Consulta Previa. Practica 6.

Robert James Rivera

Principios generales de la espectrofotometría de absorción
En la espectrofotometría se aprovecha la absorción de radiación electromagnética en la zona
del ultravioleta y visible del espectro. La muestra absorbe parte de la radiación incidente en
este espectro y promueve la transición del analito hacia un estado excitado, transmitiendo un
haz de menor energía radiante. En esta técnica se mide la cantidad de luz absorbida como
función de la longitud de onda utilizada. La absorción de las radiaciones ultravioletas, visibles
e infrarrojas depende de la estructura de las moléculas, y es característica de cada sustancia
química.

Leyes que se aplican en el análisis espectrofotométrico.

Ley de Lambert, Ley de Lamber- Beer, Ley de Bouguer-Beer-Lambert

Componentes básicos de un espectrofotómetro.

Fuente de luz
La fuente de luz que ilumina la muestra debe cumplir con las siguientes condiciones:
estabilidad, direccionabilidad, distribución de energía espectral continua y larga vida. Las
fuentes empleadas son: lámpara de wolframio, lámpara de arco de xenón, lámpara
de deuterio y lámpara LED que se utilizan en los laboratorios.
Monocromador
El monocromador aísla las radiaciones de longitud de ondadeseada que inciden o se reflejan
desde el conjunto, se usa para obtener luz monocromática.
Compartimiento de Muestra
Es donde tiene lugar la interacción con la materia (debe producirse donde no haya absorción
ni dispersión de las longitudes de onda).
Detector
El detector es el encargado de captar la radiación y, a su vez, dejarla en evidencia para su
estudio posterior.
Fotodetectores
En los instrumentos modernos se encuentra una serie de 16 fotodetectores para percibir la
señal en forma simultánea en 16 longitudes de onda, cubriendo el espectro visible. Esto
reduce el tiempo de medida, y minimiza las partes móviles del equipo.
Celdas
Son los recipientes donde se depositan las muestras líquidas a analizar. El material del cual
están hechas varía de acuerdo a la región que se esté trabajando; son de vidrio o plástico si
se trabaja en la región visible, de cuarzo si se trabaja en la ultravioleta y de NaCl si se trabaja
la región de infrarrojo.
  ¿Por qué se selecciona como longitud de onda óptimo para una
determinación aquella que corresponde a un máximo de
absorbancia?

La longitud de onda de trabajo corresponde, generalmente, a la longitud de onda en la cual la

absorbancia del analito (sustancia a analizar) es máxima, y recibe la denominación de Lambda
máximo (λmax). Para seleccionar el λmax., se hace un espectro de absorción o curva
espectral, y que consiste en una gráfica de la absorbancia de una solución de la sustancia
absorbente de concentración adecuada, medida a distintas longitudes de onda y en ella se
determina el λmax.
 Consulte aplicaciones de esta técnica de análisis.

Las aplicaciones principales son:

 determinar la cantidad de concentración en una solución de algún compuesto utilizando

las fórmulas ya mencionadas;
 ayudar en la determinación de estructuras moleculares;
 la identificación de unidades estructurales específicas, ya que estas tienen distintos tipos
de absorbancia (grupos funcionales o isomerías);
 determinar constantes de disociación de indicadores ácido-base.
¿En qué consisten la colorimetría, turbidimetría y nefelometría?

La colorimetría es la ciencia que estudia la medida de los colores y que desarrolla métodos
para la cuantificación de la percepción del color
La turbidimetría mide la disminución de la luz transmitida a través de una suspensión de
partículas utilizando para ello un espectrofotómetro (detector en la misma dirección del haz de
luz, se mide A o T). Se suele utilizar para soluciones concentradas (para que haya una buena
disminución de la luz transmitida)
La nefelometría es un procedimiento analítico que se basa en la dispersión de
la radiación que atraviesan las partículas de materia. Cuando la luz atraviesa un
medio transparente en el que existe una suspensión de partículas sólidas, se dispersa en
todas direcciones y como consecuencia se observa turbia.