Endrit​ ​Prince​ ​Illyrianhill​​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​25-09-2017

NN15B​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​Bioteknik​ ​Labbrapport​ ​1-​ ​Antibiotikaresistens

Labbrapport
-Antibiotikaresistens

Sammanfattning:
Labborationen​ ​undersöker​ ​vilken​ ​verkningsgrad​ ​6​ ​antibiotikasorter​ ​hade​ ​på​ ​två​ ​olika​ ​bakterier;
M-Luteus​ ​(Micrococcus​ ​Luteus)​ ​och​ ​E.Coli​ ​(​ ​Escherichia​ ​Coli).​ ​De​ ​antibiotikasorter​ ​som​ ​användes
var​ ​Penicillin-G,​ ​Erytromycin,Sulfa,Streptomycin,Trimetoprim​ ​och​ ​Tetracyklin.​ ​Utifrån​ ​labborationen
kunde​ ​man​ ​sedan​ ​kolla​ ​på​ ​hämmnngzonen​ ​och​ ​se​ ​vilken​ ​bakteriesort​ ​som​ ​varit​ ​resistent​ ​mot
antibiotika.Resultaten​ ​visade​ ​att​ ​M-lutens​ ​och​ ​E.Coli​ ​påverkades​ ​olika​ ​av​ ​dessa​ ​antibiotika.​ ​E.​ ​Coli
påverkas​ ​enbart​ ​av​ ​antibiotika​ ​Sulfonamid​ ​och​ ​Erytromycin.​ ​Det​ ​visade​ ​sig​ ​att​ ​E.coli​ ​hade​ ​full
resistens​ ​emot​ ​Erytomycin​ ​där​ ​hämmnigzonen​ ​var​ ​0​ ​mm.​ ​E-Coli​ ​dock​ ​en​ ​svagare​ ​resistens​ ​emot
Sulfa​ ​där​ ​hämning​ ​zonen​ ​var​ ​10​ ​mm.​ ​Den​ ​grampositiva​ ​bakterier​ ​M-Luteus​ ​påverkas​ ​enbart​ ​av
Penicillin-G​ ​och​ ​Sulfa.

Inledning:

Laborationens​ ​syfte​ ​var​ ​att​ ​analysera​ ​och​ ​undersöka​ ​antibiotika​ ​resistansen​ ​på​ ​två​ ​olika
bakteriesorter​ ​vilket​ ​var​ ​E.Coli​ ​(Escherichia​ ​coli)​ ​och​ ​M-Luteus​ ​(Micrococcus​ ​Luteus)​ ​med​ ​hjälp​ ​av
olika​ ​antibiotika​ ​lappar.

​ ​ ​ ​ ​ ​ ​Bilden​ ​illustrerar​ ​M-Luteus(kock)​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​Bilden​ ​ovan​ ​visar​ ​E.Coli​ ​(stavar)

Antibiotika​ ​är​ ​ett​ ​bakteriedödande​ ​substans​ ​som​ ​produceras​ ​av​ ​vissa​ ​mikroorganismer​ ​för​ ​att​ ​hålla
andra​ ​organismer​ ​borta,​ ​som​ ​exempelvis​ ​bakterier.​ ​Eftersom​ ​att​ ​det​ ​finns​ ​flertal​ ​olika​ ​antibiotika
som​ ​härstammar​ ​från​ ​olika​ ​organismer​ ​kommer​ ​det​ ​leda​ ​till​ ​att​ ​dessa​ ​antibiotika​ ​kommer​ ​ha​ ​olika
egenskaper.​ ​Antibiotika​ ​kommer​ ​antingen​ ​förhindra​ ​eller​ ​förstöra​ ​något​ ​som​ ​behövs​ ​för​ ​bakteriens
levnad.​ ​För​ ​att​ ​bakterien​ ​i​ ​huvud​ ​taget​ ​ska​ ​kunna​ ​överleva​ ​behöver​ ​den​ ​en
cellvägg,cellmembran,proteinsyntes​ ​och​ ​en​ ​nukleinsyra​ ​syntes.​ ​Antibiotika​ ​som​ ​tidigare​ ​nämnt​ ​har
olika​ ​egenskaper,just​ ​eftersom​ ​att​ ​de​ ​attackerar​ ​dessa​ ​essentiella​ ​delarna​ ​av​ ​mikroorganismen.
Eftersom​ ​att​ ​alla​ ​bakterier​ ​inte​ ​har​ ​samma​ ​struktur​ ​fungerar​ ​inte​ ​alla​ ​antibiotika​ ​likadant.​ ​Biologer
brukar​ ​därför​ ​ ​dela​ ​in​ ​bakterier​ ​i​ ​två​ ​grupper;​ ​Grampositiva​ ​och​ ​Gramnegativa​ ​bakterier.

Skillnaden​ ​mellan​ ​dessa​ ​bakteriegrupper​ ​ ​är​ ​själva​ ​strukturen​ ​hos​ ​mikroorganismen.​ ​Grampositiva
bakterier​ ​har​ ​endast​ ​en​ ​cellvägg​ ​med​ ​ett​ ​tjock​ ​lager​ ​av​ ​peptidoglykan.​ ​Peptidoglykanet​ ​byggs​ ​utav
N-acetylglukosamin​ ​och​ ​N-acetylmuraminsyra​ ​som​ ​är​ ​ihopkopplade​ ​av​ ​pentaglycinlänkar
Endrit​ ​Prince​ ​Illyrianhill​​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​25-09-2017
NN15B​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​Bioteknik​ ​Labbrapport​ ​1-​ ​Antibiotikaresistens

(crosslinks)​ ​med​ ​olgiopeptidkedjor​ 1​ vilket​ ​man​ ​kan​ ​se​ ​på​ ​bild​ ​2​ ​till​ ​höger.Grampositiva​ ​bakterier​ ​till
skillnad​ ​från​ ​Gramnegativa​ ​bakterier​ ​har​ ​enbart​ ​ett(1)​ ​tjockare​ ​lager​ ​av​ ​cellmembran​ ​som​ ​består​ ​av
fosfolipider.​ ​ ​Gramnegativa​ ​bakterier​ ​har​ ​dock​ ​två​ ​cellmembran,​ ​ett​ ​inre​ ​plasmamembran​ ​och​ ​ett
yttre​ ​membran.​ ​Eftersom​ ​att​ ​bakterierna​ ​kan​ ​se​ ​så​ ​olika​ ​ut​ ​i​ ​själv​ ​strukturen,​ ​kommer​ ​antibiotikan
att​ ​ha​ ​olika​ ​effektivitet.Därför​ ​kommer​ ​strukturen​ ​vara​ ​en​ ​faktor​ ​till​ ​varför​ ​bakterier​ ​bygger​ ​upp
resistens​ ​mot​ ​ ​vissa​ ​antibiotika.

Antibiotika​ ​som​ ​inriktar​ ​sig​ ​för​ ​att​ ​förhindra​ ​cellväggssyntesen​ ​är​ ​exempelvis​ ​Penicillin2,​ ​den​ ​är
också​ ​bactericidal​ ​vilken​ ​innebär​ ​att​ ​dödar​ ​bakterien​ ​direkt3.​ ​Detta​ ​antibiotikum​ ​är​ ​betydligt​ ​mer
effektiv​ ​på​ ​grampositiva​ ​bakterie​ ​än​ ​gramnegativa.​ ​Detta​ ​beror​ ​på​ ​att​ ​ ​grampositiva​ ​bakterier​ ​har
en​ ​cellvägg​ ​som​ ​direkt​ ​är​ ​utsatt​ ​för​ ​antibiotikum.​ ​Gramnegativa​ ​bakterien​ ​har​ ​ett​ ​fosfolipid​ ​lager
innan​ ​cellväggen​ ​kommer​ ​fram.​ ​För​ ​dessa​ ​gramnegativa​ ​bakterier​ ​hade​ ​det​ ​varit​ ​bättre​ ​ifall​ ​det
fanns​ ​antibiotika​ ​som​ ​hade​ ​egenskaper​ ​att​ ​lösa​ ​upp​ ​det​ ​yttre​ ​fettlagret.

Som​ ​tidigare​ ​nämnt​ ​finns​ ​det​ ​inte​ ​bara​ ​ett​ ​sätt​ ​bakterier​ ​kan​ ​bli​ ​resistenta​ ​på4.​ ​Förutom
mikroorganismers​ ​struktur​ ​finns​ ​det​ ​bakterier​ ​som​ ​kan​ ​tillverka​ ​inhibitorer​ ​som​ ​kan​ ​förhindra
antibiotikan​ ​från​ ​att​ ​attackerar​ ​bakterien.​ ​I​ ​själva​ ​bakteriecellen​ ​finns​ ​det​ ​även​ ​plasmider​ ​som​ ​är
ringformade​ ​kromosomer5​ ​som​ ​kan​ ​innehålla​ ​antibiotikaresistenta​ ​gener.​ ​Dessa​ ​gener​ ​kan
användas​ ​av​ ​ribosomer​ ​som​ ​kan​ ​tillverka​ ​skapa​ ​proteiner​ ​som​ ​motverkar​ ​antibiotikan.

Världen​ ​runt​ ​är​ ​antibiotikaresistens​ ​pågående​ ​problem​ ​som​ ​skapar​ ​enorma​ ​problem​ ​för​ ​sjuka
människor.​ ​Desto​ ​mer​ ​människor​ ​som​ ​använder​ ​dessa​ ​antibiotikum​ ​åt​ ​lättsamma​ ​förkylningar
desto​ ​större​ ​risk​ ​utgör​ ​det​ ​till​ ​att​ ​bakterier​ ​får​ ​ett​ ​selektionstryck​ ​vilket​ ​leder​ ​till​ ​att​ ​evolution​ ​sker6.
Detta​ ​kommer​ ​i​ ​sin​ ​tur​ ​leda​ ​till​ ​att​ ​det​ ​blir​ ​svårare​ ​att​ ​bota​ ​sjukdomar​ ​som​ ​skapas​ ​av​ ​bakterier.

2
​ ​https://penicillin.se/penicillin-ett-viktigt-antibiotikum/
3
​ ​Linda​ ​Ekenstierna​ ​(2005),​ ​Mikrobiologi​ ​sida​ ​89
4
​ ​https://www.folkhalsomyndigheten.se/smittskydd-beredskap/antibiotika-och-antibiotikaresistens/
5
​ ​https://www.sciencelearn.org.nz/resources/1900-bacterial-dna-the-role-of-plasmids
6
https://ehinger.nu/undervisning/kurser/biologi-2/lektioner/cell-och-molekylarbiologi/6963-antibiotikaresistens.
html
Endrit​ ​Prince​ ​Illyrianhill​​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​25-09-2017
NN15B​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​Bioteknik​ ​Labbrapport​ ​1-​ ​Antibiotikaresistens

Materiel:

● Bakterier;​ ​E.Coli​ ​(K12)​ ​och​ ​M.Luteus

● Antibiotika​ ​lappar:
-Erytromycin
-Streptomycin
-Sulfa
-Trimetoprim
-Tetracyklin

● Penicillin-G
● Sterila​ ​cellodlingsrör
● Sterila​ ​NaCl
● Sterila​ ​tops
● 2​ ​st.​ ​agarplattor
● Inkubator​ ​(inställd​ ​37°C)
● 95%​ ​etanol(alkohol
● Mikropipett​ ​(100​ ​µ​l​ ​resp.​ ​1000​ ​µ​l)
● Pincetter
● Sterila​ ​mikropipett​ ​spetsar

​ ​ ​Metod:
Förberedelser:
Man​ ​började​ ​med​ ​att​ ​anteckna​ ​ner​ ​varje​ ​bakterie​ ​sort​ ​på​ ​agarplattorna​ ​samt​ ​vilken​ ​grupp​ ​den
tillhörde.​ ​Därefter​ ​förbereddes​ ​det​ ​1​ ​ml​ ​sterilt​ ​NaCL​ ​i​ ​två​ ​provrör,​ ​samt​ ​lades​ ​4​ ​ml​ ​sterilt​ ​NaCl​-​​ ​som
sedan​ ​tillsattes​ ​i​ ​3​ ​provrör.

Utförande:
Till​ ​en​ ​början​ ​använde​ ​man​ ​sig​ ​utav​ ​en​ ​steril​ ​tops​ ​för​ ​att​ ​plocka​ ​upp​ ​10​ ​bakteriekolonier​ ​utav
bakterie​ ​sorten​​ ​M-Luteus,​ ​som​ ​sedan​ ​löses​ ​upp​ ​med​ ​1​ ​ml​ ​NaCl.​ ​Därpå​ ​tillfördes​ ​exakt​ ​50​µl​ ​av
kolloidala​ ​blandningen​ ​av​ ​fasta​ ​partiklar​ ​(suspensionen)​ ​till​ ​ett​ ​nytt​ ​provrör​ ​med​ ​4​ ​ml​ ​NaCl​ ​med
hjälp​ ​en​ ​mikropipett.​ ​Därefter​ ​fördes​ ​hela​ ​volymen​ ​i​ ​provröret​ ​över​ ​till​ ​ett​ ​ny​ ​agarplatta​ ​med
markeringen​ ​M-Luteus​.​ ​För​ ​att​ ​hela​ ​agarplattan​ ​skulle​ ​täckas​ ​med​ ​suspensionen​ ​var​ ​det
nödvändigt​ ​att​ ​vicka​ ​plattan.Självklart​ ​fick​ ​man​ ​en​ ​överföldig​ ​vätska​ ​ovanpå,​ ​och​ ​för​ ​att​ ​få​ ​bort
denna​ ​vätska​ ​behövde​ ​man​ ​luta​ ​agarplattan​ ​försiktigt​ ​för​ ​att​ ​sedan​ ​använda​ ​en​ ​suga​ ​upp​ ​den​ ​med
hjälp​ ​av​ ​en​ ​mikropipett.​ ​Slutligen​ ​lades​ ​ett​ ​agar​ ​locket​ ​på​ ​och​ ​samma​ ​process​ ​användes​ ​för​ ​den
andra​ ​bakterie​ ​sorten​ ​E-Coli.
Efter​ ​att​ ​båda​ ​agarplattorna​ ​förbereds,​ ​tog​ ​man​ ​av​ ​agar​ ​locket​ ​på​ ​plattorna​ ​och​ ​lade​ ​de​ ​i
värmeskåpen​ ​där​ ​de​ ​låg​ ​i​ ​20​ ​minuter.​ ​Under​ ​väntetiden​ ​började​ ​man​ ​att​ ​sterilisera​ ​en​ ​pipett​ ​med
95%​ ​etanol​ ​(alkohol).​ ​Efter​ ​att​ ​väntetiden​ ​var​ ​över​ ​lades​ ​sex​ ​stycken​ ​antibiotika​ ​lappar​ ​runt​ ​om
agarplattan​ ​med​ ​ca​ ​2​ ​cm​ ​avstånd​ ​från​ ​plattans​ ​kant​ ​med​ ​hjälp​ ​av​ ​den​ ​steriliserade​ ​pipetten.​ ​Tillslut
lades​ ​dessa​ ​platorna​ ​i​ ​inkubatorn​ ​som​ ​hade​ ​en​ ​temperatur​ ​på​ ​37°C,​ ​där​ ​de​ ​låg​ ​i​ ​ca​ ​18​ ​timmar.
Dagen​ ​därpå​ ​fotograferades​ ​resultaten​ ​i​ ​samband​ ​med​ ​att​ ​man​ ​mätte​ ​diametern​ ​av​ ​varje
hämningzon(vilket​ ​var​ ​området​ ​utan​ ​bakterie).​ ​Resultaten​ ​dokumenteras​ ​och​ ​en​ ​tabell​ ​gjordes​ ​för
att​ ​förtydliga​ ​ ​resultaten.​ ​Resultaten​ ​finner​ ​man​ ​både​ ​i​ ​tabell​ ​1​ ​och​ ​tabell​ ​2​ ​sida​ ​3.
Endrit​ ​Prince​ ​Illyrianhill​​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​25-09-2017
NN15B​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​Bioteknik​ ​Labbrapport​ ​1-​ ​Antibiotikaresistens

Bilden​ ​ovan​ ​illustrerar​ ​metoden​ ​av​ ​labborationen.​ ​Denna​ ​bild​ ​är​ ​tagen​ ​ifrån​ ​Bioteknik​ ​NN15B-classroom

Resultat:
Tabell​ ​1​ ​nedan​ ​visar​ ​verkningsgraden​ ​som​ ​dessa​ ​6​ ​olika​ ​antibiotika​ ​påverkade​ ​M-Luteus
(Micrococcus​ ​Luteus).​ ​Som​ ​man​ ​kan​ ​se​ ​så​ ​hade​ ​alla​ ​antibiotika​ ​en​ ​effektiv​ ​verkningsgrad​ ​emot
bakterien.​ ​Att​ ​radien​ ​är​ ​över​ ​14​ ​mm​ ​påvisar​ ​att​ ​antibiotikum​ ​kunde​ ​hämma​ ​bakterien,​ ​samt​ ​påvisar
resultatet​ ​att​ ​ingen​ ​resistens​ ​uppstått.​ ​Däremot​ ​ser​ ​vi​ ​att​ ​M-Luteus​ ​varit​ ​helt​ ​resistent​ ​mot​ ​Sulfa
eftersom​ ​att​ ​hämming​ ​zonen​ ​var​ ​0​ ​mm.​ ​Penicillinet​ ​däremot​ ​hade​ ​en​ ​hämmnigszon,​ ​dock​ ​en
väldigt​ ​lite​ ​vilket​ ​tyder​ ​på​ ​en​ ​svag​ ​resistans.​ ​Samma​ ​sak​ ​gäller​ ​Trimetoprim​ ​som​ ​hade​ ​en
hämmningzon​ ​på​ ​9​ ​mm.På​ ​tabell​ ​två​ ​kan​ ​vi​ ​se​ ​att​ ​alla​ ​antibiotika​ ​förutom​ ​Sulfa​ ​och​ ​erytromycin
hade​ ​en​ ​effektiv​ ​påverkan​ ​på​ ​E-Coli.​ ​Den​ ​gramnegativa​ ​bakterien​ ​E-coli​ ​var​ ​helt​ ​resistent​ ​mot
Erytromycin​ ​men​ ​svagare​ ​resistent​ ​mot​ ​sulfa.

Bakteria​ ​1:​ ​Micrococcus​ ​Luteus

Antibiotika: Hämningszon(mm)

Tetracyklin ca​ ​14​ ​mm

​ ​Erytromycin ca​ ​16​ ​mm

Streptomycin ca​ ​15​ ​mm

Penicillin ca​ ​6​ ​mm

Sulfa ca​ ​ ​0​ ​mm

Trimetoprim 9​ ​mm
Tabell​ ​1​ ​visar​ ​en​ ​godtycklig​ ​radie​ ​runt​ ​antibiotika​ ​lapparna​ ​där​ ​bakterietillväxten
har​ ​hämmats(enbart​ ​M-Luteus)
Endrit​ ​Prince​ ​Illyrianhill​​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​25-09-2017
NN15B​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​Bioteknik​ ​Labbrapport​ ​1-​ ​Antibiotikaresistens

Bakteria​ ​2:​ ​E.​ ​Coli

Antibiotika: Hämningszon(mm)

Tetracyklin 16​ ​mm

Erytromycin 0​ ​mm

Streptomycin ca​ ​16​ ​mm

Penicillin ca​ ​15​ ​ ​mm

​ ​Sulfa ca​ ​10mm

Trimetoprim ca​ ​21​ ​mm

Tabell​ ​2​ ​visar​ ​en​ ​godtycklig​ ​radie​ ​runt​ ​antibiotika​ ​lapparna​ ​där​ ​bakterietillväxten
har​ ​hämmats(enbart​ ​E-coli)

Bilden​ ​1.​ ​ ​Visar​ ​en​ ​agarplatta,där​ ​antibiotika​ ​utsatts​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​Bild​ ​2.​ ​Visar​ ​en​ ​agarplatta,​ ​där​ ​antibiotika​ ​utsatts
för​ ​E-Coli​ ​bakterier.​ ​Ifall​ ​det​ ​inte​ ​finns​ ​en​ ​hämning​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​för​ ​M-Luteus​ ​bakterier.
zon​ ​innebar​ ​det​ ​att​ ​bakterien​ ​är​ ​resistent​ ​mot​ ​just​ ​den
antibiotikan

​ ​Bilden​ ​3​ ​visar​ ​ ​hur​ ​effektiv​ ​dessa​ ​antibiotika​ ​är​ ​på​ ​gramnegativa​ ​samt​ ​grampositiva​ ​bakterier
​ ​Linda​ ​Ekenstierna,​ ​(2005),​ ​Mikrobiologi​ ​sida​ ​89.
Endrit​ ​Prince​ ​Illyrianhill​​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​25-09-2017
NN15B​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​Bioteknik​ ​Labbrapport​ ​1-​ ​Antibiotikaresistens

Diskussion:

Ifall​ ​vi​ ​använder​​ ​bild​ ​3​ ​som​ ​referensvärden​ ​kan​ ​på​ ​så​ ​sätt​ ​se​ ​om​ ​resultaten​ ​vi​ ​fick​ ​var​ ​giltiga.​ B
​ ild​ ​3
visar​ ​vilken​ ​effekt​ ​specifika​ ​antibiotika​ ​har​ ​mot​ ​ ​grampositiva​ ​och​ ​gramnegativa​ ​bakterier.​ ​Eftersom
att​ ​vi​ ​laborerade​ ​med​ ​en​ ​grampositiv(M-Luteus)​ ​bakterie​ ​och​ ​en​ ​gramnegativ​ ​bakterie​ ​kan​ ​vi​ ​på​ ​så
sätt​ ​se​ ​över​ ​bilderna​ ​samt​ ​resultaten​ ​och​ ​därmed​ ​dra​ ​en​ ​slutsats.​ ​I​ ​den​ ​bifogade​ ​bilden​ ​vid​ ​resultat
sektionen​ ​kan​ ​vi​ ​se​ ​att​ ​erytromycin​ ​hade​ ​en​ ​effektivare​ ​påverkan​ ​på​ ​Grampositiva​ ​bakterier​ ​än
gramnegativa​ ​bakterier.​ ​Detta​ ​stämmer​ ​väl​ ​överens​ ​med​ ​de​ ​resultat​ ​som​ ​vi​ ​fick.​ ​Kollar​ ​vi​ ​på​ t​ abell
2​ ​ ​kan​ ​vi​ ​se​ ​att​ ​hämning​ ​zonen​ ​runt​ ​antibiotikumet​ ​ ​i​ ​E.Coli​ ​bakterierna​ ​var​ ​0​ ​mm.​ ​Detta​ ​påvisar​ ​i
sin​ ​tur​ ​en​ ​resistans​ ​emot​ ​Erytomycinet.​ ​Penicillinet​ ​däremot​ ​som​ ​tidigare​ ​nämnt​ ​attackerar
cellväggssyntesen,därför​ ​är​ ​det​ ​betydligt​ ​mer​ ​effektiv​ ​emot​ ​grampositiva​ ​bakterier​ ​eftersom​ ​att​ ​de
bakterierna​ ​har​ ​cellväggen​ ​som​ ​ett​ ​yttre​ ​skydd.​ ​Penicillinet​ ​kommer​ ​att​ ​binda​ ​till​ ​PBP​ ​vilken
kommer​ ​förhindra​ ​tvärbindningen​ ​mellan​ ​polypeptidbindningen​ ​och​ ​cellväggen​ ​hos​ ​bakterien​ ​vilket
resulterar​ ​till​ ​bakterien​ ​dör/hämmas7​ ​som​ ​i​ ​bilden.​ ​I​ ​teorin​ ​skulle​ ​antibiotikumet​ ​tetracyklin​ ​vara​ ​lika
effektiv​ ​emot​ ​mot​ ​de​ ​olika​ ​bakteriegrupperna.​ ​I​ ​bägge​ ​resultat​ ​tabellerna​ ​ser​ ​vi​ ​dock​ ​skillnader​ ​där
det​ ​antibiotikumet​ ​var​ ​mer​ ​effektiv​ ​emot​ ​E.Coli​ ​som​ ​hade​ ​fick​ ​ut​ ​en​ ​radie​ ​på​ ​16​ ​mm.​ ​Ser​ ​vi​ ​över
tabellerna​ ​igen​ ​kan​ ​vi​ ​se​ ​att​ ​sulfonamiderna​ ​(preparaten)​ ​hade​ ​samma​ ​verkningsgrad​ ​på​ ​bägge
bakterierna.​ ​Sulfonamiderna​ ​är​ ​ett​ ​antibiotikum​ ​som​ ​använder​ ​sig​ ​utav​ ​kompetitiv​ ​resistens​ ​där
antibiotikumet​ ​förhindrar​ ​tillverkningen​ ​av​ ​folsyra​ ​genom​ ​att
genom​ ​att​ ​utföra​ ​en​ ​substitution​ ​med​ ​PABA​ ​och​ ​därmed​ ​bli
en​ ​inaktiv​ ​substans8.​ ​Dock​ ​som​ ​vi​ ​kan​ ​se​ ​på​ ​resultaten​ ​så
framkommer​ ​det​ ​att​ ​sulfa​ ​preparaten​ ​hade​ ​större​ ​påverkan
på​ ​M-Luteus(grampositiv)​ ​än​ ​E.Coli.​ ​Dock​ ​måste​ ​man
komma​ ​ihåg​ ​att​ ​själv​ ​strukturen​ ​av​ ​G+​ ​och​ ​G-9​ ​kan​ ​ha
påverkat​ ​resultatet.
Trimetoprim​ ​hade​ ​stark​ ​effekt​ ​på​ ​M-luteus​ ​men​ ​en​ ​svag
effekt​ ​på​ ​E.Coli.​ ​Eftersom​ ​det​ ​inte​ ​finns​ ​någon​ ​referenstabell
på​ ​detta​ ​är​ ​den​ ​enda​ ​förklaringen​ ​till​ ​varför​ ​antibiotikumet​ ​hade​ ​bättre​ ​effekt​ ​på​ ​M-luteus;
Grampositiva​ ​bakteriernas​ ​struktur,​ ​med​ ​enbart​ ​en​ ​cellvägg.
Slutligen​ ​kan​ ​man​ ​konstatera​ ​att​ ​labborationen​ ​stärker​ ​den​ ​kända​ ​forskningen​ ​som​ ​tas​ ​upp​ ​i
böckerna​ ​där​ ​Penicillin​ ​enbart​ ​är​ ​effektivt​ ​emot​ ​grampositiva​ ​bakterier,​ ​och​ ​detta​ ​beroende​ ​på​ ​de
olika​ ​bakteriegruppernas​ ​strukturer.​ ​Det​ ​visade​ ​sig​ ​att​ ​bägge​ ​bakterierna​ ​hade​ ​resistens​ ​emot​ ​olika
antibiotika.​ ​E.Coli​ ​ ​var​ ​resistent​ ​mot​ ​Erytromycin​ ​medan​ ​M​ ​luteus​ ​var​ ​resistenta​ ​mot
sulfonamiderna.​ ​Seri​ ​vi​ ​över​ ​bakteriegrupperna​ ​som​ ​helhet​ ​var​ ​den​ ​grampositiva​ ​M-luteus​ ​mer
resistent​ ​överlag​ ​än​ ​vad​ ​den​ ​gramnegativa​ ​E.coli​ ​var.​ ​Detta​ ​ser​ ​ganska​ ​bekant​ ​ut​ ​ifall​ ​vi​ ​tittar​ ​på
verkningsgraden​ ​på​ ​bild​ ​3​ ​ ​över​ ​G+​ ​och​ ​G-​ ​bakterier.​ ​Liknande​ ​laborationer​ ​är​ ​väldigt​ ​lärorika​ ​och
nyttiga​ ​för​ ​ ​att​ ​kunna​ ​förstå​ ​innebörden​ ​och​ ​konsekvenserna​ ​av​ ​antibiotikaresistens.​ ​Genom​ ​att​ ​se
vilka​ ​antibiotika​ ​som​ ​fungerar​ ​bäst​ ​på​ ​olika​ ​bakterier​ ​kan​ ​man​ ​på​ ​så​ ​sätt​ ​ ​korrekt​ ​dela​ ​ut​ ​antibiotika,
och​ ​på​ ​så​ ​sätt​ ​minska​ ​risken​ ​för​ ​antibiotikaresistens.​ ​Eftersom​ ​ifall​ ​man​ ​tar​ ​antibiotika​ ​för​ ​ofta​ ​så

7
​ ​https://web.archive.org/web/20111107125942/http://www.srga.org/kompendier/ANTI/old/anti1.htm
8
https://ehinger.nu/undervisning/inaktuella-kurser/mikrobiologi/lektioner/988-antibiotika-med-effekt-pa-cellme
mbranet-och-nukleinsyrasyntesen-kompetitiv-inhibition-med-strukturanaloger.html
9
​ ​https://www.folkhalsomyndigheten.se/smittskydd-beredskap/antibiotika-och-antibiotikaresistens/
Endrit​ ​Prince​ ​Illyrianhill​​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​25-09-2017
NN15B​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​Bioteknik​ ​Labbrapport​ ​1-​ ​Antibiotikaresistens

kan​ ​det​ ​som​ ​tidigare​ ​nämnt​ ​ske​ ​ett​ ​selektionstryck​ ​som​ ​i​ ​sin​ ​tur​ ​gör​ ​bakterier​ ​resistenta​ ​mot
antibiotika.

Felkällor​ ​som​ ​kan​ ​ha​ ​uppstått​ ​under​ ​labben​ ​skulle​ ​exempelvis​ ​kunna​ ​vara​ ​att​ ​vi​ ​inte​ ​lade
antibiotika​ ​lapparna​ ​korrekt,​ ​symmetriskt​ ​sätt.​ ​På​ ​så​ ​sätt​ ​kan​ ​själva​ ​hämning​ ​zonen​ ​kanske​ ​blivit
felaktig.​ ​Ett​ ​konkret​ ​exempel​ ​på​ ​detta​ ​ser​ ​vi​ ​på​ ​ ​bild​ ​1​ ​ ​där​ ​två​ ​antibiotika​ ​lappar​ ​står​ ​alldeles​ ​för
nära​ ​varandra​ ​vilket​ ​resulterar​ ​till​ ​att​ ​hämning​ ​zonerna​ ​går​ ​in​ ​i​ ​varandra​ ​vilket​ ​leder​ ​till​ ​att​ ​det​ ​bli
svårt​ ​att​ ​läsa​ ​av​ ​radien/diametern.​ ​För​ ​att​ ​förbättra​ ​detta​ ​moment​ ​skulle​ ​vi​ ​exempelvis​ ​kunna
använda​ ​oss​ ​utav​ ​större​ ​agarplattor.​ ​Fler​ ​förbättringsmetoder​ ​som​ ​skulle​ ​införas​ ​skulle​ ​exempelvis
kunna​ ​vara​ ​att​ ​utföra​ ​labben​ ​flera​ ​gånger​ ​och​ ​på​ ​så​ ​sätt​ ​få​ ​ut​ ​ett​ ​medelvärde​ ​vilket​ ​eliminerar
eventuella​ ​(små)​ ​felkällor​ ​som​ ​kan​ ​ha​ ​framkommit.
Endrit​ ​Prince​ ​Illyrianhill​​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​25-09-2017
NN15B​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​ ​Bioteknik​ ​Labbrapport​ ​1-​ ​Antibiotikaresistens