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ISSN: 0258-5995
revcubanaquimica@cnt.uo.edu.cu
Universidad de Oriente
Cuba
I
Facultad de Biología, Universidad de La Habana, Ciudad de La Habana, Cuba, IIFacultad de Química,
Universidad Nacional Autónoma de México, México D.F.
z Resumen
Los contaminantes químicos presentes en las aguas residuales, como la materia orgánica, el
nitrógeno amoniacal (N-NH4+), el fosfato (P-PO43-) y los metales pesados, causan efectos tóxicos sobre
los seres vivos y serios problemas de contaminación en los ecosistemas impactados con ellos. El
tratamiento biológico con bacterias puede ser empleado en el manejo de la calidad de las aguas, debido
a su capacidad para degradar, transformar y capturar estos contaminantes. El objetivo de este trabajo
fue determinar la remoción de materia orgánica, nitrógeno, fósforo y metales pesados por trece aislados
bacterianos autóctonos, en presencia de efluentes sintéticos que simulan aguas contaminadas. Se
emplearon aislados bacterianos rizosféricos autóctonos y se determinó la capacidad de remoción de los
contaminantes de interés frente a soluciones simuladas de efluentes domésticos e industriales, cuantificando
la demanda química de oxígeno (DQO), el N-NH4+, el P-PO43-, el plomo (Pb2+), el cadmio (Cd2+), el
cromo (Cr6+) y el mercurio (Hg2+). Se determinó el porcentaje de remoción, así como la significación en
la disminución de la concentración inicial de los contaminantes del efluente. Gran parte de los aislados
presentaron altos valores de remoción de materia orgánica y fósforo, incluso con valores del 100% de
remoción, y aunque en menor cuantía, también se observó la remoción de nitrógeno y de los metales
pesados por algunas bacterias; con varios de los aislados se detectaron comportamientos de multirremoción.
Los resultados promueven la futura aplicación de los microorganismos empleados en tratamientos
biotecnológicos de aguas residuales contaminadas.
Palabras clave: contaminantes químicos, bacterias, remoción.
z Abstract
Chemical contaminants in wastewaters, such as organic matter, ammonia nitrogen (N-NH4+),
phosphate (P-PO43-) and heavy metals cause toxic effects on living beings and serious pollution on
ecosystems impacted. The biological treatment with bacteria can be used in the management of water
quality due to the potentiality of these microorganisms to degrade, transform, and capture these pollutants.
The purpose of this study was to determine the elimination of organic matter, nitrogen, phosphorus and
heavy metals by thirteen indigenous bacterial isolates, in the presence of synthetic effluent that simulate
contaminated water. Rhizospheric bacterial isolates were used and it was determined its capacities for
removal of contaminants of interest by means of solutions simulating domestic and industrial effluents;
the chemical oxygen demand (COD), N-NH4+, P-PO43-, the lead (Pb2+), cadmium (Cd2+ ), chromium
(Cr6+ ) and mercury (Hg2+) were determined. The percentage of removal and the significance in
decreasing the initial concentration of pollutants in the effluent were determined too. Most of the isolates
showed high removal of organic matter and phosphorus, even with values of 100% of removal and also
the removal of nitrogen and heavy metals by bacteria was observed, but in a lesser extent; with several
isolates were detected multiremoval behaviors. The results promote the further implementation of the
used microorganisms in biotechnology treatments of contaminated wastewaters.
Key words: chemical contaminants, bacteria, removal.
mg/L, para lograr un agua residual de tipo sanitario de Pb 2+ + Cd 2+ + Hg2+ + Cr 6+ (TAN3110), con
contaminación promedio, según Metcalf y Eddy, /7/. concentración de plomo y cromo 1 mM, cadmio 0,6
mM y mercurio 0,01 mM. Se enfrentó 0,03g de
Enfrentamiento de aislados a agua residual biomasa frente a 15 mL de la solución mixta
con metales pesados correspondiente. Se incubó a 30 ± 2 °C, 100 r.min-1,
72 h.
Como punto de partida, se empleó el crecimiento
de cada aislado en medio de cultivo líquido caldo Cuantificación de la remoción de
nutriente, de 24 h de crecimiento, a 30±2 °C, en contaminantes
agitación a 100 r.min-1. Se colectaron las células por Antes de la cuantificación en todos los ensayos, se
centrifugación a 10 000 r.min-1 durante 20 min; se separó la biomasa de la solución sintética, por
lavaron con agua bidestilada, y se centrifugó; se centrifugación a 10 000 r.min-1 durante 10 min y se
eliminó el sobrenadante y se recuperó la biomasa analizó el sobrenadante.
bacteriana.
Métodos analíticos para la determinación
Los ensayos de biosorción se realizaron de acuerdo de DQO, N y P
con patrones de multirresistencia a los metales plomo,
cromo, mercurio y cadmio, mostrados en estudios La DQO se determinó por el método colorimétrico
anteriores por cada aislado. Se emplearon las siguientes de reflujo cerrado, el N-NH4+ por el método de
soluciones mixtas (pH 7): Pb2+ + Hg2+ (TAN229); Nessler directo (Micro-escala) y el P-PO43- por el
Pb2+ + Cr6+ + Hg2+ (TAN1115, TAN219, TAN217, método del molibdato de amonio, según APHA-
TAN118, TAN316, TAN1113, TAN117, TAN216, AWWA-WPCF, 1998 y Norma Mexicana NMX-
TAN221, TAN119); Pb2+ + Cd2+ + Hg2+ (TAN1111); AA- 034-SCFI-2001, 2001 /8,9/.
El % de remoción se calculó según la siguiente fórmula:
Fig. 1 Porcentajes de remoción de DQO, nitrógeno y fósforo por los trece aislados bacterianos frente
a un agua residual sintética compleja. Condiciones de cultivo: temperatura 30 ± 2°, pH 7, 72 h
de contacto, 100 r.min-1. Los resultados son el promedio de tres repeticiones y las barras
de error representan el error estándar.
Existen reportes de diferentes cepas bacterianas empleando microorganismos /15/, pero esto ocurre
que pueden realizar la remoción de materia orgánica casi siempre cuando se trabaja con agua residual de
y fósforo de un agua contaminada, debido a que ellas poca complejidad.
emplean como fuentes nutricionales estos compuestos,
pero los resultados de este trabajo resaltan teniendo La mayor concentración de amonio en el efluente,
en cuenta que se trabajó con un agua compleja que que se encontró en algunos casos, pudiera deberse a
presentó una variada mezcla de compuestos y aún así las transformaciones que ocurrieron en el agua producto
se observó una disminución de los contaminantes en de la acción microbiana sobre la variedad de
el efluente tratado. compuestos del agua residual. Además, en este
resultado podría estar influyendo la premisa de que
Los porcentajes de remoción obtenidos son algunos para convertir biológicamente el amonio del agua
similares y otros superiores a los niveles logrados con residual en dinitrógeno, se necesita la oxidación
otros microorganismos /14, 15/, no obstante el 100 % completa a nitrato seguido de la desnitrificación
que presentaron algunos aislados es difícil de obtener. heterotrófica o la presencia de bacterias anamóxicas
A pesar de las similitudes con otros estudios en este en el sistema /16/.
trabajo la interacción de las biomasas con el agua
residual fue un tiempo más corto, por lo que estos Los resultados diferentes mostrados entre los
aislados autóctonos además de llevar a cabo la remoción aislados frente a cada contaminante, así como las
de contaminantes, pueden realizar el proceso en un diferencias de respuestas al comparar las
tiempo relativamente pequeño, característica deseable remociones de los diferentes contaminantes, se
en un proceso de tratamiento. explican debido a que cada interacción
microorganismo-agua residual muestra un
Los valores de remoción para el nitrógeno no funcionamiento fisiológico específico /17/, de
fueron tan satisfactorios. Según lo informado por acuerdo con el tipo de microorganismo, así como a
otros autores en ocasiones se puede obtener una la interacción particular que se establece con cada
remoción de nitrógeno amoniacal por encima del 50 % compuesto.
- : (la remoción de este metal no se estudió para este aislado), ***p < 0,001
La diferencia de comportamientos entre los aislados sea menor que en un sistema simple /21/, pues en
puede deberse a la interacción específica de cada ocasiones la presencia de cualquier ión metálico en la
bacteria con cada metal y por la influencia de los mezcla, ya sea binaria o de más de dos metales, tiene
factores abióticos bajo los cuales se desarrolló el un fuerte efecto antagonista en los procesos de
experimento /18/. Que algunos de los aislados hayan biosorción /22/.
mostrado remoción de los metales de manera
Numerosos autores han informado la capacidad
individual, e incluso multirremoción, a pesar de no
de diferentes cepas bacterianas para la remoción de
haber alcanzado altos valores, es importante, teniendo
metales /23, 24/, pero la mayoría de los resultados se
en cuenta que los cuatro metales ensayados se
relacionan con remoción de compuestos menos tóxicos
encuentran entre los de mayor toxicidad y, además,
que los estudiados y en el caso de emplearlos en la
porque se trabajó con concentraciones muy superiores
investigación, en pocas ocasiones se ensaya la remoción
a los límites máximos permisibles en aguas, según la
de todos, además se trabaja con menores
Norma Cubana NC 27: 1999 /19/, vigente en la
concentraciones.
actualidad.
La búsqueda de cepas que muestren remoción de Teniendo en cuenta los datos, estas biomasas
más de un metal /20/, es de gran interés, ya que en los pudieran ser valoradas para su empleo en tecnologías
ecosistemas, de manera natural, se presentan todos para el tratamiento de aguas residuales contaminadas
los elementos en interacción. con metales pesados, con el correspondiente estudio
del mecanismo de remoción y de la interacción con
A pesar de no haberse encontrado elevados niveles
residuales reales que en su composición presenten
de remoción hay que tener en cuenta que los
metales pesados.
experimentos se realizaron enfrentando cada biomasa
bacteriana a soluciones mixtas con los metales y Los aislados bacterianos estudiados se obtuvieron
cuando se trabaja con un sistema multimetal puede de aguas contaminadas, por lo que probablemente los
encontrarse que la cantidad total de metal biosorbido comportamientos presentados en la remoción de los
contaminantes son un reflejo de la respuesta 2. JARUSUTTHIRAK, C., G. AMYB, J-P. CROUÉ. "Fouling
Characteristics of Wastewater effluent organic matter (EfOM)
adaptativa de los microorganismos en esos
isolates on NF and UF membranes", Desalination. Vol. 145,
ambientes impactados /25/. 2002, págs. 247-255.
3. PAREDES, D., P. KUSCHK, T. S. MBWETTE, F. STANGE,
Los resultados demuestran que muchos de los
R. A. MÜLLER, H. KÖSER, "New Aspects of Microbial
aislados presentaron eliminación de más de una fuente Nitrogen Transformations in the Context of Wastewater
de contaminación, ya sean contaminantes presentes Treatment – a Review", Eng. Life Sci., vol. 7, núm 1, 2007,
en efluentes domésticos como industriales, lo que págs. 13–25.
realza su importancia, pues es difícil obtener cepas 4. AKPOR, O.B., M. MUCHIE, "Bioremediation of Polluted
Wastewater Influent: Phosphorus and Nitrogen Removal",
con múltiples potencialidades; por lo que la aplicación Scientific Research and Essays. Vol. 5, núm. 21, 2010, págs.
de estos aislados pudiera ser de amplio espectro, una 3222-3230.
vez se profundicen los estudios con ellos. 5. CAÑIZARES, R.O., "Biosorción de metales pesados mediante
Conclusiones
el uso de biomasa microbiano". Revista Latinoamericana de
Microbiología. Vol. 42, 2000, págs.. 131-143.
6. VILCHEZ, R. "Eliminación de metales pesados de aguas
Los presentes resultados podrían contribuir al subterráneas mediante sistemas de lechos» (Tesis Doctoral),
fortalecimiento de los estudios de las Instituto del Agua, Universidad de Granada, 2005.
potencialidades que presentan los 7. METCALF and EDDY, Wastewater Engineering. Treatment,
disposal, reuse, Mc Graw-Hill International, 1991.
microorganismos para la remoción de
8. APHA, AWWA y WPCF, Standard Methods for the
contaminantes y a su propuesta como alternativas Examination of Water and Wastewater, American Public
para el saneamiento de las aguas, en lo que Health Association 1015 Fifteenth Street, N.W. Washington,
existen todavía insuficientes estudios. Muchos de D.C.USA, 20th Edition,1998, págs. 981.
los aislados presentaron altos valores de remoción 9. NORMA MEXICANA NMX-AA- 034-SCFI-2001. Análisis
de agua – Determinación de la demanda química de oxígeno en
de materia orgánica y fósforo y en menor cuantía
aguas naturales, residuales y residuales tratadas – Método de
remoción de nitrógeno y metales pesados tóxicos, prueba.
resultando algunos de ellos efectivos en la remoción 10.VIEIRA, R., B. VOLESKY, "Biosorption: a Solution to
de más de un contaminante, a pesar de haberse Pollution?", International Microbiology. Vol. 3, 2000, págs.
enfrentado a altas concentraciones de estos 17-24.
11.GUPTA, R., P. AHUJA, S. KHAN, R.K. SAXENA, H.
compuestos. Estos resultados convierten a estos
MOHAPTRA, "Microbial Biosorbents: Meeting the
aislados autóctonos en buenas propuestas para su Challenges of Heavy Metal Pollution in Aqueous Solutions".
implicación en tratamientos biotecnológicos de En Current Science. Vol. 78, 2000, págs. 967-973.
aguas residuales contaminadas, ya sean efluentes 12.PETHKAR, K., R.P. GAIKAIWARI, K.M. PAKNIKAR,
"Biosorptive Removal of Contaminating Heavy Metals from
domésticos o industriales. Plant Extracts of Medicinal Plants". En Current Science. Vol.
80, 2001, págs. 1216-1218.
Agradecimientos 13.TABACCHIONI, S., A. BEVIVINO, C. DALMASTRI, L.
CHIARINI, "Burkholderia Cepacia complex in the
Esta investigación fue apoyada por International Rhizosphere: a Minireview". Ann. Microbiol. Vol. 52, 2002,
Foundation for Science (IFS), Stockholm, Sweden, a págs. 103–117.
través de la beca W/4860-1 otorgada a Irina Salgado 14.PESSOA, A. K., S. M. TAUK, R. NAVES, D. DE
Bernal. Los autores también agradecen al personal de FRANCESCHI, "Performance of the Constructed Wetland
System for the Treatment of Water from the Corumbataí
los Laboratorios 301 al 303, de la Facultad de Química, River". En Brazilian Archives of Biology and Technology.
Conjunto E y Conjunto D, de la UNAM, México, por Vol. 51, núm. 6, 2008, págs. 1279 – 1286.
sus facilidades para la realización de parte del trabajo 15.MORENO, M., B. NARANJO, A. KOCH. "Evaluación de
experimental. dos métodos para la reducción de nitrógeno, fósforo y DQO
Bibliografía
de aguas residuales, mediante un cultivo axénico de
cianobacterias y un consorcio microbiano, inmovilizados y en
suspensión". En Rev. Ciencia. Vol. 13, núm. 1, 2010, págs. 55
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