buques. Asumimos en este caso un sistema muy mal
mezclado donde KL = 4.3x 10-5 cm / s. Cual es la tasa de reacción a una concentración en masa del
sustrato con 7x10-3 mol / l? (b) Sb =1x10-2 mol / l?

DATOS
Vm= 6x10-6 mol / s-mg
1x10-4 mg enzima / cm2 de soporte
Km=2x10-3 mol / l
KL = 4.3x 10-5 cm / s
3.2x10 a) [Sb]=7x10-3 mol / l
b) [Sb] =1x10-2 mol / l
2.2x10-10
Se estudió la hidrólisis de la sacarosa a pH = 4.5 y 25 C usando invertasa cruda obtenida de
levadura de panadería en forma libre e inmovilizada. Los siguientes datos de velocidad de
marcación se obtuvieron con 408 unidades de enzima en bruto (1 unidad = cantidad de enzima
hidrolizando 1 mmol de sacarosa / min cuando se incuba con sacarosa 0,29 M en un tampón a pH
4,5 y 25C).

A). Determine la Km y la Vm para esta reacción utilizando tanto enzimas libres como inmovilizadas.
B) ¿Los datos indican alguna limitación de difusión en la preparación de enzimas inmovilizadas?

Solución:

▹ Enzimas libres:
-1/Km = -20 .: Km = 0.05 M
1/Vm = 2 .: Vm = 0.5 mmol/ l-min
▹ Enzimas inmovilizadas:
-1/Km = -20 .: Km = 0.05 M
1/Vm = 3 .: Vm = 0.33 mmol/ l-
min