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Métodos Cuantitativos
Grupo 2LM2
Práctica No. 14
“Determinación espectrofotométrica de la constante de acidez del
indicador químico verde de bromocresol.”
Equipo 5
Integrantes:
De la Torre Ramos David Ulises
García Barrera Jorge Luis
Legaspi Salazar Diego
Profesores:
Bolaños Valerio Emma
Hernández Muñoz Alfonso
Introducción:
La forma ácida del indicador tiene un color, tal como el amarillo, con su correspondiente lmax a
una longitud de onda, y la forma básica tiene otro color, tal como el azul, con su correspondiente
lmax a una longitud de onda diferente. El verde de bromocresol es un indicador orgánico para
valoración ácido-base. Su intervalo de transición de pH es aproximadamente entre 3.8-5.4,
virando de amarillo a azul-verdoso en el rango especificado. Su uso específico es como un
indicador de pH y como un colorante de seguimiento para la electroforesis en gel de agarosa de
ADN. Se puede implementar en su forma de ácido libre (sólido marrón claro), o como una sal de
sodio (sólido de color verde oscuro). También es un inhibidor de la proteína de transporte de la
prostaglandina.
En solución acuosa, ioniza para dar la forma monoamónico (amarillo), que desprotona a pH
elevado para dar forma dianiónica (azul), que se estabiliza por resonancia. Al participar en un
equilibrio ácido-base se generan dos especies, una ácida Hln y una básica ln-. Las
concentraciones de Hln y de ln- se definen fijando el pH, mediante medidas espectrofotométricas
se puede determinar las concentraciones porque absorben diferentes longitudes de onda.
La determinación se realiza a un pH tal que ambas formas se encuentren en concentraciones
apreciables, esto es, a un pH próximo al pka de una sustancia o, lo que es lo mismo, grado de
disociación cercano al 50%. El resultado espectroscópico mostrará un punto isosbéstico.
Determinando las concentraciones de la forma asociada y disociada y midiendo el pH se puede
calcular el pka.
Desarrollo experimental:
-Obtención del espectro de absorción de la forma ácida y básica del verde de bromocresol.
700
e
.5
1 15
Resultados:
Tabla 1.1 Espectro de absorción de la forma ácida del verde de bromocresol- (pH 1.3)
0.8
Absorbancia (A)
λmax=442 nm
0.6 Punto isosbéstico:
510 nm
0.4
0.2
0
400 410 420 430 440 450 460 470 480 490 500 510 520 530 540 550 560 570 580 590 600 610 620 630 640 650 660 670 680 690 700
-0.2
Longitud de onda (λ) - nm
Figura 1.1 Espectro de absorción de la forma ácida y básica del verde de bromocresol
1.4
1.2
1
Absorbancia (A)
0.8
0.6
0.4
0.2
0
400410420430440450460470480490500510520530540550560570580590600610620630640650660670680690700
-0.2
Longitud de onda (λ) - nm
pH Aλ=442 nm Aλ=616 nm
1.4
1.2
0.8
Absorbancia (A)
0.6
0.4
0.2
0
0 0.5 1 1.5 2 2.5 3 3.5 4 4.5 5 5.5 6 6.5
-0.2
pH
Figura 2.1 Absorbancia de la forma ácida y la forma básica del verde de bromocresol en
función del pH
En el punto donde se intersectan las gráficas las concentraciones de la forma básica [𝑙𝑛− ] y de la
forma ácida [𝐻𝑙𝑛] son iguales, esto es:
[𝑙𝑛− ]
𝑝𝐻 = 𝑝𝐾𝑎 + 𝑙𝑜𝑔
[𝐻𝑙𝑛]
𝑝𝐻 = 𝑝𝐾𝑎 + log(1)
𝒑𝑯 = 𝒑𝑲𝒂
4.04=pka
𝑝𝐾𝑎 = −𝑙𝑜𝑔𝐾𝑎
10−𝑝𝐾𝑎 = 𝐾𝑎
10−4.04 = 𝐾𝑎
Ka=9.1201x10-05
pH 𝝀=𝟒𝟒𝟐
𝑨á𝒄𝒊𝒅𝒐 𝝀=𝟒𝟒𝟐 − 𝑨𝒎
𝒍𝒐𝒈
𝑨𝒎 𝝀=𝟒𝟒𝟐 − 𝑨𝒃á𝒔𝒊𝒄𝒐 𝝀=𝟒𝟒𝟐
2.95 -2.001733713
3.52 -0.788228141
4.04 -0.263020813
4.46 0.001713195
5.05 0.56754914
5.5 1.267171728
pH 4
3
y = -0.7942x + 4.5956
R² = 0.9486
2
0 𝝀=𝟒𝟒𝟐
𝑨á𝒄𝒊𝒅𝒐 𝝀=𝟒𝟒𝟐 − 𝑨𝒎
-2.5 -2 -1.5 -1 -0.5 0 0.5 1 1.5 𝒍𝒐𝒈
𝑨𝒎 𝝀=𝟒𝟒𝟐 − 𝑨𝒃á𝒔𝒊𝒄𝒐 𝝀=𝟒𝟒𝟐
𝝀=𝟒𝟒𝟐
𝑨á𝒄𝒊𝒅𝒐 𝝀=𝟒𝟒𝟐 − 𝑨𝒎
Figura 3.1 Gráfica de pH en función de 𝒍𝒐𝒈 𝝀=𝟒𝟒𝟐
𝑨𝒎 − 𝑨𝒃á𝒔𝒊𝒄𝒐 𝝀=𝟒𝟒𝟐
[𝑙𝑛− ]
𝑝𝐻 = 𝑝𝐾𝑎 + 𝑙𝑜𝑔
[𝐻𝑙𝑛]
𝑦 = 𝑏 + 𝑚𝑥
Por lo tanto cuando el segundo término sea 0, el pH es igual al pKa. Con la ecuación de la
recta graficada obtenemos el pKa:
y = -0.7942x + 4.5956
pKa=4.5956
Calculamos el Ka:
𝐾𝑎 = 10−4.5956
𝐾𝑎 = 2.5375𝑥10−05
1.9953𝑥10−05 −2.5375𝑥10−05
𝑥100 = 27.1738% Por estudio logarítmico
1.9953𝑥10−05
1.9953𝑥10−05 −9.1201x10−05
𝑥100 = 361.6854% Por absorbancia contra pH
1.9953𝑥10−05
Análisis de resultados:
Conclusiones:
Bibliografías y referencias:
● Chemistry 111 Lab. (2005). “Spectophotometry: Absorption Measurements & their Application
to Quantitative Analysis”. 12 de Octubre 2018. Oneonta, The State University of New York. Sitio
web: http://employees.oneonta.edu/kotzjc/LAB/Spec_intro.pdf