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MANUAL DE PRÁCTICAS
LABORATORIO DE
BIOQUÍMICA CLÍNICA
Compiladores:
M. en C. Rosa María de la Asunción Escalante Magaña
M. en C. Ligia María del Carmen Tolosa Mendoza
M. en C. Josefina Graciela Ancona León
UNIVERSIDAD AUTÓNOMA DE CAMPECHE
Manual de Prácticas
Laboratorio de
Bioquímica Clínica
COMPILADORES:
M. en C. Rosa María de la Asunción Escalante Magaña
M. en C. Ligia María del Carmen Tolosa Mendoza
M. en C. Josefina Graciela Ancona León
ACTUALIZADO POR:
M. en C. Leticia Rodríguez Canché
M. en C. Rosa María de la Asunción Escalante Magaña
Pág.
SUBCOMPETENCIA 1 ................................................................................................................ 1
PRÁCTICA 1. EFECTO DE LA CONCENTRACIÓN DEL SUSTRATO SOBRE LA
VELOCIDAD DE LA REACCIÓN ................................................................................................ 1
PRÁCTICA 2. EFECTO DE LA CONCENTRACIÓN DE LA ENZIMA SOBRE LA
VELOCIDAD DE LA REACCIÓN ................................................................................................ 8
PRÁCTICA 3. EFECTO DEL TIEMPO DE INCUBACIÓN SOBRE LA VELOCIDAD DE LA
REACCIÓN................................................................................................................................ 14
PRÁCTICA 4. EFECTO DE LA TEMPERATURA SOBRE LA VELOCIDAD DE LA REACCIÓN
................................................................................................................................................... 20
PRÁCTICA 5. EFECTO DEL pH SOBRE LA VELOCIDAD DE LA REACCIÓN ENZIMÁTICA
................................................................................................................................................... 26
SUBCOMPETENCIA 2 ............................................................................................................. 31
PRÁCTICA 6. EXTRACCIÓN DE AMILASA SALIVAL Y DETERMINACIÓN DE SU
ACTIVIDAD .............................................................................................................................. 31
PRÁCTICA 7. EXTRACCIÓN DE AMILASA PANCREÁTICA Y DETERMINACIÓN DE SU
ACTIVIDAD .............................................................................................................................. 35
PRÁCTICA 8. EXTRACCIÓN DE LIPASA PANCREÁTICA Y DETERMINACIÓN DE SU
ACTIVIDAD .............................................................................................................................. 40
BIBLIOGRAFÍA GENERAL....................................................................................................... 44
ANEXOS.................................................................................................................................... 46
ANEXO I. INSTRUMENTOS DE EVALUACIÓN ................................................................... 46
ANEXO II. LINEAMIENTOS GENERALES EN MATERIA DE SEGURIDAD E HIGIENE A
SEGUIR EN LOS LABORATORIOS ........................................................................................ 50
SUBCOMPETENCIA 1
PRÁCTICA 1. EFECTO DE LA CONCENTRACIÓN DEL
SUSTRATO SOBRE LA VELOCIDAD DE LA REACCIÓN
1.1 GENERALIDADES
Vmax [S]
Vo =
Km + [S]
La enzima ureasa, fue la primera enzima cristalizada en 1926 por James Summer,
la ureasa provino de la soya cuyo sustrato es la urea, y que al catalizarla produjo
la hidrólisis de la urea convirtiéndola a amoniaco y dióxido de carbono,
demostrando así que estos cristales estaban constituidos por proteínas.
La figura 1 muestra un complejo enzima-sustrato que ilustra las
complementariedades geométricas y físicas entre enzimas y sustratos.
1
Figura 1. Complejo enzima-sustrato.
1.2 OBJETIVO
2
1.3 MATERIALES, EQUIPOS Y REACTIVOS
1.4 PROCEDIMIENTO
1. Tener cuidado en usar los tubos y todo el material de estos experimentos bien
lavados y enjuagados, pues si se queda Hg en ellos pueden inactivar a la
enzima e impedir la observación de los resultados.
2. Disponer una serie de tubos como se señala en la tabla 1.
3. Mezclar el contenido del tubo después de agregar cada reactivo. El HgCl 2
detiene instantáneamente la acción de la ureasa y después de su adición no
ocurre cambio enzimático en el contenido de los tubos.
4. Remojar los tubos en agua de la llave durante 15 min. Después del
procedimiento anterior, antes de titular.
3
Tabla 1. Distribución de los reactivos en tubos para observar el efecto de la
concentración del sustrato sobre la velocidad de la reacción.
5. Con una pipeta graduada pasar 5mL del contenido del tubo T1 (blanco) a un
matraz Erlenmeyer de 25 mL.
6. Agregar 2 gotas del indicador rojo de metilo, que vira del amarillo en medio
alcalino, al rojo, en medio ácido tomando como punto final de la titulación
cuando el contenido del matraz adquiera un color intermedio (canela) que
debe ser igual para todas las titulaciones de la serie.
7. Titular con HCl 0.1 N agregando de la bureta poco a poco al mismo tiempo que
se mueve el matraz. Anotar los mL de HCl gastados que constituyen “la
titulación del blanco”.
8. Repetir el procedimiento descrito en los incisos 1, 2 y 3 para los tubos 1, 2,
3,4 y 5, así como sus respectivos testigos (2, 3,4 y 5). Anote los mL de HCl 0.1N
gastados en cada caso.
9. Restar la titulación del blanco de cada uno de los valores obtenidos, hacer una
tabla y graficar micromoles de urea descompuesta en 30 min. contra
micromoles de urea hidrolizadas.
10. Realizar los cálculos correspondientes a la tabla 2:
4
Tabla 2. Formato de expresión de los valores de la concentración de cada tubo de
experimentación correspondiente a la práctica 1.
Nota:
Cada molécula de urea da origen a 2 iones de amonio que reaccionan con el HCl
0.1 N que contiene 100 micromoles por mL, por lo que 1 mL de ésta solución
equivale 100/2, da por resultado 50 micromoles de urea, factor que se debe
multiplicar por los micromoles de urea hidrolizadas después de la titulación y
que son transformadas en amoniaco.
1.5 CUESTIONARIO
5
1.6 TRATAMIENTO Y DISPOSICIÓN DE RESIDUOS
D1, D2: Mezclar los residuos de D1 y D2, y confinar para su posterior tratamiento.
1.7 EVALUACIÓN
6
1.8 BIBLIOGRAFÍA
7
SUBCOMPETENCIA 1
PRÁCTICA 2. EFECTO DE LA CONCENTRACIÓN DE LA
ENZIMA SOBRE LA VELOCIDAD DE LA REACCIÓN
2.1 GENERALIDADES
La urea es el sustrato sobre el cual actúa la enzima ureasa: esta enzima posee una
Km (M) igual a 2.5 x 10-2, una constante de Kcat (1/S) igual a 1.0 x 10 4 esta
constante es también llamada número de recambio de una enzima.
2.2 OBJETIVO
8
2 pipetas graduadas de 1 mL 1 par de Guantes de látex
8 matraces Erlenmeyer de 25 mL 1 Googless
2 vasos de precipitado de 50 mL Baño maría a 50ºC
1 gotero Rojo de metilo como indicador
1 bureta graduada de 25 mL (solución alcalina)
1 piceta con agua destilada Solución amortiguadora de pH 7.2
1 propipeta Solución de HCl 0.1 N (50 Mmoles de
1 pinza para bureta urea)
1 pinza para tubo de ensayo
2.4 PROCEDIMIENTO
1. Tener cuidado en usar los tubos y todo el material de estos experimentos bien
lavados y enjuagados, pues si se queda Hg en ellos pueden inactivar a la
enzima e impedir la observación de los resultados.
2. Disponer una serie de tubos como se muestra en la tabla 3.
3. Con una pipeta graduada pasar 5mL del contenido del blanco a un matraz
Erlenmeyer de 50 mL.
4. Agregar 2 gotas del indicador rojo de metilo, que vira del amarillo en medio
alcalino, al rojo, en medio ácido, tomando como punto final de la titulación
cuando el contenido del matraz adquiera el primer tono rojo, el cual perdure
durante 30 seg. sin cambio alguno.
9
Tabla 3. Distribución de los reactivos en tubos para observar el efecto de la
concentración del enzima sobre la velocidad de la reacción.
5. Titular con HCl 0.1 N agregando de la bureta poco a poco al mismo tiempo que
se mueve el matraz para mezclar perfectamente. Anotar los mL de gastados
que constituyen “la titulación Testigo 1”.
6. Repetir el procedimiento descrito en los incisos 1, 2 y 3 para las muestras 2, 3,
y 4. Anotar los mL de HCL 0.1N gastados en cada caso.
7. Restar la titulación del testigo de cada uno de los valores obtenidos, hacer
una tabla y graficar micromoles de urea hidrolizada contra mL de enzima
empleada en cada tubo. Realizar los cálculos de la Tabla 4:
10
Tabla 4. Formato de expresión de los valores de la concentración de cada tubo de
experimentación correspondiente a la práctica 2
2.5 CUESTIONARIO
11
2.6 TRATAMIENTO Y DISPOSICIÓN DE RESIDUOS
2.7 EVALUACIÓN
12
2.8 BIBLIOGRAFÍA
13
SUBCOMPETENCIA 1
3.1 GENERALIDADES
14
Figura 4. Comportamiento de la velocidad de la reacción enzimática.
3.2 OBJETIVO
15
1 bureta graduada de 25 mL 25 M (con 250 Mmolas/mL (reciente)
1 piceta con agua destilada Rojo de metilo como indicador (solución
1 propipeta alcalina)
1 soporte universal Solución amortiguadora de pH 7.2
3.4 PROCEDIMIENTO
1. Tener cuidado en usar los tubos y todo el material de estos experimentos bien
lavados y enjuagados, pues si se queda Hg en ellos pueden inactivar a la
enzima e impedir la observación de los resultados.
2. Disponer una serie de tubos como sigue con un volumen total de 13.0 Ml
(Tabla 5).
3. A partir del tiempo de acción de la ureasa, transcurridos 10 min., se extraen 3
mL del contenido de cada uno de los tubos y se pasan a un matraz Erlenmeyer
de 25 mL que contenga 4 gotas de HgCl2 al 1%, cuando los 3 mL procedan del
tubo 1, y un matraz de Erlenmeyer vacio para el tubo 2 (testigo).
4. Titular a los 20 min., se repite el proceso a los 30 min., se hace la tercera
titulación. La titulación es de la forma acostumbrada. Realizar por duplicado.
Tabla 5. Distribución de los reactivos en tubos para observar el efecto del tiempo
de incubacion sobre la velocidad de la reaccion.
Procedimiento 1 2*
Urea 0.25 M (mL) 7.5 7.5
Sol. Buffer pH 7.2 (Ml) 4.5 4.5
Agua destilada (ml) 0.0 1.0
Baño María 50ºC (5 min.)
Ureasa (mL) 1.0 0.0
* Testigo
16
5. A los resultados calcular las micromoles de urea hidrolizada a cada tiempo de
análisis. Admitiendo que las concentraciones de enzima y sustrato son
óptimas, es posible considerar la reacción como monomolecular y en tal caso
la constante de velocidad por la fórmula:
En donde:
t = es el tiempo en minutos,
a = concentración de urea inicial (sustrato) expresada como 100%,
x = cantidad de urea hidrolizada en %.
3.5 CUESTIONARIO
17
3.6 TRATAMIENTO Y DISPOSICIÓN DE RESIDUOS
18
3.7 EVALUACIÓN
3.8 BIBLIOGRAFÍA
19
SUBCOMPETENCIA 1
PRÁCTICA 4. EFECTO DE LA TEMPERATURA SOBRE LA
VELOCIDAD DE LA REACCIÓN
4.1 GENERALIDADES
Las enzimas son los catalizadores de naturaleza proteica de la biosfera, las cuales
rompen o forman enlaces covalentes en los sustratos sobre los cuales actúan.
Al igual que ocurre con la mayoría de las reacciones químicas, la velocidad de las
reacciones catalizadas por enzimas se incrementan en general con la
temperatura, dentro del intervalo en que la enzima es estable y permanece
totalmente activa.
Las enzimas presentan este proceso con una marcada fragilidad térmica a
temperaturas cercanas a los 55ºC o más, perdiendo así su estructura terciaria, y
como consecuencia se alteran los sitios alostéricos e isostéricos. Como
consecuencia del proceso anterior para casi todas las enzimas muestran una
temperatura óptima de acción igual o mayor a las temperaturas de las células en
las que se encuentran. A temperatura bajas se inactivan pero recuperan su
actividad a temperatura ambiente, sin perder su estructura terciaria.
20
destrucción total probablemente a coagulación por el calor) como se observa en
la figura 6.
4.2 OBJETIVO
21
4.3 MATERIALES, EQUIPOS Y REACTIVOS
4.4 PROCEDIMIENTO
1. Tener cuidado en usar los tubos y todo el material de estos experimentos bien
lavados y enjuagados, pues si se queda Hg en ellos pueden inactivar a la
enzima e impedir la observación de los resultados.
2. Disponer una serie de tubos como se señala en la Tabla 7.
3. La titulación es de forma acostumbrada como en las prácticas anteriores.
4. Hacer una tabla y graficar las micromoles de urea hidrolizada contra
temperatura y calcule para distintos intervalos de temperatura entre 10º y
20ºC entre 20º y 30ºC, etc.
5. Escribir los resultados en la Tabla 8.
22
Tabla 7. Distribución de los reactivos en tubos para observar el efecto de la
temperatura sobre la velocidad de la reacción.
Procedimiento 1 2 3 4 Testigo*
Urea 0.25 M (mL) 0.5 1.0 2.0 5.0 7.5
Sol. Buffer pH 7.2 (mL) 11.5 11.0 10.0 7.0 4.5
Baño María ºC (5 min.) 0º 22º 50º 80º **
Ureasa (ml) 0.5 0.5 0.5 0.5 0.5
Baño María 50ºC (30 min.) 0º 22º 50º 80º ***
HgCl2 gotas 4 4 4 4 -
Volumen total 12. 5 mL. Testigo para cada muestra. ** Temperatura de cada tubo
y en seguida 4 gotas de cloruro mercúrico al 1 %. ***Temperatura de cada tubo
4.5 CUESTIONARIO
23
4.6 TRATAMIENTO Y DISPOSICIÓN DE RESIDUOS
4.7 EVALUACIÓN
24
4.8 BIBLIOGRAFÍA
1. Campbell, M. K y Farre,l S. O. (2004). Bioquimica. (4ª ed.). México:
Thomson.
2. Flores, A. L. (2008). Manual de Prácticas de Bioquímica . (2ª ed.). México: Mc
Graw-Hill / Interamericana.
3. Quesada, M. S. (2007). Manual de Experimentos de Laboratorio para
Bioquímica. (1ª ed.). Costa Rica: Editorial Universidad Estatal a Distancia
25
SUBCOMPETENCIA 1
PRÁCTICA 5. EFECTO DEL pH SOBRE LA VELOCIDAD DE LA
REACCIÓN ENZIMÁTICA
5.1 GENERALIDADES
26
5.2 OBJETIVO
5.4 PROCEDIMIENTO
1. Tener cuidado en usar los tubos y todo el material de estos experimentos bien
lavados y enjuagados, pues si se queda Hg en ellos pueden inactivar a la
enzima e impedir la observación de los resultados.
2. Disponer una serie de tubos como se señala en la Tabla 8.
27
Tabla 8. Distribución de los reactivos en tubos para observar el efecto del pH
sobre la velocidad de la reacción enzimática.
Procedimiento 1 2 3 4 5 Testigos
Urea 0.25 M (mL) en 5.0 5.0 5.0 5.0 5.0 5.0 *
agua
Sol. Buffer de pH (5 mL) pH 5.0 pH 6.0 pH 7.2 pH 9.0 pH 10 *****
Baño María 50ºC (5
min.)
Ureasa (mL) 0.5 0.5 0.5 0.5 0.5 0.5
Baño María 50ºC (30
min.)
HgCl2 gotas 4 4 4 4 4 -
* Testigo para cada muestra. ** pH de acuerdo al tubo. *** 4 gotas de cloruro mercúrico.
28
5.5 CUESTIONARIO
29
D1, D2: Mezclar los residuos de D1 y D2, y resguardar para su posterior
tratamiento.
5.7 EVALUACIÓN
5.8 BIBLIOGRAFÍA
30
SUBCOMPETENCIA 2
PRÁCTICA 6. EXTRACCIÓN DE AMILASA SALIVAL Y
DETERMINACIÓN DE SU ACTIVIDAD
6.1 GENERALIDADES
6.2 OBJETIVO
31
6.3 MATERIALES, EQUIPOS Y REACTIVOS
6.4 PROCEDIMIENTO
1. Extraer 10 mL de saliva, siendo esta la dilución. Tomar el pH de la saliva.
2. Disponer una serie de tubos como se señala en la Tabla 10.
3. Observar la coloración, anotar los colores y concluir.
32
6.5 CUESTIONARIO
1. ¿Por qué las muestras son sometidas a baño maría a 40ºC durante 30 minutos
y no a otra temperatura?
2. ¿Por qué el testigo no se le agrega muestra?
3. ¿Por qué se le agrega lugol a las muestras?
4. ¿Por qué se desarrolla el color?
33
6.7 EVALUACIÓN
Ver anexo I: Instrumentos de evaluación.
6.8 BIBLIOGRAFÍA
34
SUBCOMPETENCIA 2
PRÁCTICA 7. EXTRACCIÓN DE AMILASA PANCREÁTICA Y
DETERMINACIÓN DE SU ACTIVIDAD
7.1 GENERALIDADES
35
7.2 OBJETIVO
7.4 PROCEDIMIENTO
36
96%. Dejar esta mezcla bien tapada y a temperatura ambiente, durante 2
días, agitando suavemente en un agitador mecánico.
2. Filtrar a través de 3 capas de grasa y guardar el extracto filtrado en
refrigeración. Este extracto tiene actividad lipolítica y proteolítica
también; si se filtra a través de papel, pierde la actividad lipolítica
3. Preparar dos diluciones del extracto pancreático, así: la primera 1:10 y la
segunda 1:100, conservando también una parte sin diluir. Rotular los
extractos en la forma siguiente:
A-Sin diluir
B-diluido 1:10
C-diluido 1:100
37
Tabla 11. Distribución de los reactivos en tubos para observar la actividad de la
amilasa pancreatica.
PROCEDIMIENTO 1 2 3 4 5 6 Testigo*
Dilución mL 2.5 2.0 1.6 1.2 0.8 0.5 -
Almidón mL 2.0 2.0 2.0 2.0 2.0 2.0 2.0
Agua destilada mL 0.0 0.5 0.9 1.3 1.7 2.0 2.5
Baño María a 40ºC (30 ** ** ** ** ** ** **
min.)
Lugol (gotas) 3 3 3 3 3 3 3
* Solo un testigo. ** Agitar cada 5 minutos para evitar sedimentación.
7.5 CUESTIONARIO
1. ¿Por qué el páncreas debe ser lo más desengrasado posible y mezclado con
arena lavada?
2. ¿Por qué se guarda en refrigeración el extracto?
3. ¿Por qué si se filtra el extracto a través de papel, pierde su actividad
lipolítica?, ¿Nos ayuda esto en algo, sí o no y porque?
4. ¿Por qué se debe evitar la sedimentación?
7.7 EVALUACIÓN
7.8 BIBLIOGRAFÍA
39
SUBCOMPETENCIA 2
PRÁCTICA 8. EXTRACCIÓN DE LIPASA PANCREÁTICA Y
DETERMINACIÓN DE SU ACTIVIDAD
8.1 GENERALIDADES
La lipasa es una enzima que hidroliza a las grasas neutras hasta sus componentes:
glicerol y tres ácidos grasos, y se encuentran en las secreciones pancreáticas.
Cuando existe una enfermedad del páncreas y obstrucción de su conducto-
secretor, las grasas no son desdobladas por lo que son absorbidas normalmente
produciéndose un aumento de ellas en las materias fecales que recibe el nombre
de “Esteatorrea”.
40
emulsificación, la superficie de contacto aumenta y también la acción de la
enzima.
8.2 OBJETIVO
8.4 PROCEDIMIENTO
41
3. Filtrar a través de 3 capas de gasa y guardar el extracto filtrado en
refrigeración. Este extracto tiene actividad lipolítica y proteolítica también; si
se filtra a través de papel, pierde la actividad lipolítica.
4. Disponer una serie de tubos como se señala en la Tabla 12.
5. Al terminar el período de incubación e hidrólisis el tubo con pancreatina
fresca debe tener color amarillo. El tubo con pancreatina hervida debe
conservar el color rosa.
6. Para hacer cuantitativamente la acción de la lipasa, pesar el contenido de
los tubos a dos veces de precipitado y titular con NaOH 1.0 N hasta
neutralización completa, lo cual se observará por el retorno del color amarillo
al rosado.
8.5 CUESTIONARIO
42
3. ¿Por qué el extracto pancreático hervido se emplea como testigo?
4. ¿Por qué se emplea NaOH 1.0 N para titular?
5. Calcular los miliequivalentes de ácido graso liberado por la pancreatina en
una hora de incubación.
6. Calcular los miligramos de ácidos grasos liberados por la pancreatina en una
hora de incubación, suponiendo que el peso molecular promedio de un ácido
graso = 265
8.7 EVALUACIÓN
8.8 BIBLIOGRAFÍA
44
BIBLIOGRAFÍA GENERAL
45
ANEXOS
46
ANEXO I. INSTRUMENTOS DE EVALUACIÓN
47
ESCALA ESTIMATIVA PARA EVALUAR EL DESEMPEÑO EN EL LABORATORIO (INDIVIDUAL)
ALUMNO: Grado/grupo: Matricula:
Puntos: 1 2 3 Observaciones
Ponderación
Aspectos a evaluar Escala y sugerencias
Acondiciona y prepara A veces Con regularidad Siempre
su área de trabajo
Prepara en forma A veces Con regularidad Siempre
adecuada equipos y
materiales
Forma de trabajo del Individual Con su equipo Colaborativamente
alumno
Muy cuidadoso y
Emplea de forma Poco cuidadoso Cuidadoso
meticuloso
adecuada equipo(s),
reactivos y materiales
Muy cuidadoso y
Realiza los Poco cuidadoso Cuidadoso
meticuloso
experimentos
atendiendo a las
medidas de seguridad
Al concluir la práctica
Escasamente Medianamente Totalmente
colabora con el equipo
con la limpieza y
entrega de materiales
Total de puntos
Fuente: Martha Rosales Raya / Adecuado por comité de academia.
48
ESCALA ESTIMATIVA PARA EVALUAR LA BITÁCORA DE LABORATORIO
EQUIPO No.
Puntos Puntos
Criterio Indicadores
4 3 2 1 Ponderados
Es una libreta costurada, enumerada, en
Presentación x 0.2=
buen estado, aspecto presentable
Forma 20%
49
ESCALA ESTIMATIVA PARA EVALUAR EL REPORTE DE LABORATORIO
EQUIPO No.
Puntos Puntos
Criterio Indicadores
4 3 2 1 Ponderados
Es un texto en un folder de aspecto presentable,
Presentación elaborado a computadora, hojas blancas tamaño X 0.2=
carta, con una portada de datos generales.
Fecha de Entrega el informe de laboratorio completo en la X 0.2=
Forma 20%
50
ANEXO II. LINEAMIENTOS GENERALES EN MATERIA DE SEGURIDAD E
HIGIENE A SEGUIR EN LOS LABORATORIOS
Este documento recoge los lineamientos necesarios para llevar a cabo un trabajo
seguro y eficiente atendiendo a las indicaciones del Reglamento Federal de
Seguridad e Higiene y Medio ambiente de Trabajo, publicado en el Diario Oficial
de la Federación, el 21 de enero de 1997, Normatividad en materia de Seguridad
e Higiene de la Secretaria del Trabajo y Previsión Social, Sistema de Gestión
Ambiental Yum Kaax ISO 14001:2004 de la Universidad Autónoma de Campeche
y Reglamento Interno de los Laboratorios en los que se realizan prácticas de
docencia de la FCQB de la UAC.
51
piel, que no sea de tela ni de material plástico, incluida la suela) según lo
solicite el profesor.
No se permite ingresar con bermudas o short y, en el caso de las mujeres,
el largo de la falda debe ser debajo de la rodilla.
Hombres y mujeres con cabello largo deberán portar el pelo recogido
hacia atrás.
No llevar pulseras, colgantes, mangas anchas ni prendas sueltas que
puedan trabarse en montajes, equipos o máquinas.
No fumar, comer ni beber.
No realizar reuniones o celebraciones.
No guardar alimentos ni bebidas en los frigoríficos del laboratorio.
Mantener el orden en las sesiones de laboratorio y tratar con respeto al
laboratorista, compañeros y profesores.
Verificar que el material y los equipos de laboratorio a emplear se
encuentren en óptimas condiciones de funcionamiento.
Antes de hacer uso de cualquier material y/o equipo consulte su
operatividad con el laboratorista.
Mantener las mesas de trabajo limpias y sin objetos personales en las
superficies (libros, cajas o accesorios innecesarios) para el trabajo que se
está realizando.
Tener la autorización para el uso de un producto, equipo o instalación
concreta.
Lavar y enjuagar todo el material de vidrio con agua destilada y secarlo.
Leer la etiqueta o consultar las fichas de seguridad de productos químicos
antes de utilizarlos por primera vez.
Para efectuar pipeteos utilice siempre propipeta o perilla
No tocar ni probar, sin el uso de guantes a los productos químicos.
Calentar tubos de ensayo de lado y utilizando pinzas.
Por su seguridad utilizar gradillas y soportes.
52
Comprobar la temperatura de los materiales antes de sujetarlos
directamente con las manos.
En caso de ser necesario utilizar las campanas de extracción.
Etiquetar adecuadamente los frascos y recipientes a los que se haya
transvasado algún producto o donde se hayan preparado mezclas,
identificando su contenido, a quién pertenece y la información sobre su
peligrosidad (reproducir el etiquetado original).
Reportar cualquier accidente o anomalía ocurrida durante la práctica, de
manera inmediata al laboratorista.
Salvaguardar todos los implementos y dispositivos de seguridad e higiene
(extintor, señalamientos, regadera y lavaojos de emergencia, etc.)
habilitados en el interior del laboratorio.
Revisar la Normativa correspondiente de acuerdo a la NOM-062-ZOO-
1999, Cuidado y uso de animales de laboratorios y la NOM-087-
SEMARNAT-SSA1-2002, Protección ambiental-Salud ambiental-Residuos
peligrosos biológico-infecciosos-Clasificación y especificaciones de
manejo para el caso de emplear animales de laboratorio y muestras
biológico-infecciosas respectivamente.
El material y equipo que se rompa o sufra desperfectos en el transcurso de
la práctica, se deberá reportar al laboratorista de inmediato.
Asegurar la desconexión de equipos, agua y gas al terminar el trabajo.
Recoger materiales, reactivos, equipos, y depositar los residuos en los
contenedores correspondientes.
Lavarse las manos antes de dejar el laboratorio.
MARCO JURÍDICO
53
NOM-002-STPS-2010, Condiciones de seguridad - Prevención y protección contra
incendios en los centros de trabajo. D.O.F. 9-XII-2010.
54
NOM-087-SEMARNAT-SSA1-2002, Protección ambiental-Salud ambiental-
Residuos peligrosos biológico-infecciosos-Clasificación y especificaciones de
manejo. D.O.F. 17-II-2003.
55