INFORME 6

AMINOACIDOS Y PROTEINAS

Resumen
El presente informe se describe los métodos para las diferentes pruebas como lo son el
Ensayo de Biuret, Reacción Xantoprotéica, Ensayo de Millón, Ensayo de Hopkin’s – Cole,
Ensayo de Sakaguchi, Ensayo para detectar azufre, Determinación cuantitativa de grupos
carboxilos en una proteína (Titulación de Sorensen). Para este procedimiento se usaron
algunos compuestos orgánicos - para obtener un mayor rendimiento del producto.

Palabras claves: Millon, triptófano, metales.

1. Introducción
En la prueba de Hopkins-Cole, el color es debido a la presencia del grupo triptófano,
aunque el triptófano puro no da la prueba excepto en presencia de trazas de iones férricos o
cúpricos. Los nitratos, cloratos, nitritos o el exceso de cloruro impiden la reacción, y trazas
de sulfato de cobre aumenta su sensibilidad. La reacción de Millon, la cual es debida a la
presencia del grupo hidroxifenilo, (-C6H4OH) en la molécula de proteína. En el caso de las
proteínas en forma aniónica se neutralizan por los iones de los metales pesados y
precipitan. Un exceso de álcali ocasiona la precipitación y un exceso de reactivo puede
solubilizar el precipitado, por lo que se debe efectuar cuidadosamente el ensayo.

2. Materiales y métodos

- Espátula
- Gradilla, 20 Tubos de ensayo, pinzas para tubo de ensayo
- Vaso de precipitados 250mL
- Mortero
- Erlenmeyer 50mL, Bureta 25mL, Pipeta 10mL
- Soporte universal, Mechero Bunsen, Trípode, Malla, pinzas con nuez
- Agitador de vidrio, Cinta de enmascarar, Vidrio de reloj, Papel absorbente
- Reactivos suministrados por el laboratorio
- Agua destilada, NaOH(ac) 10% y 0,1N; PbNO3(ac) 10%, HNO3(ac), CuSO4(ac)
0,5%, H2SO4(l), formol, Reactivo de Sakaguchi, Ácido Glioxilico, Reactivo de
Millón.
- 200mL de Leche de vaca en bolsa, 1 huevo fresco, gelatina sin sabor, 200g de
Leche de soya, otras fuentes de proteína que abunden en su zona (cada equipo de
trabajo –aprendientes- debe llevarlo al laboratorio)

3. Resultados
 Las pruebas y el reconocimiento en la práctica al ser positivas indicaban un cambio 23
de color o una reacción esto se podría dar por la desnaturalización de la proteína o lo 24
aminoácidos que la componen dependiendo también del reactivo.

4. Análisis de resultados
PRUEBAS
Reacción Detección de
Biuret Millón Hopkin´s Cole Sakaguchi Sorensen
Xantoprotéica Azufre
Esta reacción es Se lleva a Fue positivo Al realizar la Los
positiva cuando cabo para tirosina reacción de la aminoácidos
la molécula agregando a (color rojo ++), muestra de sulfurados se
contiene dos la muestra a leche evaporada proteínas en descomponen al
uniones ensayar (por (color rojo +), medio ácido tratarlos con
peptídicas o más ej. clara de albúmina de sulfúrico solución de
cercanas entre sí huevo, o huevo (rojo concentrado , NaOH en
(es decir, leche) ácido claro +) y frente al ácido caliente,
tripéptidos en nítrico harina de trigo ( glioxilico formando
adelante). Se concentrado amarillo-rojo +); (Reactivo de sulfuro de sodio
realiza tratando en caliente. indicando la Hopkins-Cole) como
la solución a presencia de aparece color producto. Éste
ensayar tirosina endichas violeta en la se pone en
con CuSO4 en muestras, ya que interface solución evidencia
medio alcalino la prueba es H2SO4, debido a acidificando con
de NaOH. específica para la formación de un ácido
este aminoácido, un colorante concentrado y
el cual contiene similar al índigo. colocando en la
un anillo de boca del tubo un
benceno al que s papel mojado
e une un grupo con acetato de
hidroxilo (figura Pb:
8).
Las proteínas La reacción La reacción es Se observa la
dan color es positiva En esta positiva cuando formación de un
violeta, las para prótidos pruebalos comp los prótidos sólido negro-
peptonas (PM que contienen uestos mercúric poseen amarronado de
mayor 5000) aminoácidos os enmedio fuert aminoácidos con sulfuro de
color rojo- con anillos emente ácido (ác núcleo indólico plomo:
morado. El color aromáticos. idonítrico del re (Triptófano).
desarrollado se En la activo) se conde
debe a la reacción nsancon el
formación de un estos anillos grupo fenólico
complejo de se nitran, por formando un
coordinación lo que compuesto de co
con el Cu++ aparece el lor rojo ladrillo
color o rojizo.
amarillo
intenso de
 sus derivados
nitrados.

5. Conclusiones
Mediante las pruebas realizadas en laboratorio, se logró identificar la presencia
de27aminoácidos; las proteínas están constituidas por aminoácidos, por lo cual estos
métodos se basan28en el reconocimiento de estos, en diferentes muestras.

6. Anexos

Reacción de Biuret Reacción xantoproteica

Reacción de Hopkins-Cole

Reconocimiento de aminoácidos que poseen azufre

Reacción del Millón

INFORME 7
Ácidos Carboxílicos Y Derivados

Resumen

Este dicho informe es el encargado de introducir al aprendiente a los fundamentos del

análisis químico (reactividad y comportamiento) de ácidos carboxilicos y derivados para
Establecer la reactividad de algunos ácidos carboxilicos y derivados a través de pruebas de
análisis cualitativo, identificando así mismo características químicas particulares.

Palabras claves: Reactividad, Carboxílicos, reacciones químicas

Introducción
Esta práctica está dirigida a reconocer el grupo funcional de los ácidos carboxílicos y sus
derivados, comprobar algunas de sus reacciones más características y determinar sus
índices analíticos, especialmente el equivalente de neutralización y el numero/índice de
saponificación
Materiales Y Métodos

 Tubos de ensayo
 Vaso de precipitados de 100mL y 250mL
 Erlenmeyer de 100mL y 250mL
 Pipeta de 5mL y 10mL
 Trípode, malla de asbesto y mechero
 Bureta de 25mL
 Soporte universal
 Pinzas para bureta
 Ácido fórmico
 Ácido acético
 Ácido oxálico
 Ácido láctico
 Ácido benzoico
 Ácido sulfúrico
 Etanol
 Solución de NaHCO3 (5%)
 NaOH(ac) 0,1M
 KOH(ac) (20%)
 Fenolftaleína
 Manteca de cerdo, o algún producto graso (cada grupo de aprendientes debe llevar
por lo menos 20g)
 Guantes de nitrilo, Gafas de seguridad translucidas, Blusa para laboratorio blanca
manga larga.

Métodos

1. Esterificación

1. Tome un Erlenmeyer pequeño de 100mL, adicione 5mL de etanol y 5mL de ácido

acético glacial.
2. Adicione 5 gotas de ácido sulfúrico concentrado y caliente en baño de agua
hirviendo, durante 5 minutos.
3. Enfríe la solución y determine el olor de los vapores producidos.
4. Formule la ecuación correspondiente.
PRECAUCIÓN
No caliente la mezcla directamente a la llama, los líquidos y vapores formados son
inflamables.

2. Saponificación

1. Añada a un tubo de ensayo 2 mL de grasa y 2 mL de KOH al 20%. Agite

vigorosamente.
2. Caliente el tubo a baño maría de 20 a 30 minutos.
 PRECAUCIÓN: Este atento, pueden presentarse proyecciones.

3. Pasado este tiempo, verifique las fases que se formaron en el sistema. Una fase
contendrá solución de NaOH sin reaccionar, junto a la glicerina formada. Otra al
jabón producido, mientras que una tercera tendrá parte del producto graso que no
reacciono. ¿Cuál es cada una de ellas?
4. Registre sus observaciones

3. Resultados
4. Análisis de resultados

Teniendo en cuenta los resultados experimentales y los datos teóricos podemos afirmar con
claridad que es la parte fundamental del documento, se realiza amplia y profundamente.

Anexos

PROPIEDADES QUIMICAS
El comportamiento químico característico de los ácido carboxílicos está determinado por su
grupo funcional el carboxilo (-COOH), veremos que casi
en todas susreacciones, los cambios ocurren en el grupo hidrófilo (-OH) del –COOH.
Acidez.-
Los ácidos carboxílicos son electrolitos débiles, es por ello que cuando interactúan con el
agua se ionizan en forma parcial.
Formación de sales.-
Los ácidos carboxilicos reaccionan con facilidad con losmetales alcalinos desprendiendo
gas hidrógeno y formándose la sal correspondiente.

Reducción de los ácidos a alcoholes

Para reducir un ácido carboxílico se emplea con mucha frecuencia en el laboratorio de
hidruro doble de litio y aluminio, Li AlH4 ya que es un agente reductor muy poderoso, y es
por ello que se obtienen excelentes medicamentos de la reacción.
 5. Conclusiones

Aprendi el manejo de instrumental de laboratorio asociado a procedimientos relacionados

con la química orgánica.Y la apropiación y aplicación del lenguaje tecnico y cientifico
propio. Como también luego de realizar la experiencia, se comprueba o no si se alcanzaron
los objetivos de la práctica laboratorio de química orgánica.

Adquisición de capacidad para investigar a través de la indagación de información

relevante en el laboratorio y diversas fuentes documentales.
 INFORME 8

RESUMEN SEPARACIÓN DE PIGMENTOS VEGETALES POR

CROMATOGRAFÍA DE PAPEL

1. INTRODUCCION

La cromatografía en papel es una técnica utilizada en los laboratorios para realizar análisis
cualitativos de muestras, su procedimiento es sencillo, aunque su sensibilidad no es muy
alta.
La fase estacionaria está constituida por una tira de papel cromatógrafo o de filtro, mientras
que la fase móvil es un solvente. La muestra se deposita en un extremo sobre una tira de
papel colocando pequeñas gotas de la muestra. A continuación, se procede a evaporar el
solvente que se encuentra en el fondo del recipiente, el cual por capilaridad tiende a
ascender.
Después de unos minutos cuando el solvente deja de ascender o ha llegado al extremo se
retira el papel y se seca. Si el solvente elegido fue adecuado las sustancias que tienen color
propio se verán como manchas de distinta tonalidad separadas entre sí. Cuando los
componentes no tienen color propio el papel se somete a procesos de revelado. Hay varios
factores de los cuales depende una cromatografía eficaz, entre ellos; la elección del solvente
y el papel utilizado. Los cloroplastos poseen una mezcla de pigmentos con diferentes
colores: clorofila-a (verde intenso), clorofila-b (verde), carotenos (amarillo claro) y
xantofilas (amarillo anaranjado) en diferentes proporciones.
Todas estas sustancias presentan un grado diferente de solubilidad en disolventes apolares,
lo que permite su separación cuando una solución de las mismas asciende por capilaridad a
través de una tira de papel poroso (papel de cromatografía o de filtro) dispuesta
verticalmente sobre una película de un disolvente orgánico (etanol). Las más solubles se
desplazarán a mayor velocidad, pues acompañarán fácilmente al disolvente a medida que
éste asciende. Las menos solubles avanzarán menos en la tira de papel de filtro.
Aparecerán, por tanto, varias bandas de diferentes colores (hasta siete o más, dependiendo
del material utilizado) que estarán más o menos alejados de la disolución alcohólica según
la mayor o menor solubilidad de los pigmentos. Estas bandas poseerán diferente grosor,
dependiendo de la abundancia del pigmento en la disolución.

2. MATERIALES

 Mortero
 Tijeras
 Embudo
 5 Tubos de ensayo, Erlenmeyer 100mL, Vaso de precipitados 250mL
 Éter etílico
  Alcohol metílico puro
 Cápsula de Petri o vaso de precipitados 250mL
 Capilar o micro pipeta (cuentagotas en su defecto).
 Tira de papel cromatográfico o papel de filtro
 Espinacas u hojas verdes

3. METODOLOGIA

4. Resultados

Se utilizo un mortero para quitar las terminaciones nerviosas de la spinaca, luego haciendo
uso de un embudo de vidrio con papel filtro, con el fin de filtrar el liquido y recogiéndolo
en un matraz. Por ultimo se puso el liquido recojido en dos placas de Petri, con una parte
del papel para separar los pigmentos.

Al analizar el pigmento se observa que el que mas ocupo espacio en los papeles filtros fue
el de carateno, siguiendo por la xantofilia, la clorofilia-B y el que ocupo el minimo espacio
entre ellos tres fue la clorofila-A ya que tiene menor capacidad de solubilidad.
 (Alcantara, 2004)

Análisis de resultados

En esta práctica pudimos observar los distintos pigmentos fotosintéticos que se encuentran
dentro de las hojas atreves de la cromatologia, dando como resultado que el pigmento más
soluble en el metanol es el que forma una banda coloreada en la parte superior

5. ANEXOS
 Conclusión

Para concluir con esta práctica se logró observar cómo cambian las tonalidades de estos
pigmentos fotosintéticos que componen a las plantas y se encuentran en los cloroplastos
de la célula vegetal y les dan color al reflejar o trasmitir la luz visible además de que
son los que constituyen el sustrato fisicoquímico de la fotosíntesis.
 REFERENCIAS

Alcantara, A. M. (01 de Octubre de 2004). Separacion de pigmentos vegetales por cromatografia

sobre papel filtro. Obtenido de Prezi: https://prezi.com/5hwf_v0a7kd0/separacion-de-
pigmentos-vegetales-por-cromatografia-sobre-pa/

Guía del componente practico de química orgánica

https://prezi.com/5hwf_v0a7kd0/separacion-de-pigmentos-vegetales-por-cromatografia-
sobre-pa/

http://campus19.unad.edu.co/ecbti10/mod/folder/view.php?id=4274
https://es.scribd.com/doc/31255703/ACIDOS-CARBOXILICOS