INSTITUTO POLITÉCNICO NACIONAL

ESCUELA NACIONAL DE CIENCIAS BIOLÓGICAS

U.D.A. BIOQUÍMICA

GONZÁLEZ MEDRANO JUAN CARLOS

TÉLLEZ SANDOVAL LUIS DIONEY

GRUPO 2OV1 SECCION 2

CUEVAS DE TITULACION DE AMINOACIDOS

(TITULACIONES POTENCIOMETRICAS)

Introducción
Las titulaciones acido- base son de gran perder un protón y formar su base
interés tanto para la industria como para conjugada(A-) se define mediante una
el correcto funcionamiento metabólico de constante de equilibrio (K )para la
las células, para mostrar visualmente su reacción reversible:
uso es importante tomar en cuenta el
comportamiento de sus graficas en la cual
el pH (o pOH) va contra los mL del
titulante, en solución acuosa los ácido
fuerte y base fuerte se encuentran
Las constantes de disociación de los
totalmente disociados por lo cual el pH se ácidos (constantes de equilibrio) son a
puede calcular directamente de las menudo designadas como K a. Los ácidos
cantidades estequimétricas de ácido y más fuertes como el fórmico y el láctico,
base que van reaccionando. En titulación tienen constantes de disociación más
acido débil base fuerte la gráfica muestra altas; el pK a es análogo al pH y se define
un incremento rápidamente con los mediante las ecuaciones:
primeros mL de la base, a medida de que
incrementa la cantidad de la base
disminuye el cambio en el pH, esto es
conocido como una sustancia Objetivo
amortiguadora ya que el cambio del pH en
Explicar el comportamiento de
este punto es bajo Cada ácido tiene una
electrolitos débiles y fuertes, cuando
tendencia característica a perder su
estos se titulan con una base fuerte y
protón en solución acuosa. Cuanto más
comprobar el carácter anfotérico de los
fuerte sea el ácido mayor será la
aminoácidos y su estructura de ion polar,
tendencia a perder el protón. La
efectuando la titulación de los grupos
tendencia de cualquier ácido (HA) a
amino por el método de Sörensen.
 Resultados

Alícuota (mL) Titular con 20mL de NaOH 0.1 N Titular con 20 mL de HCL 0.1 N

HCL 0.1 N 20 Ácido acético 0.1 Glicina 0.1 N 20 20 mL de glicina Glicina 0.1 N 20 20 mL de glicina
mL N 20 mL Ml +2 mL de formol mL + 2 mL de formol
neutro neutro

pH pH pH pH pH pH

0 1.2 2.7 3.7 3.9 3.8 4.1

2 1.2 3.3 8.2 5.3 2.8 2.9

3 1.3 3.7 8.8 5.7 2.4 2.4

5 1.4 4.2 9.2 6.4 2 2

5 1.6 4.7 9.5 7 1.8 1.8

1 1.7 4.9 9.6 7.2 1.7 1.8

1 1.8 5 9.7 7.4 1.7 1.7

1 1.9 5.2 9.7 7.5 1.6 1.7

1 2.3 5.6 9.8 7.7 1.6 1.7

*.2 **.5 2.4 5.9 9.8 7.8 1.6 1.7

*.3 **.5 2.9 6.8 9.9 7.9 1.6 1.7

*.1 3.6

*.1 4.9

*.1 5.7

*.1 6.1

*.1 8.4
Discusión
Al graficar los datos de pH obtenidos
experimentalmente con ayuda del
potenciómetro en nuestras soluciones,
construimos la curva de titulación del
Ácido Clorhídrico (HCL) y del Ácido Acético
(CH3COOH), siendo el primero un ácido
fuerte y el segundo uno débil. Ambos
titulados con una base fuerte como lo es
el Hidróxido de Sodio (NaOH); lo que
observamos es que en el Ácido Clorhídrico
(HCl) el valor de pH se mantiene casi
constante hasta llegar a la mitad de la
titulación, donde sube bruscamente hacia
su pH neutro. En el caso del CH3COOH al
ser titulado con NaOH observamos en
nuestra curva de titulación cambios
bruscos al inicio y al final de la valoración,
mientras que en la parte media el pH casi
no varía, entonces decimos que esta zona
presenta una buena capacidad
amortiguadora ante cambios de pH, hay
un cambio de dirección o sentido en la
curva, por lo que es un tampón o la zona
reguladora de pH. Sabemos que el HCl es
un ácido fuerte, mientras que el
CH3COOH es uno débil, el que sea un
ácido fuerte nos indica que se disocia
completamente, pero un ácido débilse
disocia parcialmente. Para calcular
cuantitativamente la proporción en que lo
hace, nos ayuda la constante de
disociación o Kd. La cual se expresa como
el cociente de productos sobre reactivos,
en el caso del CH3COOH, el cual
empleamos:
Ahora bien, a la mitad de nuestra
titulación, la cantidad de ácido acético y
su sal conjugada con la que contamos, es
la misma, a este punto lo llamamos punto
de equivalencia, usando la ecuación de
Henderson-Hasselbach:
Obtenemos que el pH es igual al pK
(pH=pK)
Por lo que decimos que el pK es el pH
cuando la concentración de ácido y su
base conjugada son las mismas,
interpolando en la gráfica, el punto de
equivalencia, obtuvimos un pK de 4.6. Y
utilizando la fórmula:
pK = -log Kd
Kd = 10-4.6
Kd = 2.511 x 10-5
Este fue el valor de constante de
disociación del ácidoacético que
obtuvimos experimentalmente.
En la gráfica, podemos observar también
las titulaciones de la Glicina, con HCl y
NaOH, en las cuales las curvas que
obtuvimos están invertidas una respecto
a la otra, con esto comprobamos el
carácter anfotérico de los aminoácidos,
pues nos indica que el grupo amino en
estado ionizado (-NH3+) se comporta
como ácido y el carboxilo en estado
ionizado se comporta como base. Además
al agregar formol neutro (CH2O) a la
glicina la curva de titulación con HCl no
varía apreciablemente, mientras que en la
curva de titulación con NaOH sí se observa
un gran cambio; esto porque al titular con también es posible deducir el pK del
una base fuerte, el grupo amino pasa de analito.
ser una amina secundaria a una terciaria
(se vuelve más ácido) El pH al cual la Bibliografía
glicina se encuentran en su forma Lehninger, Albert., Nelson, David L., Cox,
zwitteriónica, es conocido como punto Michael M., (1993)³ Principios de
isoeléctrico
Bioquímica´. Segunda Edición, Ediciones
pI, el cual se calcula mediante la
Omega, Barcelona, España.
ecuación:
http://docencia.izt.uam.mx/sgpe/file
s/users/uami/jaislocr/BIOQUIMICA_I/PR
ACTICA_3.pdf
Nuestro valor de punto isoeléctrico
aplicando la fórmula, fue el siguiente: Houston, M.E.; 2006. Biochemistry primer
for exercise science . 3a ed.
pI = 2.25 + 9.72 / 2
pI= 5.98
El pKa lo obtuvimos al interpolar en la
gráfica el pH a la mitad de la titulación de
la glicina con HCl y el pKb al interpolar el
pH a la mitad de la titulación con NaOH.
Conclusiones
• Conocer el concepto de ácido y base de
Bronsted y Lowry nos es de gran
importancia para deducir la forma en que
se comportan ciertos reactivos al
interactuar con otros.
• Esta práctica pude llevarse a cabo
gracias a una de las propiedades más
importantes de los aminoácidos, su
comportamiento como electrolitos
• La titulación ácido-base es un
procedimiento analítico cuyo objetivo es
determinar la concentración de un analito
con propiedades ácidas o básicas,
utilizando una disolución valorada de una
base o ácido, mediante una reacción de
neutralización para formar una sal y agua.
Asimismo, mediante una titulación