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Para la extracción del DNA del núcleo de las células, es necesario el hidróxido de sodio (NaOH) y sodio duo-decil sulfato (SDS). Este tratamiento favorece a la ruptura de la pared y de la membrana celular, además de contribuir a la desnaturalización de las proteínas. El DNA se encuentra en el núcleo de las células asociado a proteínas. Con el fin de liberar el DNA de las proteínas, se utilizan una serie de agentes desnaturalizantes, como el perclorato de sodio y la mezcla de cloroformo y alcohol isoamilo. Después de agregar los agentes desnaturalizantes se centrifuga la solución y se obtienen dos fases: una orgánica y una acuosa se encuentra el DNA. La mezcla de cloroformo y alcohol no solo desnaturaliza las proteínas, sino que disuelve los lípidos de la muestra y aumenta la separación de las fases.
El DNA de la fase acuosa se recupera por precipitación. La precipitación con etanol absoluto en presencia de una sal es un método muy utilizado en los procesos de extracción de DNA, luego el DNA se disuelve en solución salina.
OBJETIVO
• Conocer la metodología básica para la extracción de ADN
• Adquirir destreza en la manipulación de diversas muestras biológicas para la extracción de ADN
Para la extracción del DNA del núcleo de las células, es necesario el hidróxido de sodio (NaOH) y sodio duo-decil sulfato (SDS). Este tratamiento favorece a la ruptura de la pared y de la me…